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DNA 转换

转换在细菌

1928 年格里菲斯打了基础为DNA 的确定作为基因以他的实验在转换在细菌pneumococcus, 现在以链球菌pneumoniae 著名。  狂放类型有机体是一个球状电池由一个黏液上漆的胶囊围拢。  电池形成大, 闪耀的殖民地, 被描绘象光滑。  这些电池是剧毒能导致致死的传染在射入入鼠标。  S. pneumoniae有些突变体 张力 丢失了能力形成胶囊。  结果, 它增长作为小, 概略的殖民地。  它更加重要地avirulent 因为它没有防护外套, 它由主机s’白细胞吞噬在它可能足够激增造成任一损害之前。关键查找格里菲斯’s 工作是, S.pneumoniae 热被杀死的剧毒殖民地 能变换avirulent 电池对剧毒那些。  不热被杀死的剧毒细菌亦不活avirulent 部分能独自导致致死的传染。  一起, 然而他们是致命的。  以某种方法剧毒性格通过了从死的电池对活, avirulent 部分。  转换不是临时; 能力做胶囊和因此杀害主机动物, 一次商谈在avirulent 细菌, 通过了对他们的后裔作为可遗传的性格。  换句话说, 基因为剧毒, 错过在avirulent 电池, 以某种方法被获取了在转换期间。  这意味着, 变换的物质在热被杀死的细菌大概是基因为剧毒。  缺掉难题是变换的物质的化工本质。

Avery 、1944 年MacLeod 和McCarty 供应了缺掉片断。  他们使用了一个转换测试相似到那个格里菲斯介绍了。  首先, 他们从解压缩取消了蛋白质与有机溶液和发现解压缩仍然变换了。  其次, 他们服从了它对消化与各种各样的酵素。  胰蛋白和糜胆白酶, 毁坏蛋白质, 没有作用在转换。  两者都不做了核醣核酸, 贬低核糖核酸。  这些实验排除蛋白质或核糖核酸作为变换的物料。  另一方面, Avery 和他的工友发现酵素deoxyribonuclease (DNase), 划分DNA, 毁坏了剧毒电池解压缩的变换的能力。  这些结果建议, 变换的物质实际上是DNA 。直接physical-chemical 分析支持了假说, 被净化的变换的物质是DNA 。  分析工具Avery 和他的同事被使用是象随后而来:

1. 离心器处理:  他们转动变换的物质在高速离心器(一台非常高速离心机) 估计其范围。  物料以变换的活动sedimented 迅速地(迅速地行动朝离心机管的底层), 建议非常高分子重, 典型DNA 。
2. 电泳法:  他们安置变换的座席在一个电场看多么它迅速地行动了。  变换的活动有相对地高流动性, 还特性DNA 由于其高charge/mass 比率。
3. 紫外吸收分光光度学: 他们安置变换的物质的解决方法在分光光度表看什么样的紫外光强烈是absorbd 。  其吸收光谱符合了DNA 。  那是它吸收的光强烈有波长大约260 毫微米, 与蛋白质对比, 最大地吸收在280 毫微米。
4. 基本的化学分析:  这产生了一个平均nitrogen/phosphorus 比率1.67,  关于什么你会期待为DNA, 在两个要素上是富有的, 但浩大地降下值被预计为蛋白质, 在氮气但贫寒上是富有的在磷里。  轻微的蛋白质污秽会提高nitrogen/phosphorus 比率。