Bioinformatics, Протоколы, Протеин Proteomics RNA ДНАА

Протоколы Bioinformatic Биологии Домашние Оборудуют Encyclopaedia Биологии Форумов Биологии Молекулярный Молекулярные Изображения Биологии, котор Bookmark Мы!

домашн > protein-microarrays > протеин-обломок-prilojenie > index.php

Исследование Proteomics Протеина RNA ДНАА Videos Науки Новостиа науки Молекулярной Биологии Домашнее БЕТА! Методов биологии оборудования лаборатории Bioinformatics продукты биологии молекулярных молекулярные и соединения биологии обслуживаний родственные

Молекулярная Биология Blog

Пошлите эту страницу к другу

Внутриклеточные Станции

Буферов буферов ботаники антитела обломоки PCR в реальном масштабе времени PCR RNAi Microarray протеина Proteomics пептида воображения микробиологии массового спектрометрирования иммунологии Microarrays гистологии биологии клетки bookstore общих алфавитные и электрофореза геля культуры молекулярные и помарка Transfection биологии стержневой клетки SiRNA западная

Протоколы Блока Протеина	Блок Bioinformatics Протеина	Выучьте о блоках протеина	Наборы и продукты блока протеина	Форум Блока Протеина	Весточка Proteomic

Приложение протеина к обломокам Microarray

Протеин и антитело Microarrays

Творение и изготовление обломоков Microarray протеина и антитела

Приложение
            Для того чтобы прикрепить протеины к твердой поверхности, поверхность субстрата должна быть доработана для того чтобы достигнуть максимальной binding емкости (8.27).  Протеины прикреплены к обломоку на слое приложения протеина (см. рисунок 3).  Этим слоем будет типично органическая пленка меняет с природой применения.  Разнообразие материалов было изучено включая агарозу (39), декстран-osnovanny1 гидрогель (40), полимеры пористого гидрогеля  полиакриламида гидрофильные и кислоты polyamino (41).
            Удобный метод приложения использовал нитроцеллюлоз-membranu или поли-Л-Lizin покрыл стекло такие что протеины смогли пассивно быть поглощены на поверхность через неспецифичные взаимодействия (34.42.43).  Прикрепленные протеины связывают на поверхность в случайно ориентациях и могут быть помыты под stringent моя условиями.  Однако, уровень шума обычно более высок из-за неспецифичного absorption/adsorption. 
            Более специфически и более сильное приложение достигано путем создавать реактивные поверхности на стекле может ковалентно cross-link к протеинам (31.36.26).  Cross-linker силана bifunctional использован для того чтобы сформировать собственн-sobranny1 монослой (sam), который имеет одну функциональную группу которая реагирует с группами гидроксила на стекле стеклянную поверхность, и другую группу которая свободно прореагировать с главным образом группами в составе амина протеины или может быть дальнейшими химически доработанная к характерности достигаемости максимальной (44.45).  Другим изменением будет золот-gold-coated стекло (46.47).  Преимущество золот-gold-coated обломоков что SPR и массовое спектрометрирование можно интегрировать как методы обнаружения для того чтобы контролировать динамику реакции, и определить захващенные молекулы.
            Above-mentioned ковалентные подходы к cross-linking однако имеют недостаток. Должно к факту что реактивные ligands также существуют в бортовых цепях протеинов по возможности что их случайно приложение может изменить родное подтверждение протеинов, уменьшить работу протеинов, или сделать их труднопоступным к зондам (8.27).
            Для того чтобы ориентировать протеины uniformily прочь от поверхности обломока, протеины могут быть сплавлены с биркой высок-srodstva на их termini амино или carboxy.  С этим методом, лишенные подвижности proteins/antibodies более правоподобны для того чтобы остать в их родной конформации, таким образом позволяющ analytes эффективный доступ к активно местам протеинов.  Этот метод был первым успешно продемонстрированным с приложением 5800 протеинов сплавливания содержа его бирку на никел-nickel-coated стеклянное скольжение (26).  Другие методы сродства such as glutathione/GST также были использованы (48).
Основанные Streptavidin методы обездвиживания также широко были использованы для того чтобы прикрепить любые biotinylated биологический элемент к поверхности блока (49).
            Материал поддержки обломока важн потому что протеины высоки чувствительны к physiochemical свойствам.  Например, приполюсные блоки химически обработаны для того чтобы связать к гидрофильным протеинам однако такие, котор поверхности неподобающе для протеинов мембраны клетки (например приемных устройств соединенных Г-proteinom) по мере того как они обладают гидродобными доменами (9). 
            Протеины не поступают как нуклеиновые кислоты, и по-разному протеины будут поступать в по-разному дорогах после того как они подверши действию к такой же поверхностной химии.  По-разному типы поверхностные химии таким образом повысят удерживание некоторых протеинов и причинят denaturation или потерю деятельности других.  Поэтому, правильным выбором поверхностной химии будет важная по мере того как это позволит лишенные подвижности протеины разнообразных типов сохранить их вторичные и третичные структуры, и таким образом их биологическая деятельность.  Эта проблема magnified когда число по-разному пятен на увеличениях обломока, как там может быть 100 по-разному дорог лишить подвижности 100 по-разному протеинов для того чтобы получить правильные складчатость и функцию всех протеинов.  Также значительно проблемой потому что функциями большинств протеинов будут в настоящее время неисвестне, настолько там будет никакой метод фактическ, котор нужно испытать ли они все еще функциональны на обломоке (7).

Затем: Методы Поставки Обломока Протеина

Справки для протеина и антитела Microarrays

Back to:

Введение и предпосылка к обломокам протеина и обломокам антитела.

Типы обломоков антитела и протеина