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生活的最哀傷的方面現在是, 科學快速地�&集知識比社團聚集智慧。~Isaac Asimov, Isaac Asimov 的登記科學和本質Quotations 1988 年
酵素被鏈接的免疫吸附劑檢驗, 或ELISA, 是一個生物化學的技術使用主要在免疫學方面檢測抗體或抗原的出現在範例。ELISA 被使用了作為一套診斷器械在醫學並且植物病理學, 並且質量管理報到各種各樣的行業。用簡單術語, 在ELISA 每未知的數量抗原被添加表面, 並且特定抗體然後被洗滌在表面以便它可能束縛對抗原。這抗體與酵素被鏈接, 並且在最終步驟酵素可能轉換成某一可發現的信號的物質被添加。因而在熒光情況下ELISA, 當光發光在範例, 所有antigen/antibody 複雜將發螢光以便數量抗原在範例可能被評定。
執行ELISA 介入至少一抗體以特異性為特殊抗原。範例以未知的數量抗原non-specifically 被固定在堅實技術支持(通常多苯乙烯microtiter 板材) 或(通過吸附對表面) 或特定(通過獲取由其它抗體特定對同樣抗原, 在"三明治" ELISA) 。在抗原被固定之後檢測抗體被添加, 形成複雜與抗原。檢測抗體可能與酵素共價地被鏈接, 或罐頭由與酵素被鏈接通過bioconjugation 的附屬抗體檢測。在各個步驟之間板材典型地被洗滌以一個溫和的洗滌劑解決方法去除不特定一定的所有蛋白質或抗體。在最終洗滌步驟板材之後由添加開發一個enzymatic 基體導致一個可視信號, 表明抗原的數量在範例。更舊的ELISAs 運用產色素基體, 雖然更加新建的檢驗使用fluorogenic 基體以更高的敏感性。
由於ELISA 可能執行評估或抗原出現或抗體出現在範例, 這是一個有用的工具為確定清液抗體濃度(譬如與HIV test[1 ] 或西部尼羅病毒) 和並且為檢測抗原出現。它並且查找了申請在食品工業在檢測潛在食物變態反應原譬如牛奶, 花生, 核桃, 杏仁, 並且eggs.[2 ] ELISA 可能並且被使用在毒素學方面作為一個迅速根據推定的屏幕為藥物某些組。
ELISA 測試, 或酵素immunoassay (EIA), 是第一試鏡頭公用被使用為HIV 。它有一種高敏感性。在ELISA 測試, 人員的清液被稀釋400 摺�&和適用於HIV 抗原附有了的板材。如果抗體對HIV 是存在在清液, 他們也許束縛對這些HIV 抗原。板材然後被洗滌去除清液的所有其它要素。特殊準備的"附屬抗體" — 束縛對人的抗體的抗體 — 然後適用於板材, 被其它洗滌跟隨。這附屬抗體與酵素事先化工被鏈接。因而板材將包含酵素以相當數量附屬抗體的比例一定對板材。一個基體為酵素是應用的, 並且催化由酵素導致一個變化在顏色或熒光上。ELISA 結果被報告作為編號; 這個測試的最有爭議的方面確定"切除" 點在一個正和負結果之間。
確定分界點一個方法是由與一個已知的標準的比較。例如, 如果ELISA 測試將被使用在工作場所藥物審查, 切除濃度(即, 藥物50 ng/mL) 將被設立和包含analyte 的那濃度的範例將準備。生成一個信號比知道的範例稱"正的未知比知道的範例叫做" 負的生成一個信號較不正的正"和那些。
在EIA/ELISA 的發展之前, 唯一的選項為�&辦immunoassay 是放射免疫測定、一個技術使用放射性被標記的抗原或抗體。在放射免疫測定, 放射線提供表明的信號是否特定抗原或抗體是存在在範例。放射免疫測定第一次被描述了在紙由Rosalyn Sussman Yalow 和Solomon Berson 被發布在1960[3 ] 。
由於放射線造成健康威脅, 更加安全的替代被尋找了。適當的替代對放射免疫測定�&替代一個非放射性的信號在放射性信號位置。當某些酵素(譬如peroxidase) 起反應與適當的基體(譬如ABTS 或3,3’, 5, 5’- Tetramethylbenzidine), 他們能導致變化在顏色上, 可能被使用作為信號。但是, 信號必須同抗體或抗原聯繫在一起出現, 是為什麼酵素必須與適當的抗體被鏈接。這鏈結處理由Stratis Avrameas 和G.B. Pierce[4 獨立開發了] 。因為它是必要去除任一未捆綁的抗體或抗原由洗滌, 抗體或抗原必須被修理對容器的表面, 即免疫吸附劑必須準備。技術完成這由Wide 和Porath 發布了在1966[5 ]
1971 年, 彼得·Perlmann 和Eva Engvall 在斯德哥爾摩大學在瑞典, 以及安東Schuurs 和Bauke van Weemen 在荷蘭, 綜合這知識入方法執行EIA/ELISA[6][7 ] 獨立的被發表的論文
ELISA 檢驗錄影
ELISA 檢驗錄影。Chlorpyriphos 甲基的確定在麥子範例由酵素鏈接了免疫吸附劑檢驗ELISA 從zuhaitz77 。
添加: oBWhat
貨簽: elisay 檢驗酵素被鏈接的免疫吸附劑
日期: 2008-05-04
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