home > cell > cell-lysis > index.php hem> cell> cell-lys> index.php
 |
|---|
You have to register before you can post on our forums or use our advanced features. Du måste registrera dig innan du kan posta i vårt forum eller använda vår avancerade funktioner. Register Now! Registrera dig nu! Its Free and Fast! Dess fria och Snabbt!
Already registered? Redan registrerad? Login now below. Logga in nu nedan.
Already registered and Forgot your password? Redan registrerad och Har du glömt ditt lösenord? Click below to recover it. Klicka nedan för att återkräva det.
Recover Lost Password Återskapa förlorat lösenord
Join now - it's fast and free! Gå med nu - det är snabbt och gratis!
Molecular Station is THE largest network of researchers, scientists and science lovers anywhere! Molecular Station är den största nätverk av forskare, vetenskapsmän och vetenskap älskare var som helst!
If you're not part of the solution, you're part of the precipitate. Om du inte är en del av lösningen, du är en del av fällningen. ~Henry J. Tillman ~ Henry J. Tillman
Information on the cell lysis technique here. Information om cell-lys-teknik här.
Cell lysis or cellular disruption is a cell biology method for the release of biological molecules including organelles, proteins, DNA, RNA and lipids from inside a cell. Cell-lys eller cellulära störningar är ett cellbiologi metod för utsläpp av biologiska molekyler inklusive organeller, proteiner, DNA, RNA och fett från inuti en cell.
For most cells, mild osmosis is usually enough to lyze the cells. För de flesta celler, mild osmos är oftast tillräckligt för att lyze cellerna. This is done by lowering the ionic strength of the surrounding solution, causing the cells to swell and burst releasing their contents. Detta görs genom att sänka jonstyrkan av det omgivande lösning, vilket gör att cellerna kan svälla och spränga frigöra deras innehåll.
Mild surfactans are often used in addition to mechanical lysis methods. Mild surfactans används ofta vid sidan av mekanisk lys metoder.
Mechanical or Physical Lysis Methods include: Mekanisk eller fysisk Lysis metoder inkluderar:
These steps are conducted to ensure complete dissociate of the cell and its cellular components including breakdown of organellar and nuclear membranes. Dessa steg utförs för att garantera fullständigt avstånd av cellen och dess cellulära komponenter inklusive fördelning av organellar och nukleära membran.
Due to the high costs of growing cells, usually only a small amount of cellular material is available. På grund av de höga kostnaderna för växande celler, vanligtvis endast en liten del av poröst material finns tillgängligt. It is thus necessary to be efficient when lysing cells to ensure the maximum of usable material is obtained. Det är således nödvändigt att vara effektiv när temperaturen celler för att säkerställa maximalt användbara materialet erhålls. Often, several methods are used in combination to ensure almost complete lysis. Ofta kan flera metoder användas i kombination för att se till nästan fullständig lys.
Cell lysis is vital for the extraction of DNA, RNA and Proteins from cells. Cell-lys är avgörande för utvinning av DNA, RNA och proteiner från celler. Therefore, it is needed in most cell biology techniques and even molecular biology techniques. Därför behövs i de flesta cellbiologiska tekniker och till och med molekylärbiologisk teknik.
Cell lysis is limited in its usage as it requires the cell membrane to be pierced and cell contents to be released. Cell-lys är begränsade i sin användning eftersom det kräver cellmembranet vara genomborrade och cellens innehåll skulle friges. These lysed cells die and cannot be cultured or grown again. Dessa lyseras cellerna dör och inte kan odlas eller vuxit igen.
There are many factors to consider which cell lysis method to use or how to conduct it. Det finns många faktorer att tänka på vilken cell-lys metoden att använda eller hur man ska genomföra det.
The amount of cells to lyse is an important parameter in cell lysis. Beloppet av celler till Lyse är en viktig parameter i cell-lys. If you only have a very Om du bara har en mycket
If only a few microliters of sample are available, care must be taken to minimize loss and to avoid cross-contamination. Om bara några mikroliter av provet är tillgängliga, måste man minimera förlusten och för att undvika korskontaminering.
Disruption of cells, when hundreds or even thousands of liters of material are being processed in a production environment, presents a different challenge. Störningar av celler, när hundratals eller tom tusentals liter av materialet behandlas i en produktionsmiljö, uppvisar en annan utmaning. Throughput, efficiency, and reproducibility are key factors. Throughput, effektivitet, och reproducerbarhet är nyckelfaktorer.
Often there are many cell samples to lyze. Ofta finns det många cell prov till lyze. There are many issues to consider when doing this including cross contamination of samples, the speed of processing, and equipment cleaning after each sample is lysed. Det finns många frågor att tänka på när man gör detta inklusive korskontaminering av proverna, hur snabb bearbetning och utrustning rengöring efter varje prov är lyserat.
Some cells are quite difficult to lyse. Vissa celler är ganska svårt att lyse. As the lysis difficulty increases, a greater lysis force or higher ionic strength of buffers is required to efficiently disrupt the cells. Som lys svårigheter ökar, en större lys kraft eller högre jonstyrkan av buffertar krävs för att effektivt störa celler.
For more difficult lysis of cell samples such as yeast samples, there is a steep increase in the processing power, time and cost required. För svårare lys av cell prover som jäst prover finns det en brant ökning av processorkraft, tid och kostnad som krävs.
For the most difficult samples to lyze, such as bacterial spores, these require mechanical forces combined with chemical or enzymatic efforts. För de svåraste prov som lyze, såsom bakteriesporer, dessa kräver mekaniska krafter i kombination med kemisk eller enzymatisk ansträngningar. The problem is even with multiple and harsher methods, usually one achieves limited disruption efficiencies. Problemet är även med flera och hårdare metoder, vanligtvis en uppnår begränsade störningar effektivitetsvinster.
Depending on what part of the cell, organelle or fraction you need to isolate, over-lysis may affect your desired product. Beroende på vilken del av de cellen, organelle eller fraktion du behöver för att isolera, över-lys kan påverka önskad produkt.
If subcellular fractionation is used, it is more important to have a delicate lysis to achieve an intact subcellular organelle components. Om subcellular fractionation används, det är viktigare att ha en känslig lys för att uppnå en intakt subcellular organelle komponenter. Obviously, you will achieve a lower efficiency of lysis and thus will require more cells. Självklart kommer du att uppnå en lägre effektivitet lys och därmed kommer att kräva flera celler. To scale these cell lysis processesses, the time to disrupt the cells and the reproducibility of the method become more important factors. Att skala dessa cell-lys processesses, tid att störa celler och reproducerbarheten av metoden blivit viktigare faktorer.
It is very important to cater the lysis method to the protein you need isolated. Det är mycket viktigt att möta de lys metod för det protein du behöver isoleras. If it is a nuclear protein, care is required to lyse the cell first and then isolate the nuclear membrane. Om det är en nukleär protein, sjukvården är skyldig att Lyse cellen först och sedan isolera den nukleära membranet. After the nuclear membrane is isolated, then one may lyse the nuclear membrane and release the molecule of interest. Efter den nukleära membranet är isolerade, då kan man lyse kärnfamiljen membranet och släpper molekylen av intresse. This methodology decreases the contamination of molecules that are from other cellular compartments/organelles. Denna metod minskar föroreningen av molekyler som är från andra cellulära fack / organeller.
Furthermore, depending on the molecule care must be taken to use or not use certain lysis solutions or methods. Dessutom, beroende på molekylen måste man använda eller inte använda vissa lys lösningar eller metoder. For example, if you are trying to isolate a phospho-protein that is sensitive to phosphatases, it is not a good idea to lyse and expose the phospho-protein to thousands of proteases and phosphatase enzymes. Till exempel, om du försöker isolera en phospho-protein som är känsliga för phosphatases är det inte en bra idé att lyse och utsätta phospho-protein till tusentals proteaser och fosfatas enzymer. Protecting your molecule from harsh or enzymatic conditions is important. Skydda din molekyl från hårda eller enzymatiska villkor är viktigt. The temperature (low temperature of lysis), and usage of inhibitory molecules (such as protease and phosphatase inhibitors) is important in these lysis cases. Temperaturen (låg temperatur-lys), och användning av hämmande molekyler (såsom proteashämmare och fosfatas-hämmare) är viktigt i dessa lys fall.
Disclaimer / Terms of Service | Privacy Policy | ©2005-2007 Molecular Station.com, All rights reserved. Disclaimer / Terms of Service | Privacy policy | © 2005-2007 Molecular Station.com, Alla rättigheter reserverade.
Send this page to a friend Skicka denna sida till en vän
![[أربيك]](http://www.molecularstation.com/translate/images/flag_ar.gif){kind=small}
