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研究是攀登的进程胡同看如果他们是瞎的。~Marston 软化剂
稳定transfection 是基因被介绍入电池被保留在再生产之外transfection 的方法。稳定transfection 查找协议这里。
| Antisense 低聚核苷酸Transfection 未加工的264.7 电池与FuGENE 6 在24-Well 盘 - http://www.signaling-gateway.org/data/cgi-bin/ProtocolFile.cgi/afcs_PP00000261.pdf?pid=PP00000261 AfCS 运用antisense 技术操作信号蛋白质表达式在未加工264.7 巨噬细胞象电池线路。这可能由基因特定antisense 低聚核苷酸达到(ASOs 的) transfection 。以下程序介入ASOs 的transfection 入未加工的264.7 电池使用FuGENE 6 transfection 试剂。随后, 被隔绝的总核糖核酸或蛋白质从这些transfected 电池可能被使用估计mRNA 或蛋白质击倒的级别, 各自地。- [读的 Antisense 低聚核苷酸Transfection 未加工的264.7 电池与FuGENE 6 在24-Well 盘] |
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DNA Transfection 由Electroporation - http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/2/pdb.prot3751 搏动的电场可能被使用介绍DNA 入各种各样的动物电池。Electroporation 运作很好以是折射的对其它技术的电池线路, 譬如钙磷酸盐Dna coprecipitation 。但, 和以其它transfection 方法, 优选的条件为electroporating 的DNA 入未经考验的电池线路必须实验被确定。- [读的 DNA Transfection 由Electroporation] |
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CHO Lec 电池协议稳定Transfectant 的设置 - http://www.cbrinstitute.org/labs/springer/protocols/jun_CHOlec.html CHO Lec3.2.8.1 电池有4 个独立变化在N 和O glycosylation 路。当开化与阿尔法葡糖苷酶I 抗化剂N 丁基deoxynojirimycin, 糖蛋白被生产在CHO Lec3.2.8.1 电池里是完全地易受Endo H 消化。Endo H 劈开chitobiose, 留下唯一N 被链接的N-acetylglucosamine 每是理想的为蛋白质溶解度和特殊carb 蛋白质交往维护, 譬如在第一N 乙酰基氨基葡萄糖残滓之间和tryp 的站点。- [CHO Lec 电池协议稳定Transfectant 的读的设置] |
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四圜素作为管理者可诱导基因表达III - http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/2/pdb.prot3958 稳定transfected 电池, 被生成在程序的第一二个阶段, 导致为目标基因的表达式。在收获和病势渐退以后, lysates 被SDS-PAGE 和immunoblotting 分析。- [读的 四圜素作为管理者可诱导基因表达III] |
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四圜素作为可诱导基因表达协议管理者 - http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/2/pdb.prot3986 协议使用transcriptional trans 活化计tTA 驱动其自己的表达式和那目标基因的一个autoregulatory 系统。程序的第一阶段描述怎么生成表达或tTA 单独或tTA 和四圜素被调控的目标基因NIH-3T3 电池的稳定线路。- [读的 四圜素作为可诱导基因表达协议管理者] |
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四圜素作为管理者可诱导基因表达协议II - http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/2/pdb.prot3957 程序的这个阶段描述transfection 与电池线路目标基因已经表达可诱导tTA 。在这实例, 目标基因是transfected 在运载puromycin 抵抗作为一个可选择的标记的质粒。- [读的 四圜素作为管理者可诱导基因表达协议II] |
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