Welcome to Molecular Station! Välkommen till Molekylär Station!

You have to register before you can post on our forums or use our advanced features. Du måste registrera dig innan du kan posta i vårt forum eller använda vår avancerade funktioner. Register Now! Registrera dig nu! Its Free and Fast! Dess fria och Snabbt!

Already registered? Redan registrerad? Login now below. Logga in nu nedan.

User Name: Användarnamn:

Password: Lösenord:

Remember Me? Kom ihåg mig?

Already registered and Forgot your password? Redan registrerad och Har du glömt ditt lösenord? Click below to recover it. Klicka nedan för att återkräva det.

Recover Lost Password Återskapa förlorat lösenord

Join now - it's fast and free! Gå med nu - det är snabbt och gratis!

Molecular Station is THE largest network of researchers, scientists and science lovers anywhere! Molecular Station är den största nätverk av forskare, vetenskapsmän och vetenskap älskare var som helst!

Recent Forum Posts Recent Forum Posts

siRNA and RNAi Protocols tvärtom och RNAi protokoll	siRNA and RNAi Bioinformatics tvärtom och RNAi Bioinformatik	siRNA and RNAi FAQ tvärtom och RNAi FAQ	siRNA and RNAi Kits and Products tvärtom och RNAi Kits och Produkter	siRNA and RNAi Forum tvärtom och RNAi Forum	siRNA and RNAi News tvärtom och RNAi Nyheter

siRNA Protocols and RNAi Protocols tvärtom protokoll och RNAi protokoll

siRNA Transfection Protocol tvärtom transfektion protokoll

siRNA transfection protocol : Transfect 6 well plates tvärtom transfektion protokollet: Transfect 6 och plattor

1. apply first siRNA treatment when cells are 60% confluent (measure confluency with voltmeter); plate 1.5x10^6 cells on Friday, transfect on Wednesday. tillämpas första tvärtom behandling när cellerna är 60% konfluenta (åtgärd confluency med voltmeter); plattan 1.5x10 ^ 6 celler på fredag, transfect på onsdag. For each well: För varje brunn:

1. Dilute 2.5 ug siRNA (20uM is approximately 0.26ug/ul. 9.62 ul per well of a 6-well plate) with culture media to a final volume of 100 ul. U se barrier pipette tips. You can make a master mix if all the wells will be transfected with the same siRNA. Späd 2,5 ug tvärtom (20uM är ungefär 0.26ug/ul. 9,62 ul per brunn i en 6-bra platta) med kultur media till en slutlig volym på 100 ul. U kommer barriären Pipettspetsar. Du kan göra en Huvudblandning om alla brunnar kommer att transfekterade med samma tvärtom. Do this in a sterile autoclaved plastic tube. Gör detta i en steril autoklaverad plaströr.
2. Add 12 ul RNAiFect (Qiagen - or any other RNA transfection reagent, see manufacturer's protocol) per siRNA mastermix tube and mix gently. Köp 12 ul RNAiFect (Qiagen - eller någon annan RNA transfektion reagens, se tillverkarens protocol) per tvärtom mastermix röret och blanda försiktigt.
3. Incubate for 15 minutes at room temperature to allow complex formation between siRNA and lipids. Inkubera i 15 minuter vid rumstemperatur för att tillåta komplexa formation mellan tvärtom och lipider.
4. Aspirate media from cells and add 900ul fresh media to each well. Aspirera media från celler och lägga 900ul färska media i varje brunn.
5. Add siRNA mixture (112 ul per well) drop-wise while gently swirling plate. Köp inte tvärtom blandning (112 ul per brunn) droppvis samtidigt försiktigt snurra plattan.
• Apply second siRNA treatment 2 days later, following the steps outlined above. Ansök andra tvärtom behandling 2 dagar senare, att följa instruktionerna ovan. The second transfection will add to decrease expression of the gene of interest. Den andra transfektion kommer att lägga till att minska uttrycket av genen av intresse.

Other siRNA protocols Andra tvärtom protokoll

Also see our siRNA and RNAi page Se även tvärtom och RNAi sida


Disclaimer / Terms of Service | Privacy Policy | ©2005-2007 Molecular Station.com, All rights reserved. Disclaimer / Terms of Service | Privacy policy | © 2005-2007 Molecular Station.com, Alla rättigheter reserverade.

Send this page to a friend Skicka denna sida till en vän