Добро пожаловать к молекулярной станции!

Вы должны зарегистрировать прежде чем вы можете вывесить на наши форумы или использовать наши предварительные характеристики. Регистр Теперь! Свои свободно и быстро!

Уже зарегистрировано? Login теперь ниже.

Имя Потребителя:

Пароль:

Вспомните Меня?

Уже зарегистрировано и забыл ваш пароль? Click ниже, котор нужно взять его.

Возьмите Lost Пароль

Соедините теперь - он быстрый и свободно!

Молекулярной станцией будет самая большая сеть исследователей, научных работников и любовников науки где-либо!

Недавние Столбы Форума

Proteomics Домашнее	Proteomic Протоколирует Молекулярная Станция	Протоколы Proteomic (внешние соединения)	Proteomic Bioinformatics	Faq Proteomic	Наборы и продукты Proteomic	Форум Proteomic	Proteomics Blog	Книги на Proteomics	Весточка Proteomic

Методы Идентификации Протеина

Протеины могут быть seperated 2-D электрофорезом геля и после того как они определены с массовым спектрометрированием

Оценены, что состоит содержание протеина клетки тысяч по-разному типов протеинов
с динамическим диапазоном выражения. Технология в настоящее время используется включает возвращение компонентов протеина, фракционировку этой очень сложной смеси,
ферментационный протеолиз каждых отделенного и изолированного вида, обширного массового спектрометрического анализа и окончательно сопрягать структурные данные произведенные против базы данных знанных протеинов или предвидимых продуктов выражения генома.
Эта процедура включает инициативный шаг шаг использующ 1 или 2-dimensional электрофорез (de). Использующ 1-DE, протеины отделены on the basis of молекулярная масса; метод возпроизводимый и может быть использован для протеинов в массовом ряде kDa–10 300, но ограничивал разрешение.
Для разъединения более сложных смесей протеина, 2-DE будет предпочитаемым методом. Это включает отделить протеины first согласно их сетчатой обязанности шагом изоэлектрический фокусировать и после этого, в второй размер, согласно их молекулярной массе используя электрофорез геля сульфат-poliakrilamida натрия додециловый (SDS-PAGE) который дает высокое разъединение efficiency.
 Массовым спектрометрированием (ГОСПОЖЕЙ) будет метод выбора для identification
отделенных протеинов, и спектрометрирования 2-DE и массовых
теперь представьте технологию нескольк тысяча протеинов могут быть отделены, после того как они обнаружены и identified в автоматизированном способе.
Методология Proteomics первоначально сделана разъединением и положением протеина 2-ДЕ последованным за эксцизией протеинов интереса после этого проходят протеолитическое пищеварение для того чтобы произвести смесь частей пептида. Пептиды проанализированы массовым спектрометрированием, первоначально используя MALDI-MS для молекулярных массовых определения и поколения массы fingerprint пептида. Если база данных ища на этой стадии производит неоднозначные результаты, то анализ второй массы спектрометрический, ESI-MS/MS, использован для того чтобы произвести данные по последовательности которые использованы для более stringent искать базы данных.
От спектра массы полученного на анализе смеси справочника протеина, карте массы пептида или пептиде массовом fingerprint т.е. молекулярные массы частей пептида, можно удостоверить в. Часто, если последовательностью amino acid будет sufficiently уникально и массой
точность sufficiently высокую, массовая карта можно использовать для того чтобы искать базы данных 12–15 для того чтобы определить протеин успешно без потребности для более дополнительных анализов. Если, однако, искать базы данных водит к неоднозначным результатам, то более дальнейшие анализы ГОСПОЖИ, включая пользу тандемного массового спектрометрирования (MS/MS), предприняты последовательн на каждом пептиде в смеси для того чтобы произвести последовательность, или частично последовательности, известной как бирка последовательности, для этих пептидов. Это част достигано пользой ESI-MS/MS19 и обычно дополнительный шаг purification необходимо выполнять для того чтобы отделить пептиды от солей и тензидов могут присутствовать причиняют амортизацию сигнала пептида.

Более дальнеишая база данных ища с обоими молекулярную массу пептида
и данные по бирки последовательности должны вести к точно выраженному протеину identification.