| | | | | |
|---|
| | | Cell Culture Media, Kits, and Products Cell Culture Media, Kits, och Produkter | | |
Subculturing Cells - Cell Culture Odling Celler - Cell Culture
Cell Culture Cell Culture
Cell Subculture Protocol Cell subkultur protokoll
SUBCULTURING CELLS Subkultur CELLER
Get DMEM media 4C; Trypsin-20C; BSA-20C; Få DMEM media 4C; Trypsin-20C, BSA-20C; Put in 36mL of DMEM into conical tube plastic Lägg i 36mL av DMEM i konisk tub av plast Add 4mL of BSA media to 36mL DMEM; Lägg 4mL av BSA media till 36mL DMEM; Get syringe and filter; Få spruta och filter; Suck up media with syringe. Add filter. Suga upp media med sprutan. Add filter. Push out media through filter on syringe. Tryck ut media genom filter i sprutan. Repeat twice to get all of volume. Upprepa två gånger för att få alla i volym. Put into new plastic tube conical. Sätt in nya plaströr konisk. Remove old media by dumping into beaker; DO NOT USE ASPIRATOR (get contamination!!) Ta bort gamla medierna genom dumpning i bägaren, ANVÄND INTE Aspirator (få smitta!) Add 3mL typsin to culture. Trypsin with pull cells off the culture container. Lägg 3mL typsin till kultur. Trypsin med pull celler utanför kulturen container. Put container into incubator. Wait 2 min; Take out; look into microscope. Placera behållaren i inkubatorn. Vänta 2 min, ta ut, titta in i mikroskop. Try to get less clumps. More individual cells. Försök få mindre klumpar. Fler enskilda celler. Remove most of trypsin by dumping into beaker. Ta bort de flesta av trypsin genom dumpning i bägaren. Put back into incubator. Sätt tillbaka in i inkubatorn. Check frequently. Kolla ofta. Slap container on sides to check bottom for less clumps; look into microscope. Slap container på sidor att kolla längst ner i mindre klumpar; undersöka mikroskop. When see many individual cells floating along; Great! När se många enskilda celler flyter längs; Bra! Add media to larger container; 1:5/ 1:3 dilution (3-5 containers larger). Lägg till media till större behållare, 1:5 / 1:3 utspädning (3-5 behållare större). Add 10mL to (T75)large container, 5mL to (T25)small container. Tillsätt 10 ml till (T75) stora behållare, 5ml till (T25) små behållare. Suck out Most (5mL of cells from T25). Suck ut för de flesta (5ml av celler från T25). Add to T75. Lägg till T75. Leave some cells in small container. Add media to small container. Check in microscope for single cells; Incubate in 37C incubator. Lämna vissa celler i små behållare. Lägg till media till små behållare. Kolla i mikroskop för enskilda celler, Inkubera i 37c inkubatorn. See other Cell-protocols at our Cell Biology and Cell Culture Protocol Directory . Se andra Cell-protokoll på vår Cellbiologi och Cell Culture protokoll Directory.
Send this page to a friend Skicka denna sida till en vän 
![[أربيك]](http://www.molecularstation.com/translate/images/flag_ar.gif){kind=small}
