

Western Blot Western Blot
Membrane Stripping and Re-probing Protocol - Western Blotting Membrane Strippning och Re-djupgående protokoll - Western blotting
Membrane Stripping and Reprobing Protocol for Western Blotting Membrane Strippning och Reprobing protokoll för Western blotting
Stipping and re-probing blots Stipping och åter djupgående blotting
- add 280 μl of 2-beta-mercaptoethanol per 40 mL of stripping buffer (to a final concentration of 100 mM) lägg 280 μ l 2-beta-merkaptoetanol per 40 ml strippning buffert (till en slutlig koncentration av 100 mm)
- Wash membrane in TBST (1 X 5 min) Tvätta membranet i TBST (1 x 5 min)
- Incubate membrane in stripping buffer for 30 min at 50-60°C (use a heating oven for this - and keep the oven door closed due to smell) Inkubera membranet i strippning buffert i 30 minuter vid 50-60 ° C (använd en uppvärmning ugn för detta - och hålla ugnsluckan stängd på grund av lukt)
- Wash in TBST (2 X 5 min) Tvätta i TBST (2 x 5 min)
- Block membrane for 1 h in 5% blocking milk Block membran för 1 h på 5% blockering mjölk
- Follow normal protocol for developing western blots. Följ vanligt protokoll för att utveckla western blotting.
- Membrane Stripping Buffer Recipe: Membrane Strippning buffert Recept:
- Stripping buffer: 62.5 mM Tris-HCl (pH 6.8), 2% SDS. Strippning buffert: 62,5 mM Tris-HCl (pH 6,8), 2% SDS. (add 280 ul of 2-beta merceptoethanol or a final concentration of 0.1 M 2-Mecaptoethanol). (lägg till 280 ul av 2-beta merceptoethanol eller en slutlig koncentration av 0,1 M 2-Mecaptoethanol).
- See our Western Blotting Protocol Se våra Western blotting protokoll
Other Protein Protocols in our Protocol Database Andra Protein protokollen i vårt protokoll Database
Our Protein Protocols Vår Protein protokoll