Bioinformatics, 協議, DNA 核糖核酸蛋白質Proteomics
家庭 > 蛋白質microarrays > 蛋白質芯片附件 > index.php
家庭 > 蛋白質microarrays > 蛋白質芯片附件 > index.php
 |
|---|
 |
 |
 |
 |
 |
 |
|---|---|---|---|---|---|
蛋白質列陣協議
|
蛋白質列陣Bioinformatics |
得知蛋白質列陣 |
蛋白質列陣工具箱和產品 |
蛋白質列陣論壇 |
Proteomic 新聞 |
蛋白質和抗體Microarrays
附件
附有蛋白質堅實表面, 基體的表面必須被修改達到最大約束能力(8,27) 。 蛋白質附有芯片在蛋白質附件層(參見圖3) 。 這塊層典型地是隨申請的本質變化的一部有機影片。 各種各樣的材料被學習了包括agarose (39), 基於葡聚糖的水凝膠(40), 多孔polyacrylamide 水凝膠 親水聚合物和polyamino 酸(41) 。
一個方便附件方法使用了硝化纖維素膜或多L 賴氨酸塗上了玻璃這樣蛋白質能被動地被吸收表面通過未指明的交往(34,42,43) 。 附上蛋白質束縛表面在任意取向, 可能被洗滌在嚴密洗滌的情況下。 但是, 噪聲級通常是高由於未指明的absorption/adsorption 。
一個更加特定和更強的附件由創建達到易反應的表面在共價地能交鍵對蛋白質的玻璃(31,36,26) 。 bifunctional 硅酮cross-linker 被使用形成自已被彙編的單層(SAM), 有一個功能組起反應以羥基組在玻璃玻璃表面, 並且是自由起反應以主要胺物組蛋白質或可能是更加進一步化工被修改到達最大特異性的其他組(44,45) 。 其它差異是金子上漆的玻璃(46,47) 。 金子上漆的芯片好處是, SPR 和質量光譜可能集成當探知方法監控回應的動力學, 並且辨認被獲取的分子。
上述共價cross-linking 途�&然而有不利。由於這樣的事實易反應的ligands 並且存在在蛋白質旁邊鏈子它是可能的, 他們的任意附件也許修改蛋白質的當地確認書, 減少蛋白質的活動, 或使他們不能進入對探針(8,27) 。
為了安置蛋白質uniformily 從芯片的表面, 蛋白質也許被熔化與高親合力貨簽在他們的氨基或carboxy termini 。 以這個方法, 被固定的proteins/antibodies 是可能保留在他們的當地相應一致, 如此允許analytes 對蛋白質的有效的站點的高效率的存取。 這個方法是第一成功被展示與5800 融合蛋白質的附件包含他的貨簽一個鎳上漆的載玻片(26) 。 其它親合力方法譬如glutathione/GST 並且被使用了(48) 。
Streptavidin 基於的鉗製方法廣泛也被使用附有任何biotinylated 生物要素對列陣表面(49) 。
芯片支撐材料重要因為蛋白質對physiochemical 屬性是高敏感的。 例如, 極性列陣化工被對待束縛對親水蛋白質然而這樣表面是不合適的為細胞膜蛋白質(即G 蛋白質耦合的感受器官) 如同他們擁有疏水域(9) 。
蛋白質不表現像核酸, 並且不同的蛋白質將表現用不同的方式何時暴露在同樣表面化學。 不同的型表面化學因而將促進一些蛋白質的留成和將導致其他人的活動變性或損失。 所以, 表面化學適當的選擇是重要因為這將允許不同的型被固定的蛋白質保留他們的附屬和三重結構, 並且因而他們的生物活動。 這個問題被擴大化當不同的地點的數量在芯片增量, 作為那裡也許是100 種不同方式固定100 不同蛋白質為了獲得所有蛋白質的適當的可摺�&和功能。 並且一個重大問題是因為多數蛋白質的功能當前是未知, 那麼那裡是沒有方法實際上測試是否他們是工作在芯片(7) 。
其次: 蛋白質芯片發運方法
回到:
寄發這頁到朋友
![[أربيك]](http://www.molecularstation.com/translate/images/flag_ar.gif){kind=small}
