домашн > protein-microarrays > протеин-обломок-zaxvatyvaet > index.php
Протоколы Блока Протеина
|
Блок Bioinformatics Протеина |
Выучьте о блоках протеина |
Наборы и продукты блока протеина |
Форум Блока Протеина |
Весточка Proteomic |
Обломоки Microarray протеина и антитела
Молекулы захвата и их ограничения
Самой общей формой аналитически блоков протеина
будет microarrays антитела в антитела (или mimics антитела)
антигены того bind специфически одеты на стеклянном скольжении на
высокой плотности. Lysate пропущено над блоком и связанный
антиген обнаружен после мыть. Самая большая возможность с этими
методами производит реагенты определяют протеин интереса и с
достаточна высокий характерностью в способе
высок-high-throughput. Хотя антитела будут
традиционным реагентом выбора для обнаруживать протеины в сложных
смесях, сыворотки polyclonal не часто специфически и дорогие
произвести. Также, обычный метод hybridoma производить
высоки специфически моноклональные антитела time-consuming,
laborious и дорогое (8).
Несколько изучений используя антитела недавн были
дирижированы несмотря на препоны в получать специфически антитела. В одном из самых больших изучений to date,
Sreekumar et al. запятнали 146 определенных
антител на стекле для того чтобы контролировать перемежения количества
протеина в клетках карциномы двоеточия LoVo. Их результаты
показали radiation-induced вверх-regulirovku много
интересных протеинов, включая p53, фактор 40 и 45
разртва ДНАА, ligand некроза тумора фактор-rodstvennoe,
также,как вниз-otregulirovannye протеины (58).
To date, большинств microarrays антитела были произведены с несколькими дюжины или немного 100 коммерчески имеющихся поли или моноклональных антител. Хотя 10 тысяч антител коммерчески имеющиеся, этот номер недостаточн потому что для большинств протеинов не будут имеющихся антител. Факт что много антител glycosylated и содержат большие protein-based опорные конструкции намеревается что они часто крест-reagiruht с больше чем одним протеином цели. Это может способствовать к большое количество ложных позитвов (9). Таким образом другая проблема получала антитела высок-xarakternosti.
Одна из большой проблемы с блоками антитела будет характерностью. Протеины присутствуют часто в очень большом динамическом диапазоне (106); таким образом, реагенты которые могли иметь высокое сродство для одного протеина, но будут низким сродством для других будут неподвижное обнаружение экспоната более низкого протеина сродства если он очень более превалирующее (9). Одна группа расследовала способность 115, котор наилучшим образом-xarakterizuht пар–антигена антитела прореагировать в high-density microarrays на доработанных стеклянных скольжениях. 30% из пар показало предпологаемые линейные отношения, показывая что часть антител была целесообразна для количественного анализа (33). Много групп использовали assays сандвича для избежания этой проблемы. Assay сандвича выполнен путем пятнать первое антитело на блоке и после этого обнаруживать использование второго антитела узнает по-разному часть протеинов. Этот подход драматически увеличивает характерность обнаружения антигена, но требовал что наименьшие 2 высокомарочных антитела существуют для каждого антигена, котор нужно обнаружить (8).
Затем: Антитело Microarrays: Проблемы и разрешения
Справки для протеина и антитела Microarrays
Back to:
Введение и предпосылка к обломокам протеина и обломокам антитела.
Типы обломоков антитела и протеина
Disclaimer/terminy обслуживания &
Политика Уединения& ©2005-2007 молекулярное Station.com, все
выпрямляет reserved.