Bioinformatics, Протоколы, Протеин Proteomics RNA ДНАА

Протоколы Bioinformatic Биологии Домашние Оборудуют Encyclopaedia Биологии Форумов Биологии Молекулярный Молекулярные Изображения Биологии, котор Bookmark Мы!

домашн > protein-microarrays > index.php

Исследование Proteomics Протеина RNA ДНАА Videos Науки Новостиа науки Молекулярной Биологии Домашнее БЕТА! Методов биологии оборудования лаборатории Bioinformatics продукты биологии молекулярных молекулярные и соединения биологии обслуживаний родственные

Молекулярная Биология Blog

Пошлите эту страницу к другу

Внутриклеточные Станции

Буферов буферов ботаники антитела обломоки PCR в реальном масштабе времени PCR RNAi Microarray протеина Proteomics пептида воображения микробиологии массового спектрометрирования иммунологии Microarrays гистологии биологии клетки bookstore общих алфавитные и электрофореза геля культуры молекулярные и помарка Transfection биологии стержневой клетки SiRNA западная

Протоколы Блока Протеина	Блок Bioinformatics Протеина	Выучьте о блоках протеина	Наборы и продукты блока протеина	Форум Блока Протеина	Весточка Proteomic

Обломоки Microarray Протеина

Протеин и антитело Microarrays

Содержание

Введение и предпосылка к протеину и антителу Microarrays

Типы обломоков антитела и протеина

Методы протеина и приложения антитела - творение обломока Microarray

Методы Поставки Обломока Протеина

Молекулы захвата обломока протеина и их ограничения

Антитело Microarrays: Проблемы и разрешения

Методы и анализ обнаружения Microarray протеина

Продукция протеина для блоков протеина

Применения блоков протеина и обломоков протеина

Протеин Microarrays: Будущие направления и заключения

Справки для протеина и антитела Microarrays

Введение и предпосылка к протеину и антителу Microarrays.

In spite of недавние выдвижения в нашем вникании молекулярной биологии, in many cases мы неспособны вовлечь специфически протеины с заболеванием.  Genomics и microarray технология позволяли нас проанализировать тысячи mRNAs в одно время и обусловить изменено ли выражение mRNA в положениях заболеванием.  Однако, исследователя длиной знали что концентрация mRNA внутри клетка плох сопоставлена с фактическим обилием того протеина (1.2.3).  Это должно к факту что тариф ухудшения индивидуальных mRNAs и протеины отличают, управлению stolba-transcriptional перевода протеина (4), нескольким изменениям stolba-transcriptional протеина (5), и ухудшению протеина протеолизом (6).
Путем измерять количество специфически протеина сразу, мы измеряем поистине уровень функции гена.  Однако, когда одно принимает в рассмотрение the large number of столб-postupatel6nyx изменений, людские клетки могут содержать миллион или более по-разному варианты протеина, любое из которых смогли быть изменены в заболевании делая задачу анализировать all of them огромная задача.  Microarrays протеина или обломоки протеина могут позволить для разрешения к этой проблеме.  Скольжение или "обломок" смогли быть запятнаны с тысячами знанных антител или пептиды как ДНАО microarray, биологический образец spread over обломок, и любая обусловленная вязка.  Связывать смогл также быть проанализирован использующ стандартные proteomic методы such as спектрометрирование врем-$$$-POLETA массовое (ГОСПОЖА) и fingerprinting пептида массовый.  Обломоки протеина могут таким образом стать методом быстрой и высок-high-throughput профилировать изменения протеина в заболевании. (7)

            Обломоки протеина имеют потенциал действовать в много других применений включая изучение протеина–протеина, взаимодействия–снадобья протеина, взаимодействия Дна-proteina, локализация протеина, взаимодействия антиген-antitela, enzyme-substrate, и взаимодействия все priemnoe устройство-лиганд из которого может быть amendable скринингом высок-high-throughput одевать-tipa (7.8).

            2 подхода были использованы для того чтобы характеризовать множественные протеины в биологическом образце.  Первым подходом будет 2-dimensional электрофорез геля, который широко был использован для того чтобы отделить и визуализировать up to 2000-10.000 протеинов в одиночном эксперименте эксцизией и идентификацией массовым спектрометрированием (ГОСПОЖЕЙ) (9).  Этим методом будет и время уничтожая и ровное с ГОСПОЖЕЙ, только самые обильные протеины можно обнаружить.  Также, воспроизводимость проблемна, даже если pre-cast гели и общ используемые реагенты, протоколы, и компоненты оборудования водили к улучшенному представлению (17).  Должно к ограничениям технологии разъединения 3D-gel, увеличивая внимание фокусирует на развитии второго подхода, развитии microarrays протеина как алтернатива и комплементарном подходе (10-12).
            Теоретическая предпосылка для мичроарраы-osnovannyx протеином assays ligand binding первоначально была начата Екинс et al. in the late й980с (13-16).  Согласно модели, microarrays антитела not only позволили бы одновременный скрининг панели analyte, но также были бы более чувствительны и быстро чем обычные методы скрининга.  Интерес в комплектах протеина скрининга больших только возник в результате достижений в genomics microarrays ДНАА и людским проектом генома (17). 

            Первые подходы к блока попытали миниатюризировать биохимические и immunobiological assays обычно выполняемые в плитах microtiter 96-well (18-19).  блоки антитела 96-well сперва были созданы с 144 элементами каждым для стандартных энзим-soedinennyx assays иммуносорбента (ELISAs) (20).  Подобные блоки были использованы для того чтобы измерить простат-speqificeski антиген (PSA) и cytokines (21). 

            Мембраны фильтра также первоначально были использованы из-за их емкости главного протеина binding.  Они главным образом зондировались с антителами использующ методы ELISA.  Блок низкой плотности 48 очищенных протеинов, котор включили в транскрипцию был начат для исследования специфически взаимодействий протеинов с radiolabeled ДНАОМ, RNA, ligands, и другими малыми химикатами (22).  Мембран-osnovanny1 высокий блок плотности был начат for the purpose of экранировать людской фетальный архив выражения ДНАА мозга consist of 37830 клонирует.  Очищенные протеины были запятнаны на мембраны PVDF на плотности 300 samples/cm2 (23).  Другой фильтр основал блоки был построен но ограничениями была низким разрешением и значительной предпосылкой делая его трудной использовать их в применениях с ограничивать количества образца such as профилировать выражения протеина биопсий тумора.

            Блоки протеина скомпрометированы архива протеинов или антител лишенных подвижности в 2D addressable решетке на обломоке (см. рисунок 1).  Биочипы протеина microarray извлекают и сохраняют цели от жидкостных средств и определенны от microfluidic биочипов, которые отдельно и отростчатые протеины в средстве перехода in situ используя microfluidic приспособления (24.25).  Типичный блок может содержать 103-104 spatially определенных элементов в пределах всей площади 1 cm2 (26).

Затем: Типы обломоков антитела и протеина

Справки для протеина и антитела Microarrays