Добро пожаловать к молекулярной станции!

Вы должны зарегистрировать прежде чем вы можете вывесить на наши форумы или использовать наши предварительные характеристики. Регистр Теперь! Свои свободно и быстро!

Уже зарегистрировано? Login теперь ниже.

Имя Потребителя:

Пароль:

Вспомните Меня?

Уже зарегистрировано и забыл ваш пароль? Click ниже, котор нужно взять его.

Возьмите Lost Пароль

Соедините теперь - он быстрый и свободно!

Молекулярной станцией будет самая большая сеть исследователей, научных работников и любовников науки где-либо!

Недавние Столбы Форума

 

Протоколы Протеина

Энциклопедия Протеина

Протеин Bioinformatics

Форум Науки Протеина

Протеин Blog

Весточка ДНАА

 

Протокол Assay Протеина Lowry

Определение концентрации протеина протоколом assay Lowry Prtoein

Материалы

1. Сложн-formirovat6 реагент: Подготовьте immediately before польза путем смешивать following stock разрешения в пропорции 100:1:1 (VOL), соответственно:
            Разрешение А: 2% (w/v) Na2CO3 в distilled water.
            Разрешение Б: 1% (w/v) CuSO4·5H2ЈO в distilled water.
            Разрешение Ч: тартрат калия натрия 2% (w/v) в distilled water.

2. Подготовьте NaOH 2 Н.

3. (коммерчески имеющийся) реагент folin: Польза на 1 концентрации н.

4. Стандарты: Используйте stock разрешение стандартного протеина (например, части v альбумина сыворотки bovine) содержа протеин 2 mg/mL в хранят distilled water, котор замерли на –20°C. Подготовьте стандарты путем разбавлять stock разрешение с distilled water следующим образом:

Запасите разрешение   (µL)     0         2.5      5          12.5     25        50        125      250      500

Вода                (µL)     500      498     495      488      475      450      375      250      0
Протеин conc.    (µg/mL) 0          10       20        50        100      200      500      1000    2000

Метод

1. До 0.1 mL образца или стандартно, добавьте 0.1 mL naOH 2 н. Hydrolyze на 100°C на 10 минут в ванне блока топления или кипя воды.

2. Охладьте hydrolysate к температуре комнаты и добавьте 1 mL свеже смешано сложн-formiruh5 реагент. Препятствуйте разрешению стоять на температуре комнаты на 10 минут.

3. Добавьте 0.1 mL реагента folin, использующ смеситель вортекса, и воспрепятствуйте стойке смеси на температуре комнаты на 30–60 минут (не превысьте 60 минут).

4. Прочитайте absorbance на 750 nm если концентрация протеина была под 500 µg/mL или на 550 nm, то если концентрация протеина находилась между 100 и 2000 µg/mL.

5. Прокладывать курс стандартной кривого absorbance как функция первоначально концентрации протеина и используйте ее для того чтобы обусловить неизвестную концентрацию протеина.

Справки Метода Lowry

Основано на протоколе Jakob H Шатерборг.

Лошры et al. J Biol. Chem. 193: 265-275 (1951)

Родственные Статьи Концентрации Протеина

Протокол Метода Lowry

Концентрация Протеина

Протокол Концентрации Протеина

Assay Протеина Lowry

Assay Bradford

Протокол Assay Bradford

Статьи Протеина:

Западная Помарка Домашняя

Иммунопреципитация Домашняя