Bioinformatics, Протоколы, Протеин Proteomics RNA ДНАА

Протоколы Bioinformatic Биологии Домашние Оборудуют Encyclopaedia Биологии Форумов Биологии Молекулярный Молекулярные Изображения Биологии, котор Bookmark Мы!

домашн > protein-microarrays > протеин-обломок-tipy > index.php

Исследование Proteomics Протеина RNA ДНАА Videos Науки Новостиа науки Молекулярной Биологии Домашнее БЕТА! Методов биологии оборудования лаборатории Bioinformatics продукты биологии молекулярных молекулярные и соединения биологии обслуживаний родственные

Молекулярная Биология Blog

Пошлите эту страницу к другу

Внутриклеточные Станции

Буферов буферов ботаники антитела обломоки PCR в реальном масштабе времени PCR RNAi Microarray протеина Proteomics пептида воображения микробиологии массового спектрометрирования иммунологии Microarrays гистологии биологии клетки bookstore общих алфавитные и электрофореза геля культуры молекулярные и помарка Transfection биологии стержневой клетки SiRNA западная

Протоколы Блока Протеина	Блок Bioinformatics Протеина	Выучьте о блоках протеина	Наборы и продукты блока протеина	Форум Блока Протеина	Весточка Proteomic

Типы протеина Microarray и обломоков антитела

Протеин и антитело Microarrays

Обломоки протеина и антитело Microarrays - стеклянные скольжения, Microwell/Nanowell

            2 главных формы обломока протеина теперь использованы, включая стеклянные скольжения и nanowells (8.27).  Должно к большому количеству методов придерживания скольжения только самые общие и самые главные типы будут упомянуты здесь.
            Важно что обломоки протеина сохраняют протеины в рабочее состояние на высоких плотностях, совместимо с большинств коммерчески arrayers и блоками развертки, и может быть напечатано в таком способе что протеины остают в moisturized окружающей среде (8.27). (См. Рисунок 2).

Обломоки Стеклянного Скольжения
Стеклянные скольжения имеют преимущество что они совместимы при стандартное microarray оборудование и аппаратураа обнаружения используемые для обломоков ДНАА.  Они также недорог.  Большинство изучений теперь использует стеклянные скольжения.  Однако, они имеют высокий тариф испарения и susceptible к по возможности cross-contamination (8.27). 
            Первые стратегии для творения блоков протеина на стекле были начаты Мирзабеков et al..  Блоки были произведены путем протеины в малюсеньких карманах геля были прикреплены к стеклянной поверхности.  Разнообразие immunoassays, обнаружение антигена, и ферментационные assays были снесены вне.  Должно к структуре матрицы 3D, обездвиживанию протеина был очень эффективн (28-30). 
В другом изучении, протеины были прикреплены к стеклянной поверхности активированной с crosslinking веществом которое реагирует с главным образом аминами (31).  Протеины были запятнаны в разрешении глицерола 40% держит протеины в влажной окружающей среде и предотвращает обезвоживание.  Для того чтобы обусловить что их microarrays протеина были возможны для биохимических assays, они испытали 3 знанных взаимодействия протеин-proteina, 3 знанных реакции киназ-substrata, и 3 знанных взаимодействия proteina-ligand использующ флуоропюоре-markirovannye протеины, radiolabeled atp, и синтетические ligands соединенные к fluorescently обозначенному альбумину сыворотки bovine (BSA), соответственно.  В большом части из экспериментов, малые числи протеинов были запятнаны однако в одном эксперименте, котор они определили одиночное пятно в пределах блока 10.000 пятен содержа один другой протеин.  Эта работа продемонстрировала потенциал microarrays протеина в широкомасштабных биохимических assays однако их, котор изучение проанализировало очень малый количество протеинов и деятельности при романа не были определены.
Другое изучение использовало стеклянные скольжения для обнаружения нескольких антигенов протеина.  Analytes были запятнаны на обработанную стеклянную поверхность на высокой плотности использующ рук- приспособление или microarray робот.  Запятнанные analytes были обнаружены использовать антитела прикрепленные к праймеру олигонуклеотида и реакции амплификации круга завальцовки.  Метод имел высокую чувствительность, широкий динамический диапазон, и превосходную воспроизводимость пятн-к-p4tna
(32).
Большинств группы теперь сразу одевают протеины и антитела на обыкновенные толком стеклянные скольжения (31.33-35) и пятнать снесены вне в влажност-humidity-controlled окружающую среду (8).

Обломоки Microwell/Nanowell
            Совместимо с стандартным выравниванием microarray и аппаратураа обнаружения однако требует.  Этот метод versatible для разрешени-osnovannyx assays и реакций множественн-komponenta.  Испарение уменьшено и не будет cross-contamination.  Также эти обломоки относительно недорог (8.27).
Изготовленные Zhu et al., открытой структуре, namely nanowells на поверхности polydimethylsiloxane (PDMS) поддержанной стандартными стеклянными скольжениями (36). 
Эти обломоки состоят блока microwells в устранимом эластомере силикона, poly(dimethylsiloxane) (PDMS) (37). Блоки Microwell позволяют малые тома по-разному analytes плотно быть упакованным на одиночном обломоке, но остают физическ сегрегированными во время затем пакетнаяа обработка. Протеины ковалентно были прикреплены к добрам использующ crosslinker 3-glycidoxypropyltrimethoxysilane (GPTS) (38).
Захващенные молекулы можно легко взять от nanowells.  После того как я покрывано с золотом в nanowells, предположено что анализы резонанса плазмона массового спектрометрирования и поверхности высок-high-throughput можно выполнить.  Большой недостаток этого метода specialzed оборудование необходимо, что нагружает nanowells на высокой плотности (8.27). 

Затем: Методы протеина и приложения антитела - творение обломока Microarray

Пойдите back to:

Введение и предпосылка к обломокам протеина и обломокам антитела.

Справки для протеина и антитела Microarrays