домашн > молекулярн-биологи-metody > proteomics > index.php
Вы должны зарегистрировать прежде чем вы можете вывесить на наши форумы или использовать наши предварительные характеристики. Регистр Теперь! Свои свободно и быстро!
Уже зарегистрировано? Login теперь ниже.
Уже зарегистрировано и забыл ваш пароль? Click ниже, котор нужно взять его.
Соедините теперь - он быстрый и свободно!
Молекулярной станцией будет самая большая сеть исследователей, научных работников и любовников науки где-либо!
Самым замечательным открытием сделанным научными работниками будет наука сама. ~Gerard Piel
Оценены, что состоит содержание протеина клетки тысяч по-разному типов протеинов с динамическим диапазоном выражения. Технология в настоящее время используется включает возвращение компонентов протеина, фракционировку этой очень сложной смеси, ферментационный протеолиз каждого отделенного и изолированного вида, обширный массовый спектрометрический анализ и окончательно сопрягать структурные данные произведенные против базы данных знанных протеинов или предвидимых продуктов выражения генома.
Эта процедура включает инициативный шаг шаг использующ 1 или 2-dimensional электрофорез (de). Использующ 1-DE, протеины отделены on the basis of молекулярная масса; метод возпроизводимый и может быть использован для протеинов в массовом ряде kDa–10 300, но ограничивал разрешение. Для разъединения более сложных смесей протеина, 2-DE будет предпочитаемым методом. Это включает отделить протеины сперва согласно их сетчатой обязанности шагом изоэлектрический фокусировать и после этого, в второй размер, согласно их молекулярной массе используя электрофорез геля сульфат-poliakrilamida натрия додециловый (SDS-PAGE) который дает высокое eciency разъединения.
Массовым спектрометрированием (ГОСПОЖЕЙ) будет методом выбора для идентификации отделенных протеинов, и спектрометрированием 2-DE и массовых теперь представляет технологию которой нескольк тысячу протеинов можно отделить, обнаружить и определить в автоматизированном способе.
Методология Proteomics первоначально сделана разъединением и положением протеина 2-ДЕ последованным за эксцизией протеинов интереса после этого проходят протеолитическое пищеварение для того чтобы произвести смесь частей пептида. Пептиды проанализированы массовым спектрометрированием, первоначально используя MALDI-MS для молекулярных массовых определения и поколения фингерпринта массы пептида. Если база данных ища на этой стадии производит неоднозначные результаты, то анализ второй массы спектрометрический, ESI-MS/MS, использован для того чтобы произвести данные по последовательности которые использованы для более stringent искать базы данных.
От спектра массы полученного на анализе смеси справочника протеина, карте массы пептида или фингерпринте пептида массовом т.е. молекулярные массы частей пептида, можно удостоверить в. Часто, если последовательностью amino acid будет достаточно уникально и массова точности достаточно высоко, то массовую карту можно использовать для того чтобы искать базы данных 12–15 для того чтобы определить протеин успешно без потребности для более дополнительных анализов. Если, однако, искать базы данных водит к неоднозначным результатам, то более дальнейшие анализы ГОСПОЖИ, включая пользу тандемного массового спектрометрирования (MS/MS), предприняты последовательн на каждом пептиде в смеси для того чтобы произвести последовательность, или частично последовательности, известной как бирка последовательности, для этих пептидов. Это част достигано пользой ESI-MS/MS19 и обычно дополнительный шаг очищения необходимо выполнять для того чтобы отделить пептиды от солей и тензидов могут присутствовать причиняют амортизацию сигнала пептида.
Более дальнеишая база данных ища как с молекулярной массой пептида так и с данными по бирки последовательности должна вести к точно выраженному идентификации протеина.
Станция 2006 Авторского права Молекулярная
Disclaimer/terminy обслуживания &
Политика Уединения& ©2005-2007 молекулярное Station.com, все
выпрямляет reserved.