實時PCR

實時PCR是評定相當數量在一個範例的cDNA或mRNA，從電池的人口定量PCR的類型(組織或細胞培養)，或者最近甚而從單細胞。 實時通常被用於確定基因的mRNA的表達式，并且其表達式成水平(mRNA的複製號碼)在某些情況期間(例如對待電池與藥物)。  實時PCR可以被用於與疾病範例比較正常(控制)範例，產生想法至於發生與發病原理的表達式更改。  實時PCR由於其區分也用於病原生物的檢測在血液的例如病毒。

實時定量PCR的發展消滅了可變性傳統上與定量PCR相關，因而准許
PCR產品的定期和可靠的測量。

目錄

每個電池類型expressess一套mRNA分子，是公認的transcriptome。  以回應刺激，電池能通過調控這些系數的mRNA級別調控或下來調控系數例如在電池裡面的蛋白質酵素。  mRNA級別總是沒有關聯與蛋白質級別，因此某小心是必要的，然而mRNA級別鬆散一般對應於蛋白質級別。  評定某些系數的mRNA級別在一個電池裡面的使用實時pcr是將產生線索至於相當數量這些系數或蛋白質的方法。

傳統上，使用北弄髒，在電池裡面的mRNA級別被評定了。  此技術被認為一金子標準在基因表達或mRNA級別的評定，當它使用放射形同位素示蹤的探測標記核糖核酸，然後被定量使用產生非常準確讀取的閃爍計數器。 北弄髒，雖然非常準確有幾個缺點包括使用放射線。 北弄髒要求了mRNA的準確評定，并且從電池的總核糖核酸提取為了比較範例。 這是問題，因為，雖然探知方法是非常準確的，錯誤可能被引入到北弄髒(或弄髒核糖核酸的小點或者的槽)通過在總RNA/mRNA級別上的區別在範例(ie電池處理、不同的組織、不同的動物等等)之間。  它也要求了相對地要求很大數量的電池的很多核糖核酸。 最近， mRNA改進了基因量化或實時pcr方法并且是更加容易執行和不要求使用放射線。  研究員經常只得以進入對少量的電池特別是在乾細胞研究和原電池研究領域，并且實時pcr使成為可能定量從非常甚而甚而很小數量的電池和最近地單細胞的mRNA級別。  然而，實時pcr方法此極其區分使重要保護你的範例免受汙穢，將導致錯誤結果。 在實時pcr執行之前，當前實時pcr方法和系統也不要求mRNA或cDNA範例濃度的評定。

Higuchi和al.1， 2通過修建檢測PCR產品的系統作早期工作在對PCR動能學的分析
他們累計。 此「實時」系統在每種放大作用回應包括intercalator溴化乙錠，
一適應的熱量發生的熒光的cycler照耀與紫外光的範例的和檢測
一臺計算機控制的冷卻的CCD照相機。 放大作用生產增長的相當數量雙股
脫氧核糖核酸，束縛溴化乙錠，造成在熒光的一個增量。 通過密謀在熒光的增量
與週期編號，系統導致提供一張更加完全的照片的放大作用劇情
PCR比檢驗的產品累計處理在循環以後的一個固定的編號。