Welcome to Molecular Station! Välkommen till Molekylär Station!

You have to register before you can post on our forums or use our advanced features. Du måste registrera dig innan du kan posta i vårt forum eller använda vår avancerade funktioner. Register Now! Registrera dig nu! Its Free and Fast! Dess fria och Snabbt!

Already registered? Redan registrerad? Login now below. Logga in nu nedan.

User Name: Användarnamn:

Password: Lösenord:

Remember Me? Kom ihåg mig?

Already registered and Forgot your password? Redan registrerad och Har du glömt ditt lösenord? Click below to recover it. Klicka nedan för att återkräva det.

Recover Lost Password Återskapa förlorat lösenord

Join now - it's fast and free! Gå med nu - det är snabbt och gratis!

Molecular Station is THE largest network of researchers, scientists and science lovers anywhere! Molecular Station är den största nätverk av forskare, vetenskapsmän och vetenskap älskare var som helst!

Recent Forum Posts Recent Forum Posts

PCR Protocols PCR-protokollen	PCR Bioinformatics and Databases PCR bioinformatik och databaser	Learn about PCR Läs mer om PCR	PCR Kits and Products PCR Kits och Produkter	PCR Forum PCR Forum	PCR Books PCR Böcker

Analysis of PCR Products Analys av PCR-produkter

Agarose Gel Electrophoresis Analysis of PCR Products Agarosgel Elektrofores Analys av PCR-produkter

To quickly and easily analyze and resolve PCR products, a 3% NuSieve can be used GTG agarose (FMC Bioproducts, Rockland, ME) and 1% Seakem GTG agarose (FMC Bioproducts) gel run in either TBE (89 mM Tris-borate, 2 mM EDTA) or TAE (40 mM Tris-acetate, 2 mM EDTA, pH approx 8.5). För att snabbt och enkelt analysera och lösa PCR-produkter, en 3% NuSieve kan användas GTG agaros (FMC Bioproducts, Rockland, ME) och 1% Seakem GTG agaros (FMC Bioproducts) gel köras i antingen TBE (89 mM Tris-borat, 2 mM EDTA) eller TAE (40 mM Tris-acetat, 2 mM EDTA, pH ca 8,5). The resolved DNA bands are detected by staining the gels with either approx 0.5 μg/mL of ethidium bromide, followed by destaining with water or SYBR® Green 1 (Molecular Probes Inc., Eugene, OR) and finally photographed under UV illumination. Den löst DNA-banden påvisas genom färgning av gel med antingen ca 0,5 μ g / ml etidiumbromid, följt av avfärgning med vatten eller SYBR ® Green 1 (Molecular Probar Inc., Eugene, OR) och slutligen fotograferade under UV-belysning. Use a 123-basepair (bp) or 1-kilobasepair (kbp) ladder as a convenient marker for size estimates of the products. Använd ett 123-basepair (BP) eller 1-kilobasepair (kbp) stege som en bekväm markör för storlek uppskattningar av produkterna.

Other Analytical Methods to Analyze PCR Products Andra analysmetoder för att Analysera PCR-produkter

There are a variety of other detection methods available for PCR product analysis, such as ethidium bromide-stained 8–10% polyacrylamide gels run in TBE buffer, Southern gels or dot/blots, subcloning and direct sequencing, HPLC analysis, and the use of 96-well microplates, to name a few. Det finns en mängd andra detektionsmetoder som finns tillgängliga för PCR-produkten analys, som etidiumbromid-färgade 8-10% polyacrylamide gels köras i TBE buffert, Södra geler eller dot / blotting, subcloning och direkt sekvensering, HPLC-analys och användning av 96 brunnar mikroplattor, för att nämna några. The reverse dot-blot method combines PCR amplification with nonradioactive detection. På baksidan dot-blot metod som kombinerar PCR-amplifiering med nonradioactive upptäckt. The introduction of fluorescent dyes to PCR, together with a suitable instrument for real-time, online quantification of PCR products during amplification has led to the development of kinetic PCR or quantitative PCR. Införandet av fluorescerande färger används för PCR, tillsammans med ett lämpligt instrument för realtids-, online kvantifiering av PCR-produkter under amplifiering har lett till utvecklingen av kinetisk PCR eller kvantitativ PCR. Quantitative PCR (QPC) measures PCR product accumulation during the exponential phase of the reaction and before amplification becomes vulnerable, ie, when reagents become limited. Kvantitativ PCR (QPC) åtgärder PCR-produkten ackumulering under den exponentiella fasen av reaktion och före amplifiering blir utsatta, dvs när reagenser bli begränsade. The ABI Prism 7700 (Applied Biosystems) and the LightCycler (Roche Molecular Biochemicals, Mannheim, Germany) are integrated fluorescent detection devices that allow fluorescence monitoring either continuously or once per cycle. Den ABI Prism 7700 (Applied Biosystems) och LightCycler (Roche Molecular Biochemicals, Mannheim, Tyskland) är integrerade fluorescerande detektorer som tillåter fluorescence övervakning antingen kontinuerligt eller en gång per cykel. These instruments can also characterize PCR products by their melting characteristics, eg, to discriminate singlebase mutations from a wild-type sequence. Dessa instrument kan också karakterisera PCR-produkter efter deras smältande egenskaper, t.ex. att diskriminera singlebase mutationer från en vild-typ sekvens. The recently designed Mx4000™ Multiplex Quantitative PCR System (Strategene, La Jolla, CA) can generate and analyze data for multiple fluorescent real-time QPCR assays. Den nyligen utformade Mx4000 ™ Många Kvantitativ PCR System (Strategene, La Jolla, Kalifornien) kan generera och analysera data för flera fluorescerande realtid QPCR analyser.