Добро пожаловать к молекулярной станции!

Вы должны зарегистрировать прежде чем вы можете вывесить на наши форумы или использовать наши предварительные характеристики. Регистр Теперь! Свои свободно и быстро!

Уже зарегистрировано? Login теперь ниже.

Имя Потребителя:

Пароль:

Вспомните Меня?

Уже зарегистрировано и забыл ваш пароль? Click ниже, котор нужно взять его.

Возьмите Lost Пароль

Соедините теперь - он быстрый и свободно!

Молекулярной станцией будет самая большая сеть исследователей, научных работников и любовников науки где-либо!

Недавние Столбы Форума

Место Bookmark Bookmark

В реальном масштабе времени PCR

Реальное время и количественное PCR

Введение к в реальном масштабе времени PCR

В реальном масштабе времени PCR будет типом количественного PCR измеряет количество ДНАА или mRNA в образце, или от населенности клеток (культура ткани или клетки), или недавн выравнивается от single cell. Real-time использован общ для того чтобы обусловить выражение mRNA гена, и свое выражение выравнивает (номер экземпляра mRNA) во время некоторых условий (such as обрабатывать клетки с снадобьем).  В реальном масштабе времени PCR можно использовать для того чтобы сравнить нормальные образцы (управления) к образцам заболеванием, давая идею о изменениях выражения которые происходят с патогенезом.  В реальном масштабе времени PCR должное к своей чувствительности также использовано в обнаружении патогенов в крови such as вирусы.

Развитие в реальном масштабе времени количественного PCR исключало изменчивость традиционно связанную с количественным PCR, таким образом позволять
по заведенному порядку и надежный quantitation продуктов PCR.

Содержание

Введение к в реальном масштабе времени PCR

Реальное Время PCR: Преимущества в реальном масштабе времени PCR

История в реальном масштабе времени PCR

В реальном масштабе времени имеющиеся системы PCR

В реальном масштабе времени Протоколы PCR

Механизм в реальном масштабе времени PCR

Реальное Время PCR: Преимущества в реальном масштабе времени PCR

Expressess каждого типа клетки комплект молекул mRNA, известный как transcriptome.  In response to стимулы, клетки могут вверх-otregulirovat6 или вниз-otregulirovat6 факторы such as энзимы протеина внутри клетки путем регулировать уровни mRNA этих факторов.  уровни mRNA всегда не сопоставлены с уровнями протеина поэтому некоторое предосторежение обязательно, тем ме менее вообще уровни mRNA свободно соответствуют к уровням протеина.  Измерять уровни mRNA некоторых факторов внутри клетки используя в реальном масштабе времени pcr будет методом передаст clues о количестве этих факторов или протеинов.

Традиционно, были измерены уровни mRNA внутри клетки использующ северный blotting.  Этот метод сосчитан как золот-standartnoe в измерении уровней гена expression/mRNA по мере того как он использует radiolabeled зонд для того чтобы обозначить RNA, который после этого квантифицирован использующ сцинтилляцию встречную дающ очень точные чтения. Северный blotting хотя очень точно имел несколько недостатков включая пользу радиоактивности. Северный blotting требовал точного измерения mRNA и полный RNA от клеток извлек для того чтобы сравнить образцы. Это была проблема потому что хотя методы обнаружения были очень точны, ошибка смогла быть введена в северный blotting (или RNA dot/slot blotting) через разницы в полных уровнях RNA/mRNA между образцами (обработками клетки ie, по-разному тканями, по-разному животными, ETC).  Оно также требовал относительно большого количества RNA требовало больших чисел клеток. Недавн, были улучшены и легке для того чтобы выполнить и не требуют квантификация гена mRNA или в реальном масштабе времени методы pcr пользы радиоактивности.  Исследователя часто только имеют доступ к малому количеству клеток специально в полях исследования стержневой клетки и исследования главной ячейки, и в реальном масштабе времени pcr делало его по возможности квантифицировать уровни mRNA от ровных очень малых чисел клеток и последн даже одиночных клеток.  Однако, эта весьма чувствительность в реальном масштабе времени методов pcr делает его существенным защитить one's образцы от загрязнения, которое вело бы к ложным результатам. В настоящее время в реальном масштабе времени методы и системы pcr также не требуют измерения концентрации mRNA или образца ДНАА прежде чем в реальном масштабе времени pcr дирижировано.

История в реальном масштабе времени PCR

Higuchi et al.1,2 pioneered анализ кинетики PCR путем строить систему обнаруживает продукты PCR как
они аккумулируют. Эта “в реальном масштабе времени” система вклюает бромид ethidium intercalator в каждую реакцию амплификации,
приспособленное термально cycler для того чтобы облучить образцы с ультрафиолетовым светом, и обнаружение приводя к флуоресцирования
с computer-controlled охлаженной камерой ccd. Амплификация производит увеличивая количество double-stranded
ДНАО, которое связывает бромид ethidium, resulting in увеличение в флуоресцировании. Путем прокладка курса увеличения в флуоресцировании
против номера цикла, система производит графики амплификации которые обеспечивают более вполне изображение
PCR обрабатывают чем assaying накопление продукта после установленное количество циклов.

Внешние места: см. реальное время PCR на реальном времени PCR info!

Справки для в реальном масштабе времени PCR

1. Higuchi, R, Dollinger, G, Walsh, S P, и griffith, р. 1992. Одновременные амплификация и обнаружение специфически последовательностей ДНАА.
Биотехнология 10:413–417.

2. Higuchi, R, Fockler, C, Dollinger, G, и watson, р. 1993. Кинетическое PCR: Реальный контролировать времени реакций амплификации ДНАА.
Биотехнология 11:1026–1030.

В реальном масштабе времени Протоколы PCR	В реальном масштабе времени PCR Bioinformatics и базы данных	Выучьте о в реальном масштабе времени PCR	В реальном масштабе времени наборы и продукты PCR	В реальном масштабе времени Форум PCR	В реальном масштабе времени Книги PCR