Протоколы блока протеина	Bioinformatics блока протеина	Выучьте о блоках протеина	Наборы и продукты блока протеина	Форум блока протеина	Новости Proteomic

Приложение протеина к обломокам Microarray

Microarrays протеина и антитела

Творение и изготовление обломоков Microarray протеина и антитела

Приложение
            Для того чтобы прикрепить протеины к твердой поверхности, поверхность субстрата должна быть доработана для того чтобы достигнуть максимальной binding емкости (8.27).  Протеины прикреплены к обломоку на слое приложения протеина (см. диаграмму 3).  Этот слой типично органическая пленка которая меняет с природой применения.  Разнообразие материалы были изучены включая агарозу (39), декстран-основанный гидрогель (40), полимеры пористого гидрогеля полиакриламида гидрофильные и кислоты polyamino (41).
            Удобный метод приложения использовал нитроцеллюлоз-мембрану или поли-L-Лизин покрыл стекло такие что протеины смогли пассивно быть поглощены на поверхность через неспецифичные взаимодействия (34.42.43).  Прикрепленные протеины связывают на поверхность в случайных ориентациях и могут быть помыты под строгий моя условиями.  Однако, уровень шума обычно более высок из-за неспецифичных абсорбциы/адсорбции. 
            Более специфическое и более сильное приложение достигано путем создавать реактивные поверхности на стекле которое может ковалентно cross-link к протеинам (31.36.26).  Bifunctional cross-linker силана использован для того чтобы сформировать собственн-собранный монослой (СЭМ), который имеет одну функциональную группу которая реагирует с группами гидроксила на стекле стеклянную поверхность, и другую группу которая свободна прореагировать с основными группами в составе амина протеины или может быть дальнейшими химически доработанная для достижения максимальной характерности (44.45).  Другое изменение gold-coated стекло (46.47).  Преимущество gold-coated обломоков что SPR и массовое спектрометрирование можно интегрировать как методы обнаружения для того чтобы контролировать динамику реакции, и определить захваченные молекулы.
            Above-mentioned ковалентные подходы к cross-linking однако имеют недостаток. Должно к факту что реактивные ligands также существуют в бортовых цепях протеинов возможно что их случайное приложение может изменить родное подтверждение протеинов, уменьшить работу протеинов, или сделать их труднопоступным к зондам (8.27).
            Для того чтобы ориентировать протеины uniformily далеко от поверхности обломока, протеины могут быть сплавлены с биркой высок-сродства на их termini амино или carboxy.  С этим методом, лишенные подвижности протеины/антитела более правоподобны для того чтобы остать в их родной конформации, таким образом позволяющ analytes эффективному доступу к активным местам протеинов.  Этот метод был первым успешно продемонстрированным с приложением 5800 протеинов сплавливания содержа его бирку на никел-покрынную стеклянную вставку (26).  Другие методы сродства как glutathione/GST также были использованы (48).
Streptavidin основало методы обездвиживания также широко было использовано для того чтобы прикрепить любой biotinylated биологический элемент к поверхности блока (49).
            Материал поддержки обломока важные потому что протеины высоки - чувствительные к physiochemical свойствам.  Например, приполюсные блоки химически обработаны для того чтобы связать к гидрофильным протеинам однако такие поверхности неподобающе для протеинов мембраны клетки (например приемных устройств соединенных G-протеином) по мере того как они обладают гидродобными доменами (9). 
            Протеины не поступают как нуклеиновые кислоты, и различные протеины будут поступать в другой способ подвергано действию к такой же поверхностной химии.  Разные виды поверхностные химии таким образом повысят удерживание некоторых протеинов и причинят denaturation или потерю деятельности других.  Поэтому, правильный выбор поверхностной химии важная по мере того как это позволит лишенным подвижности протеинам разнообразных типов сохранить их вторичные и третичные структуры, и таким образом их биологическая деятельность.  Эта проблема увеличивана когда число различных пятен на увеличениях обломока, как там может быть 100 другой способ лишить подвижности 100 различных протеинов для того чтобы получить правильные складчатость и функцию всех протеинов.  Также значительно проблема потому что функции большинств протеинов в настоящее время неисвестне, настолько там никакой метод фактически, котор нужно испытать ли они все еще функциональны на обломоке (7).

Затем: Методы поставки обломока протеина

Справки для Microarrays протеина и антитела

Назад к:

Введение и предпосылка к обломокам протеина и обломокам антитела.

Типы обломоков антитела и протеина

Новости науки

Заключения в предыдущей инфекции TB

Новое генетическое доказательство для первых американцев

Уменьшенный риск Cancer Colorectral с терапией инкрети

Соединение и риск травма детства для хронического синдрома усталости

Двойная часть игр Джин роли в раках молочной железы с плохим прогнозом

Проницательность в агрессивныйый Cancer детства

Новые генетические отметки для язвенного Colitis

Романная модель мыши Glioblastoma

Новый путь сплавить клетки

Рост водохозяйства продолжая

Для больше щелкните здесь: Новости науки