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方式做研究將攻擊情況在最偉大的驚訝。~Celia 綠色、Science 1972 年的Decline 和秋天
一個簡單程式為蛋白質含量的確定在解決方法是由布雷得佛的布雷得佛蛋白質檢驗(布雷得佛等, 1976) 首先描述。
蛋白質含量的估計重要迅速地和準確地做在許多蛋白質研究領域。布雷得佛檢驗成為了更喜歡的方法為定量蛋白質在許多實驗室。這個技術比Lowry 方法簡單, 快速地, 和敏感的。此外, 與Lowry 方法比較, 它是依於較少干涉由公用試劑和生物範例非蛋白質要素。
布雷得佛檢驗依靠染料Coomassie 的捆綁藍色G-250 對蛋白質。
詳細的研究表明, 自由染料可能存在以pKa 值是1.15, 1.82, 和12.4 的�&不同離子形式。染料的三份被充電的表單佔優勢以酸性檢驗試劑解決方法, 更加負離子的紅色和綠色形式有absorbance 最大數量在470 毫微米和650 毫微米, 各自地。相反, 染料的更加負離子的藍色表單, 束縛對蛋白質, 有一個absorbance 最大數量在590 毫微米。
因而, 蛋白質的數量可能由確定估計相當數量染料以藍色離子形式。這由評定通常達到解決方法的absorbance 在595 毫微米。
染料看上去欣然束縛對arginyl 和蛋白質lysyl 殘滓。這種特異性可能導致在檢驗的回應上變化對不同的蛋白質, 是方法的主要缺點。原始布雷得佛檢驗顯示大差異在回應在不同的蛋白質之間。對方法的幾修改被開發克服這個問題。
但是, 這些更改常規導致經常是易受干涉由其它化學製品的一個較不健壯檢驗。結果, 原始方法由布雷得佛構想依然是最方便和廣泛最常用公式化。二類型檢驗被描述得這裡: 標準檢驗, 是適當的為評定在10 之間和100 蛋白質.g, 並且microassay, 檢測在1 之間和10 蛋白質.g 。後者, 雖然更加敏感, 並且是有傾向對干涉從其它化合物由於最大的數額範例相對染料試劑以這檢驗的形式。
參見: 布雷得佛蛋白質檢驗協議
布雷得佛, 肛門。Biochem 。72: 248, 1976 年。
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