粗劣的增殖率在peptide 綜合期間

yuanhenglidlut · #1 (**permalink**) 04-18-2008, 上午10:30

我現在綜合一循環peptide (32 氨基acide 殘滓) 包含二硫化物債券由SH 二形成Cys. 工友以前綜合了peptide 的My 。他們遇到的問題是, 各批他們被顯示的粗劣的增殖率。對線性前體的RP-HPLC 分析顯示了一個小峰頂前面或在主要峰頂之後。因為我綜合了許多peptides, 幾乎我綜合每peptide 的RP-HPLC 顯示了這種相似的現象。這偉大影響了產品的產量。
我描述在正常之上的現象? 我可以做什麼或什麼協議我可以採取避免小峰頂的形成前面或在主要峰頂之後?

adrianandreica · #2 (**permalink**) 04-18-2008, 下午12:05

峰頂在可能是cyclic 和那個在之前可能以後是二聚體。設法使用輕微地酸性情況當溶化peptide (0.1% TFA) 並且不要讓它站立在解決方法為久時間在洗淨之前和以後。

musgun · #3 (**permalink**) 04-18-2008, 下午06:28

做環合回應以低peptide 含量也許幫助也是。我使用0.1 mg/ml peptide 在0.1 M 鈉醋酸鹽酸鹼度8.5 裡並且這優良有效為我有synhtesized 的幾乎所有peptides 。

AplaGen · #4 (**permalink**) 05-05-2008, 下午11:46

親愛的yuanhenglidlut,

我假設您談論您的線性peptide 的洗淨。您應該簡單收集邊產品和分析他們。這能真正地是循環和由兩部分組成的peptide 當adrianandreica 提及了。它也許甚而是不同事, 即isopeptides 。沒有對邊產品的分析你不能真正地幫助您。

我們經常看小峰頂在產品- 前後我通常愉快如果他們停留小。小峰頂怎麼可能影響整體產量?

好運氣,

AplaGen

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