Добро пожаловать к молекулярной станции!

Вы должны зарегистрировать прежде чем вы можете вывесить на наши форумы или использовать наши предварительные характеристики. Регистр Теперь! Свои свободно и быстро!

Уже зарегистрировано? Login теперь ниже.

Имя Потребителя:

Пароль:

Вспомните Меня?

Уже зарегистрировано и забыл ваш пароль? Click ниже, котор нужно взять его.

Возьмите Lost Пароль

Соедините теперь - он быстрый и свободно!

Молекулярной станцией будет самая большая сеть исследователей, научных работников и любовников науки где-либо!

Недавние Столбы Форума

Sequencing Maxam Gilbert

Как ДНАО sequenced

ДНАО sequencing использующ метод Maxam-Gilbert

Maxam-Gilbert sequencing при этот метод ДНАА sequencing вместо синтезировать ДНАО in vitro и останавливать реакции синтеза с цепными терминаторами, этот метод начинает с ДНАОМ полнометражным, концом обозначенным и колет его с низкопробными специфически реагентами. Так как этот метод работает с основаниями гуанина, только такой же принцип применяет к всем 4 основаниям; Во первых мы конц-oboznacaem часть ДНАА, котор мы хотим sequence.

Это может быть 5’- или 3’- кончает обозначать. Затем, мы дорабатываем один вид основания. Здесь мы используем этанный сульфат (DMS) для того чтобы метилировать гуанины. (фактическ, этот реагент также метилирует adenines, но не в дороге то водит к расщеплению стренги ДНАА.) Как в цепном методе прекращения, мы не хотим повлиять на каждый гуанин, или мы произведем только малюсенькие части которые не позволят нас обусловить последовательность’ДНАА с. Поэтому, мы делаем метилирование под слабыми условиями которые водят к среднему только одного метилированного гуанина в стренгу ДНАА. Затем, мы используем реагент (пиперидин) который делает 2 вещи: он причиняет потерю метилированного основания, после этого его ломает костяк ДНАА на месте lost основания (apurinic места). In this case, г in the middle of последовательность был метилирован, поэтому обрыв стренги произошел там, производящ обозначенный тример.

В другой молекуле ДНАА, первый г не смог быть метилирован, дающ подъем к обозначенному фосфату (основание и сахар были бы потеряны в химически расщеплениях). Окончательно, мы electrophorese продукты и обнаружили их радиоавтографией, как раз как в методе цеп-prekra5eni4. Of course, мы побежать 3 других реакции которая колют на других 3 основаниях. Будут несколько дорог делать это. Например, мы можем ослабеть скрепления гликозида как к аденину так и к гуанину с кислотой; после этого пиперидин причинит обрыв depurination и стренги после обоих как и gs. Если мы electrophorese это реакция а + г около реакции г только, мы можем получить как сравнением. Подобно, гидразин раскрывает и кольца thymine и цитозина, и пиперидин может после этого извлечь эти основания и сломать стренгу ДНАА на приводя к местах apyrumidine. In the presence of naCl 1M, гидразин специфически для цитозина только, поэтому мы можем побежать эта реакция рядом с реакцией C+T и получить ts сравнением.

Станция 2006 Авторского права Молекулярная