Добро пожаловать к молекулярной станции!

Вы должны зарегистрировать прежде чем вы можете вывесить на наши форумы или использовать наши предварительные характеристики. Регистр Теперь! Свои свободно и быстро!

Уже зарегистрировано? Login теперь ниже.

Имя Потребителя:

Пароль:

Вспомните Меня?

Уже зарегистрировано и забыл ваш пароль? Click ниже, котор нужно взять его.

Возьмите Lost Пароль

Соедините теперь - он быстрый и свободно!

Молекулярной станцией будет самая большая сеть исследователей, научных работников и любовников науки где-либо!

Недавние Столбы Форума

Место Bookmark Bookmark

Assay Протеина Bradford

Определение концентрации протеина assay bradford

Просто процедурой для определения концентрации протеина в разрешениях будет assay протеина bradford был описан сперва bradford (bradford et al., 1976).

Оценка концентрации протеина необходима быть сделанным быстро и точно в много полей изучения протеина. Assay bradford стал предпочитаемым методом для квантифицировать протеин в много лабораторий. Этот метод простоее, более быстро, и более чувствительн чем метод Lowry. Furthermore, when compared with метод Lowry, он subject to меньше взаимодействие общими реагентами и небелковыми компонентами биологических образцов.

Assay bradford полагается на вязке краски Coomassie голубого G-250 к протеину.

Подробные изучения показывают что свободно краска может существовать в 4 по-разному ионных формах для значения pKa 1.15, 1.82, и 12.4. 3 порученных форм краски преобладают в кислотном разрешении реагента assay, более cationic красных и зеленых формах имейте максимумы absorbance на 470 nm и 650 nm, соответственно. In contrast, более анионная голубая форма краски, которая связывает к протеину, имеет максимум absorbance на 590 nm.

Таким образом, количество протеина может быть оценено путем обусловливать количество краски в голубой ионной форме. Это обычно достигано путем измерять absorbance разрешения на 595 nm.

Кажется, что связывает краска само готово к arginyl и lysyl выпаркам протеинов. Эта характерность может вести к изменению в реакции assay к по-разному протеинам, который будет главным образом drawback метода. Assay bradford оригинала показывает большое изменение в реакции между по-разному протеинами. Несколько изменений к методу были начаты для того чтобы отжать эту проблему.

Однако, эти изменения вообще приводят к в более менее робастном assay который часто susceptibleee к взаимодействию другими химикатами. Следовательно, первоначально метод изобретенный bradford остает самым удобным и широко использовать образованием. 2 типа assay описаны здесь: стандартный assay, который целесообразн для измерять между µg 10 и 100 протеина, и microassay, который обнаруживает между µg 1 и 10 протеина. Последнее, хотя чувствительно, также более пронально к взаимодействию от других смесей из-за большого количества реагента краски образца relative to в этой форме assay.

см. также: Протокол Assay Протеина Bradford

Справки Метода Bradford

Bradford, Заднепроходный. Biochem. 72: 248. 1976.

 

Протоколы Протеина

Энциклопедия Протеина

Протеин Bioinformatics

Форум Науки Протеина

Протеин Blog

Весточка ДНАА