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作再次培養電池- 細胞培養

細胞培養

電池亞文化群協議

作再次培養電池

 

得到DMEM 媒體4C; 胰蛋白20C; BSA-20C;

投入在DMEM 36mL 入圓錐形管塑料

添加BSA 媒體4mL 來36mL DMEM;

得到注射器和補白;

吮媒體與注射器。  添加補白。 

推出媒體通過補白在注射器。

重複得兩次得到所有數量。 

投入入新建塑料管圓錐形。 

去除老媒體由傾銷入燒杯; 不要使用吸氣器(得到汙穢!!)

添加3mL typsin 來文化。  胰蛋白以拉扯電池文化容器。

投入容器入孵養器。  等待2 分鐘; 去掉;  查找入顯微鏡。 

設法得到較少叢。  更加各自的電池。

取消大多數胰蛋白由傾銷入燒杯。

投入  回到孵養器。頻繁地檢查。

摑容器在邊檢查底層較少叢; 查找入顯微鏡。

當參見許多各自的電池浮動; 偉大!

添加媒體來更大的容器; 1:5/ 1:3 稀釋(3-5 個容器更大) 。

添加10mL 來(T75)large 容器, 5mL 對(T25)small 容器。

吮在多數之外(電池5mL 從T25) 。添加來T75 。

把一些電池留在在小容器裡。  添加媒體來小容器。  報到顯微鏡單細胞;  孵化在37C 孵養器裡。 

 

參見其它電池協議在我們的 細胞生物學和細胞培養協議目錄。