 |
|---|
但至於為某一真相, 人工不知道它, 亦不他將知道它; 不神, 亦不我講話的所有事。並且既使偶然他將說出最終真相, 他他自己不�&知道它; 為全部是而是猜測一個被編織的萬維網。~Xenophanes (c. 570-c 。480 BCE) 希臘哲學家。
在溫度和離子濃度的條件下被查找在電池裡, DNA 被維護在一個雙重(二擱淺的) 結構由氫鍵, 表單betwen A 和T 基礎和在各條子線的G 和C 基礎。DNA 套樓公寓可能被弈質入唯一子線由加熱他們, 通常在稀釋鹽水(即, 0.01 M NaCl), 或由提高酸鹼度在11 之上。如果溫度降低和離子濃度在解決方法被提高, 或如果酸鹼度被降下對中立地位, 在和G-C 基本的成對改革在補全唯一子線之間。
這個進程去由許多名字: renaturation, reassociation, 雜交, 鍛煉。在核酸混合物, 唯一補全唯一子線(或子線包含補全地區) 將重結合; 區域他們的reassociation 是實際上未受影響的由noncomplementary 子線出現。這樣的分子雜交可能發生在或DNA 或核糖核酸二條補全子線之間, 或在核糖核酸子線和DNA 子線之間。運用分子雜交在特定DNA 克隆的檢測, 唯一擱淺的DNA 從再組合DNA 分子附有堅實技術支持, 公用硝化纖維素補白或被對待的尼龍膜。當解決方法包含single0stranded 核酸被烘乾在這樣膜, 唯一子線成為不可逆地一定對葉子大多基礎可利用為雜交對一條補全子線的堅實技術支持有些。雖然化學如果這不可逆的捆綁不是好瞭解, 程式是非常有用的。膜然後被孵化在解決方法包含是補全對一些核酸一定對膜放射性地的被標記的唯一擱淺的DNA (或核糖核酸) 。
在雜交情況下(在中立酸鹼度, 40-65 C 附近, 0.3-0.6 M NaCl), 這根被標記的探針雜交對補全核酸一定對膜。不雜交的任一根超額探針沖走, 和被標記的雜種由補白的自動射線照像術檢測。再組合lamda virions 當前在E. 桿菌草坪的匾調用到一個尼龍膜被安置膜在陪替式培養皿的表面。許多病毒微粒在各塊匾吸收對膜的表面, 但許多virions 保留在匾在營養瓊脂的表面在陪替式培養皿包含很大數量各自的lamda 克隆被再生產在膜的表面。
原始陪替式培養皿被冷藏存儲lamda 克隆的收集。膜然後被孵化在一個鹼性解決方法, 打亂virions, 發行和弈質被濃縮的DNA 。膜然後被烘乾, 修理再組合lamda DNA 對膜的表面。其次, 膜被孵化以一根radiolabeled 探針在雜交情況下。Unhybridized 探針沖走, 並且補白被服從對自動射線照像術。
一個地點的appearence 在autoradiogram 表明再組合lamda 克隆的出現包含DNA 補全對探針。地點的位置在autoradiogram 對應於位置在那特殊克隆形成匾的原始陪替式培養皿。因為原始陪替式培養皿仍然包含許多infectioua virions 在各塊匾, 病毒微粒從辨認的克隆可能被收回為替換由排列autoradiogram 和陪替式培養皿和去除病毒微粒從克隆對應於地點。一個相似的技術可能是應用的為篩選質粒圖書館在E.coli 電池裡。
寄發這頁到朋友
![[أربيك]](http://www.molecularstation.com/translate/images/flag_ar.gif){kind=small}
