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生活長期是短小, 藝術。~Hippocrates c.460 - 357 BC 。希臘醫師和醫學的父親。
氨基酸結構的peptide 是堅定的。 peptide 被水解入其構成氨基酸由加熱它在6 N HCl 在110.C 24 時數。 斯坦福Moore 和威廉斯坦表示, 氨基酸在水解物裡可能由ionexchange 色譜法分離在列sulfonated 多苯乙烯和由起反應定量他們與ninhydrin 。
氨基酸對待了這方式授予一個強烈的藍色顏色, 除了果仁糖, 給一個黃色顏色因為它包含一個附屬氨基組。 氨基酸的濃度在解決方法與解決方法的光學absorbance 是按比例在熱化以後它與ninhydrin 。 這個技術可能檢測一微克(10nmol) 氨基酸, 是關於金額當前在thumbprint 。
作為一點像nanogram (10 pmol) 氨基酸可能被檢測通過fluorescamine, 起反應以一個高螢光產品的氨基組。 氨基酸的身分由其elution 數量顯露, 在緩衝的數量□去□常從列取消氨基酸。
蛋白質或peptide 的氨基終端殘滓可能由標記辨認它與形成一個穩定共價連結的化合物。
Fluorodinitrobenzene (FDNB) 第一次被使用了為這個目的由Frederick Sanger 。 Dabsyl 氯化物現在常用因為它形成可能被檢測以高敏感性強烈地的色的衍生商品。 它起反應以一個uncharged a-NH2 組形成是穩定在情況下水解peptide 債券的磺胺衍生商品。
雖然dabsyl 方法為確定氨基終端殘滓是敏感和強有力的, 它無法一再被使用在同樣peptide 因為peptide 完全被貶低在酸加水分解步驟。 Pehr Edman 構想了一個方法為標記氨基終端殘滓和劈開它從peptide 沒有打亂peptide 債券在其它氨基酸殘滓之間。 Edman 退化從peptide 的氨基末端連續取消一殘滓一次。 Phenyl isothiocyanate 起反應以peptide 的uncharged 終端氨基組形成phenylthiocarbamoyl 衍生商品。 然後, 在mildy 酸性情況下, 終端氨基酸的一件循環衍生商品被解放, 留下一原封peptide 由一氨基酸變短。
對蛋白質結構的分析被sequenators 的發展明顯加速了, 是為氨基酸順序的確定的自動化的票據。 在一液體階段的sequenator, 蛋白質薄膜在一個轉動的圓柱形杯子被服從對Edman 退化。 試劑和提取溶劑通過在蛋白質被固定的影片, 並且被發行的PTH 氨基酸由高壓液相色譜辨認(並且叫做高性能液相色譜, HPLC) 。
Edman 退化的一個循環被執行在少於二時數。 由被重複的退化, 大約五十殘滓氨基酸順序在蛋白質可能是堅定的。 Gas-phase sequenators 可能分析peptides 和蛋白質的picomole 數量。 這種高敏感性使它可行分析蛋白質範例的順序被洗脫從SDS polyacrylamide 膠凝體的一個唯一範圍。
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