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分子生物学- 科学报价

科学是无知地势。~Oliver Wendell Holmes, Sr., 医疗杂文1883 年


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siRNA transfection 协议: Transfect 6 块好的板材

申请第一张siRNA 处理当电池是60% 汇合(评定confluency 与电压表); 在星期五在星期三镀1.5x10^6 电池, transfect 。为每个井:

稀释2.5 ug siRNA (20uM 是近似地0.26ug/ul 。9.62 ul 每很好一块6-well 板材) 以培养基对100 ul 的一个最终数量。 Use 障碍吸移管要诀。您能做主要混合如果所有井将是transfected 与同样siRNA 。做这在一支不育的被真空加热的塑料管。
添加12 ul RNAiFect (Qiagen - 或其他核糖核酸transfection 试剂, 看制造商的协议) 每siRNA mastermix 管和柔和地混合。
孵化15 分钟在室温允许复杂形成在siRNA 和油脂之间。
吐气媒体从电池和添加900ul 新媒体来每个很好。
添加siRNA 混合物(112 ul 每井) drop-wise 当柔和地打旋的板材。

也参见我们的 siRNA 和RNAi 页

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