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科学总是错误的。它从未解决一个问题没有创建十更。~George Bernard Shaw
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琼脂或琼脂(从Malay 词含义"蔬菜"), 被使用在一坚实培养基为细菌学工作做准备的物质, 是一条赞成输送管准备从各种各样的海草被查找在印度洋附近和在中国和日本水域中。这类型海草有几个公用名字, 当锡兰或Jaffna 青苔、孟加拉鱼胶, 等。各种各样的种类被使用为食物并且贸易是可观的。
Payen, 法国化学家-(about 1859), 获得了琼脂果冻从海草, Gelidium corneum, 以以下方式: 海草被允许站立有一段时间了在盐酸的冷的稀溶液; 酸被漂洗取消了多次用水, 那么海草被安置了在氨的冷的稀溶液; 其次氨被被重复的漂洗取消了与冷水。在这个进程期间, 海草丢失了53% 其重量在矿物盐、上色问题, 和有机组成部分。剩余部份煮沸了在水中, 在哪些进程期间菜果冻被提取。解决方法因此获得倾吐了, 留下无用的沉积后边。这果冻是相同在存在在菜组织的构成方面象; 它象胶原在明胶的化工未被更改, 准备。商业琼脂由蒸发大概准备这个解决方法to.dryness 通过不同的平均值。
琼脂作为长期, 苗条, 灰色白色小条作为块通常进入细菌学家的手, 或, 或更加特别近年来, 以欧洲制造的形式一灰色白色战俘der 。
琼脂, 与明胶对比, 是碳水化合物, 即, 它包括碳、氢和氧气的组合唯一。氮气跟踪是存在作为杂质。其基本的constit uents 的上述定性确定由Hueppe 做了由Payen, 由Parumbaru 和, 做他们的确定在琼脂由不同的来源。只要能被查明, 其经验主义的配方未被调查在任何程度上。
象明胶, 然而, 琼脂是反演性胶体。它浸泡在冷水里, 溶化在热水在一长式煮沸以后对一个无味和无气味的清楚的解决方法, 和坚实ifies 在冷却对更或较少不透明的果冻。其含水解决方法是中立或几乎中立的对酚酞类; 但是, 下落或二第二十种正常钠含水物是充足使桃红色颜色可认识。
琼脂胶质属性被普通微生物的活动象那些明胶不毁坏被长式继续的热化在高温, 亦不。上述属性, 然而, 被影响和也许被琼脂被溶化液体的回应完全削弱。
液体的回应, 即, 是否它酸或碱性, 影响琼脂至于其可溶性、扎实、颜色、透明度、滤运领和相当数量condensa tion 水。如果琼脂被溶化在酸度的液体等效与0.1% HC1, 琼脂非常欣然溶化, 快速过滤得, 总值滤出液是不变硬在冷却的一个light-yellow, 透明, 溜滑, 含水解决方法。如果与氢结合的氯的酸的更小的百分比被使用, 固体化发生(在40 C 以下。) 但果冻"不会站起来" 和是因此无用为琼脂偏锋或板材文化。很多精读densation 水并且是存在。
如果琼脂被溶化在微弱的碱性或中立汤, 慢慢地过滤和快速变硬在40 C., 对一非常坚实, 不透明的厚实, 红棕色, 黏性液体被获得, 烘干果冻, 有但少许结露水; 它保留其形状很好在偏锋和在板材里。因而琼脂的值作为一个坚实培养基被上升或降低根据强碱性或酸度cjegree 。
它必须是着名另外, 然而, 当琼脂变硬的属性被酸超额的出现一次毁坏在其解决方法, 这个属性可能由中立化从未收复与碱; 酸每manently 毁坏胶体的反演性。
琼脂melting-point (1.5% 在中立解决方法) 是97 C. 和虽然其变硬的点是在40 C., 何时一旦它变硬了它将站起来在温箱在温度50 C 。为细菌学目的, 唯一保留流动性在从38 到40 C. Agar 保留流动性只在一个温度在这点之上会是太热的当在一个可变的状态至于使用的那份琼脂的表单可能被使用; 有机体的生命力被介绍被高温会削弱或毁坏了。
困难遇到在一个坚实培养基的准备从琼脂, 由于其缓慢的可溶性、黏度和结果缓慢的滤运领。其解决方法(消化) 被影响, 依照被提及上面, 由长式热化在热水锅、蒸汽消毒器、autoclav, 或自由火焰。时间必需为完全消化取决于三件事: 琼脂被溶化液体的回应, 琼脂百分比目录, 和方法溶化。琼脂解决方法的回应的影响被对待了以上。至于常规文化使用, 然而, 普通琼脂被做+15 更加充分的缩放比例(琼脂变硬有困难在+30 之上更加充分的缩放比例) 。
百分之一琼脂更加容易地是可溶物在同等情况下比一更高的百分比。一和一半百分比是金额被使用在普通琼脂媒体, 给有些更加僵硬和因而更加中意的果冻。
琼脂最迅速地被消化在自由火焰。如果充足地没加热, 在琼脂的滤清和绝育以后由断断续续的方法, 一丛毛状precip itate 频繁地出现在早先清楚媒体。这可能由服从做消失在许多情况下对autoclav (120 C 的温度。15 Ibs.) 。
琼脂为培养基应该是整个地清楚当液体, 和同类地不透明透亮当固体; 它应该有translucence 充足允许深刻的殖民地在板材或刺中文化欣然被观察; 它不应该包含丛毛状物料, 沉积, 或棉花或滤纸张, 作为这些微生物的更加后面的典型的殖民地发展和, 对无经验, 也许某个时候弄错为殖民地。
在第一方法曾经被使用为做琼脂培养基, 而不是过滤热的琼脂通过滤纸、吸收剂棉花, 或石棉, 它让冷却, 在哪些进程期间沉积被结算对底层; 当固体沉积被切除了。这个方法不是中意的, 因为总值琼脂的清楚会取决于冷却的费率; 更慢冷却, 沉积作用更加完全地会发生。
琼脂不是食物为微生物总之, 即, 它由多数细菌消化酵素象明胶不影响, 。但是, 有液化琼脂的力量, 在之中是B. gelaticus n. sp. 的几细菌知道(gran) 并且Bad. Nenckii, 其中之二找到, 和会被预计, 在海水里。琼脂的这种compara tive 惰性使它重要为准备, 坚实综合媒体, 值的也许是en hanced 由服从商业琼脂对自然发酵在哪个进程期间用能食物物质所有跟踪由微生物用完当前。(Beijerinck 。)
琼脂有用特殊在微生物耕种必须被举办在一个温度在明胶之上melting-point 的细菌学工作。这个功能使被采取了在医疗细菌学方面的了不起的大步成为可能, 许多致病性细菌可能被隔绝和增长只有困难在tempera tures 在那机体之下。
执行9 。营养琼脂的准备
用具。3.5 公升玛瑙商品桶; 15 gms 。琼脂; 10 gms 。胨; 5 gms 。盐; 10 gms 。蛋卵蛋白(或一个蛋); 500 c.c. 不育的肉注入; 500 c.c. 自来水; 滴定法用具; N/20 NaOH; N/l NaOH; 酚酞类(指示符); 蒸馏水; 大漏斗; 被打褶的滤纸; 装载的漏斗; 不育的试管; 不育的公升烧瓶; 粗糙的平衡; 大煤气喷燃器; 1 公升量杯; 用具为蒸汽绝育。
方法。1 。在一个3 公升玛瑙商品桶安排15 gms 。琼脂在500 c.c 。自来水。
2 。洗涤琼脂很好, 分离细片和squeez ing 它通过手。
3 。倾析肮脏的水, 评定金额倾吐
42
常规微生物学
; 用同样相当数量干净的自来水替换。
重复。
4 。溶化在自由火焰和煮沸五分钟, 经常搅动。solu tion 必须是整个地从琼脂解脱团。
5 。加1% Witte 的胨和0.5% 盐来煮沸的琼脂。
6 。对500 c.c 。肉在融合添加10 gms 。与100 c.c 很好被混合了的蛋al bumen 。自来水。(投入蛋卵蛋白在翻转者和加足够的水形成粘贴。搅动直到光滑和然后加保留ing 水。一个蛋; 井被摔打,
图9 。热水漏斗为也许被替代。) 混合所有过滤的琼脂或明胶。周到地
7 。慢慢地倾吐熔化琼脂混合物入肉注入, 经常搅动。热在autoclav 在120 C. 四十五分钟或一时数在流的蒸汽。
附注。时期为这热化也许被加长对好处, 但从未被变短。如果琼脂充足地未被加热在滤清之前, 丛毛状沉淀物将形成在管在加热在流的蒸汽。这也许由短时间加热在许多情况下造成消失在autoclav 在15 Ibs 。
8 。滴定与N/20 NaOH 。
9 。调整媒体的回应到+15 与正常NaOH 或正常HC1 。Retitrate 和重调回应如果需要。
10 。Counterpoise 和注意重量。
11 。煮沸十五分钟在自由火焰, 搅动stantly 精读,
DUNHAM 的胨解决方法43
12 。均衡和组成任一损失在重量与煮沸的蒸馏水。
13 。过滤煮沸的热的通过被打褶的滤纸早先被洗涤与开水。通过滤出液通过同样纸直到清楚。
14 。装载60 到70 不育的试管, 使用大约8 c.c 。媒体为各支管。
15 。加热在流的蒸汽二十分钟在三个suc cessive 日。
16 。在最终热化的末端, 安置琼脂管在一个倾斜的位置变硬(不要允许媒体接触插件) 以便大表面是前sented 为微生物的耕种。这些叫做琼脂偏锋。
附注。如果琼脂管将被使用只为琼脂偏锋, 无足轻重媒体必要在管比当他们将被使用为镀层。
17 。消炎一个大烧瓶琼脂, 热三十分钟在四个连续日。
史密斯, ERWIN F.: 细菌关于植物病。卷。I,
页31-36 。几个例证。SCHULTZ, N. K.: Zur Frage 冯der Bereitung einiger Nahrsubstrate 。
分。F. Bakt 。I. Orig., Bd 。10 日1891 年, p. 57 。
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