數量損失在PCR 期間?!!

halramin · #1 (**permalink**) 06-12-2008, 下午07:22

如此我運行我的PCR 管為30 個循環以15.ul 的數量。所有加蓋緊緊, 但我最終獲得8-10 ul 數量在PCR 以後。我設法轉動他們在下但□什麼更改了。任何想法? 數量太小嗎?

danfive · #2 (**permalink**) 06-12-2008, 下午07:57

我看見了這, 您有結露在管上面, 使用MJ 研究設備碰巧嗎?
解決得到更好的適應在thermocycler 和管的頂層之間-- 由使用容易地做dome-shaped PCR 管。

halramin · #3 (**permalink**) 06-13-2008, 下午09:00

是, 上午使用MJ 微型thermocycler 。我使用緊緊適合在頂面pf 管的一個激昂的盒蓋。但我發現我能減少數量損失由分離的管在空缺數目之前他們。但仍然, 有回合20-30% 數量損失從15.ul 管。

arammik · #4 (**permalink**) 06-18-2008, 下午07:24

嘿halramin

我總�&推薦atleast 20 uL 的回應數量。保留105.oC 一個激昂的盒蓋和使用平的蓋帽管如果您使用激昂的盒蓋。並且, 在一些設備裡喜歡數量, 盒蓋壓力能是一少許太高, 造成管翹曲在嘴附近, 在回應期間, 或許造成一個出氣孔為蒸發。如果盒蓋壓力可能手工被設置, 那應該是公正偉大的。但雖然人們說15 uL 是好, 我�&推薦20, 特別是因為您有一些麻煩。

小心和希望它解決好!

Brotec · #5 (**permalink**) 06-27-2008, 上午09:00

避免蒸發, 添加10 .l 礦物油來井。那不給有洗淨的問題與QiaQuick 或其它工具箱。好想法?

admin · #6 (**permalink**) 07-04-2008, 下午01:39

那些是好觀點感謝Brotec 。

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