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分子生物學- 科學報價
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剝離的西部汙點膜
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西部汙點膜剝離的目錄
膜剝離什麼?
膜剝離是抗體撤除(包括主要和附屬) 從西部汙點膜, 允許新建主要和附屬抗體的孵出為新建蛋白質的檢驗由西部弄髒。
西部汙點剝離的申請
Agarose 膠凝體電泳法主要被使用在DNA 和核糖核酸分子的分析或分離(雖然蛋白質可能並且被分離在agarose 膠凝體), 然而分離並且允許DNAs 的特定範圍的洗淨在限制酵素消化以後。這通常被使用在克隆獲得剪切質粒,
agarose 膠凝體電泳法分離剪切傳染媒介從未割減那些。
如此剝離准許:
- 西部汙點膜重新使用檢驗為其它蛋白質的表達式
- 對檢驗為總蛋白含量
- 檢驗為非磷酸化的蛋白質(在檢驗為磷酸化的蛋白質以後) 。
膜剝離的緩衝
剝離要求特殊緩衝和孵出在烤箱。
緩衝被使用:
剝離的緩衝
- 62.5 毫米Tris-HCl (酸鹼度6.8)
- 2% SDS. (添加2 beta merceptoethanol 280 ul 或0.1 M 的最終濃度2-Mecaptoethanol) 。
剝離的協議
- 添加280 μ升2 beta □基乙醇每40 機器語言剝離的緩衝(對100 毫米的最終濃度)
-
- 洗膜在TBST (1 X 5 分鐘)
- 孵化膜在剝離的緩衝30 分鐘在50-60.C (使用熱化烤箱為這- 和保留烤箱門被結束的由於氣味)
- 洗滌在TBST (2 X 5 分鐘)
- 阻攔膜為1 h 在5% 阻攔的牛奶裡
- 跟隨正常協議為開發西部汙點。
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83
膜剝離的論壇事宜
| 線程數 |
| 線程數稱謂/海報 | 前筆過帳 | 回復 | 視圖 |
| | 05-29-2007 下午08:00 | 2 | 791 |
| | 07-19-2006 下午09:52 | 2 | 866 |
| | 06-24-2008 下午09:16 | 5 | 122 |
| | 10-31-2007 下午07:00 | 3 | 1229 年 |
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