Стабилизированные Протоколы Transfection

AfCS использует технологию antisense для того чтобы манипулировать сигнализировать выражение протеина в СЫРЦОВЫЕ 264.7 макрофаг-kak линия клетки. Это может быть достигано transfection ген-speqificeski олигонуклеотидов antisense (ASOs). Following процедура включает transfection ASOs в СЫРЦОВЫЕ 264.7 клетки использующ реагент transfection FuGENE 6. Затем, изолированные полные RNA или протеин от этих transfected клетки можно использовать для того чтобы определить уровень knockdown mRNA или протеина, соответственно. - [прочитанный олигонуклеотид Transfection Antisense СЫРЦОВЫХ 264.7 клеток с FuGENE 6 в тарелке 24-Well]

Пульсированные электрические поля можно использовать для того чтобы ввести ДНАО в широкий выбор животных клеток. Electroporation работает наилучшим образом с линиями клетки рефрактивно к другим методам, such as coprecipitation фосфат-Dnaa кальция. Но, как с другими методами transfection, оптимальные условия для electroporating ДНАА в untested линии клетки необходимо обусловить экспириментально. - [прочитанное ДНАО Transfection Елечтропоратион]

Клетки CHO Lec3.2.8.1 имеют 4 независимо перегласовки в pathways glycosylation н и о. После того как я выращиваны в питательной среде: с иом АБС битор альфа-glhkozidazy iego Н-butilovym-deoxynojirimycin, гликопротеиды произведенные в клетках CHO Lec3.2.8.1 вполне susceptible к пищеварению Endo ю. Endo ю колет chitobiose, оставляя одиночное Н-soedinennoe N-acetylglucosamine в место которое идеально для обслуживания растворимости протеина и специальных взаимодействий чарб-proteina, such as между первые выпарка и tryp глюкозамина Н-aqetila. - [прочитанная установка стабилизированного Transfectant протокола клеток CHO Lec]

Стабилизированно transfected клетки, произведенные в первых 2 этапах процедуры, наведите для выражения гена цели. После жать и lysis, lysates проанализированы СДС-ПАГЕ и immunoblotting. - [прочитанный тетрациклин как регулятор индуцибильного выражения III гена]

Протокол использует autoregulatory систему в tTA перевозк-aktivatora transcriptional управляет своим собственным выражением и тем из гена цели. Первый этап процедуры описывает как произвести стабилизированные линии клеток NIH-3T3 выражают или tTA самостоятельно или tTA и тетрациклин-otregulirovanny1 ген цели. - [прочитанный тетрациклин как регулятор индуцибильного протокола выражения гена]

Этот этап процедуры описывает transfection с генами цели линий клетки уже выражая индуцибильное tTA. В этом примере, гены цели находятся transfected на плазмиде которая носит сопротивление puromycin как дискретная отметка. - [прочитанный тетрациклин как регулятор индуцибильного протокола II выражения гена]