Спонсируйте/Разрекламируйте & Соедините к нам & Свяжитесь мы & О нас & Помогите нам

Молекулярная Биология Blog

Недавние Столбы Форума

 

Стерилизация

Как простерилизовать ware исследовательской лабаратории для микробиологических изучений

Содержание:

Темы устранять неисправность и форума стерилизации

Родственные Статьи Микробиологии

Информационый бюллетень Микробиологии

 

Будет стерилизацией - определением?

Стерилизация определена как разрушение всех форм жизни. Она может быть произведена эффект различными веществами. В применении к практически требованиям бактериологически лаборатории много из тех веществ such as электричество, солнечний свет, ETC, меньшего значения и ограничены в их применениях; другие настолько хорошими одетые к определенным целям что их польза почти вс ограничена к таким применениям. Используемые методы принципа наиболее часто автоклавируют (жара, пар и давление - комбинация) и химикат, тем ме менее автоклавировать само эффективно если выполнено правильн

 

2 вообще метода стерилизации

2 главных метода стерилизации.

• A) Физическо

1. Плазмолиз или Plasmoptysis (например польза соли).
2. Высушивание.
3. Жара жары (a) сухая; (b) влажная жара.
4. Свет (вклюает UV ультрафиолетовый свет).
5. Фильтрация (обычно используемая на уровне микрона для бактерий).
6. Диализ.
7. Comminution.

• Химикат Б).

1. Дезинфектанты, etc.

A)

Стерилизация Физическ Веществом

1) сконцентрированные разрешения разрушают микроорганизмы путем разделять воду от их клеток (плазмолиза), например, в консервации еды сконцентрированными разрешениями соли или сахара. Микроорганизмы привычные к сконцентрированному nutrient субстрату могут вытерпеть plasmoplysis (разрывать клетки) если установлено в более менее сконцентрированном medium.In любой случай, если они подвергается постепенно к изменяя условиям, то задержана или предотвращена смерть.

2) высушивание разрушительно к много микробов, espe cially те которые не формируют споры. Например, пикосекунда Radicicola очень чувствительна к высушиванию на обычном покрывать-stekle или на хлопке.

 

3).

Стерилизация Сух Жарой.

Это обычно использовано по мере того как а bunsen горелка в лаборатории, тем ме менее будут несколько методов топления:

1. Стерилизация в нагом пламени.
2. Стерилизация в пламени эфира.
3. Стерилизация в закутывает печь.
4. Стерилизация горячим воздухом.

1. В стерилизации в нагом пламени,

(a) Просто середины стерилизовать аппаратуру металла должна нагреть ее к красным ness в пламени. Этот метод всегда принят для платины ster ilizing, меди, ETC, проводов и утюга и шпателей никеля, корнцанга, etc.

Игла платины должна всегда быть осторожным быть высушена перед стерилизацией, путем держать ее почти пламя. Это избегает sputtering, которая разбросали микроорганизмы, специально если влажный материал, например, сало или протеин, на игле немедленно толкнут в пламя.

(b) Аппаратура может быть простерилизована пламенеющим оно, т.е., путем проходить его быстро через горячее пламя. Этот метод полезн для аппаратур, ETC, полируя поверхности devoid заломов в которых микроорганизмы могли избеубежать разрушение, например, ножи, стеклянные штанги, ручки игл платины, рти пробок испытания, склянки, пипетки, etc.

(c) Глубокие раны простерилизованы каутеризацией при аппаратура нагретая к тускловатой красной жаре.

 

2.

Стерилизация в пламени эфира

В аварийной ситуации, малых аппаратурах, иглах, ETC, смогите быть простерилизовано путем окунать их в эфире или совершенно спирте и после удаления освещая адэрентную жидкость и позволяя ее burn off поверхность аппаратур. Повторите процесс. Он может после этого безопасн быть предположен прибор поэтому после того как я обработан стерильн.

3.

Стерилизация в закутывает печь

Свечки фильтра фарфора простерилизованы путем нагревать их к белой жаре в закутывают печь. Этот метод стерилизации можно приложить к фильтрам фарфора с штуцерами металла, such as фильтры Berkefeld.

Разрушение autopsied животных и аккумулированных отходов лаборатории также самые лучшие accomplished в этом образе.

 

4.

Стерилизация горячим воздухом

Подвержением к горячему воздуху будет обычный метод стерилизовать все стеклоизделие, аппаратуры с ручками металла, ETC, но не целесообразно для органических sub stances, за исключением шерстей, хлопка и бумаги.

Для обеспечения эффективной стерилизации, подготовленного стеклоизделия, ETC, быть помещено в газе или электрически нагретой печи (содержа термометр регистрируя над 200 ч.) чей температура поддержана на приблизительно 150 C на один час, или C 180 на 10 минут. Печь должна быть позволена охладить вплоть до C 60 перед раскрывать дверь для избежания ломать стеклоизделия течениями cold-air. Хлопок, шерсти, и бумага небольш подпалены на этой температуре,

Прибор должен быть совершенно чист и сух перед быть простерилизованным.

 

4.

Стерилизация Влажн Жарой

Стерилизация влажной жарой может быть произведена эффект в одной из 4 дорог:

• 1. непрерывным или прерывным топлением на низких температурах (C 56-80).
• 2. непрерывным или прерывным топлением в воде на 100 ч.
• 3. непрерывным или прерывным топлением в пропуская паре на 100 ч.
• 4. одним топлением в superheated паре (паре под давлением) на температурах над C 100, вообще C 115 C (около 10 Ибс. Давление) или 120 (около 15 Ibs.).

 

1.

Пастеризация: Стерилизация Непрерывн или прерывное топление на низких температурах

Некоторые вещества используемые как культурные среды, был богаты в испаряющих или в противном случае химически неустойчивых веществах, можно нагреть к C 100 без маркированного изменения (например, свертывания) и в некоторый объем tion destruc их свойств; сыворотка крови, например.

Pasteur показало что такими средствами могут быть более лучшее ster ilized путем нагревать их на низкой температуре (55-60 ч.) for a long time чем на высокой температуре (70 C or even 100 ч.) на короткийа срок. В этом процессе, жара не приложена ' сразу, как правило. Управление температуры обычно выполнено посредством воды нагретой к желательному степени.

Увеличиваемое топление на низкой температуре образовывает пастеризацию. In practice, однако, найдено что убить все организмы, котор пастеризация должна быть com bined при метод прерывного топления изобретенный Тындалл. Альбуминозные средства, котор подвергли к методу Tyndall необходимо инкубировать окончательно на C 37 на часы forty-eight для того чтобы исключить все образцы показывая загрязнение.

2.

Стерилизация Непрерывн или прерывное топление в воде на 100 ч.

(a) Непрерывное Топление. Вода на C 100 разрушает вегетативные формы бактерий почти мгновенно, и споры внутри от от 5 до 15 минут обычно, хотя много спор упорных видов не убиты топлением нескольких часов на 100 C Вода заподозренная загрязнения нечистоты могут таким образом быть представлены безопасным для выпивая целей просто путем кипеть на немного минут.

Этот метод применим к аппаратурам металла, шприцам, rubber затворам, трубопроводу резины и стекла, и другому малому прибору.

(b) Прерывное Топление. (метод Tyndall.) Tyndall наблюдало что некоторые упорные формы нашли в вливании сделанном от сена не были разрушены путем нагревать вливание на C 100, как только, even when температура вытерпелась на увеличиваемый период, но путем кипеть ее на короткийа срок на 3 последовательных дня все living организмы были разрушены. Его теория была тем путем нагревать на 100 C, формы vege tative но не споры были убиты. Последние проростанут по мере того как жидкость охлаждает и убиты во время второго топления. Немного спор, однако, избегают de стручтион на втором топлении;

эти проростиют by the time третье топление должно. После третьей стерилизации топления выполняет.

Теперь, котор дали объяснение, однако, что ance сопротивлять микроорганизмов постепенно понижено под влиянием повторных heatings. Этот принцип нагревать на 3 последовательных дня, средство, котор нужно простерилизовать теперь как метод Tyndall стерилизации. В общем практика лаборатории, пар использован вместо воды на 100, но это требует специальный прибор, тогда как вода одалживает готово к серединам под рукой.

 

Физическая природа средства, внесметное сопротивление спор некоторых видов бактерий или оба в комбинации, могут требовать, чтобы это периодическ топление было снесено дальше над более длинним периодом времени, т.е., 4, 5, 6, ETC, дни в последовательности для этих же или более длинний период each time, или, чтобы период между взаимо- mittent heatings был удлинен от 24 часа к часам forty-eight.

Метод Tyndall's ценн в что средства чувствительного состава могут быть простерилизованы без производить нежелательные изменения, such as часто произведен высоким ture tempera autoclav.

3. Стерилизация в пропуская паре на 100 C Непрерывн или прерывное, (a) непрерывное топление. Просто кипеть или подвержение к пару на C 100, даже если выдержка была увеличена, не будут надежный метод стерилизации. Когда микроорганизмы были высушены, их сопротивление к влияниям жары очень увеличено, и специально это случай когда они смешаны с веществами коллоидной природы. Некоторые упорные формы протоплазмы известные как споры не могут быть разрушены одним топлением к C 100, even when температура поддержана на минуты sev eral.

(b) Прерывное Топление. Общее пользование для ilization ster средств.

Этот принцип стерилизации выдвинул находками Тындалл свое самое широкое применение в бактериологически работе с пользой пропуская пара. Высоконапорный пар может быть использован к преимуществу хорош если станция центрального отопления имеющяяся. Польза моделей стерилизатора Arnold пара для процесса стерилизации и одалживает готово и к непрерывному и прерывному методу.

4. Стерилизация Superheated Паром (под давлением и поэтому над C 100). Вода, шприцы, хирургические шлихты, постельные принадлежности, прибор Инди-reziny, фильтры, старые культивирования, культурные среды, ETC, поврежденные высокими termperatures, могут более быстро быть простерилизованы путем нагревать в паре под давлением.

Подвержение к пару на температуре C 115 на 20 минут in most cases достаточно для обеспечения стерилизации,

 

Но некоторые средства, картошка for instance, требуют температуры C 120 на от 10 до 15 минут. Теперь осуществляно что средства, котор подвергли к этой высокой температуре проходят гидролизные изменения представляют их неподобающе для культивирования более чувствительных микроорганизмов. Стерилизация в superheated паре снесена дальше в специальный прибор вызванный автоклавом, который может быть поэтому построенный о беге сразу или косвенно паром. Последнее desireable для стерилизации средств.

 

5)

Стерилизация (UV) светом

Кажется, что действует свет путем производить мощные химически germicides, вероятно органические в окиси, в средств окружающ бактерии. Одни лучи света, голубого, лилово и ультрафиолетовый луч в частности разрушительны к living клеткам. Он к этим лучам что свет солнца задолжает своему дезинфицируя действию. Практически польза была сделана ультрафиолетов лучей в стерилизации воды путем использовать светильник пара ртути Bondar4-Hewitt имея кварц вместо стеклянной пробки, по мере того как эти лучи не проходят через стекло.

6)

Стерилизация Фильтрацией

Стерилизация может быть произведена эффект фильтрацией газов или жидкостей до материалы сохранят микроорганизмы.

Самым лучшим примером фильтрации газов будет польза хлопка затыкает внутри склянки и пробки содержа микроорганизмы. Хлопок порист достаточно для того чтобы позволить обязательно взаимообмен газов но позволит ни пыль ни чужие микроорганизмы войти. Стерилизация воздуха или других газов если fore 3d через хлопок зависело бы на толщине слоя хлопка и также на усилии, то было приложено.

Некоторым жидкостям используемым в бактериологически работе можно подвергнуть даже к вмеру количеству жары без глубокомысленно изменять их природу. Для того чтобы сделать такое жидкое стерильное, она пропущена через цилиндрический сосуд, закрына на одном конце как пробка испытания, и сделана тем из пористого фарфора "печенья", крепко после того как она сгорела и unglazed (фильтр земли камеры) или кизельгура, точной диатомовой земли (фильтра Berkefeld) и термин bougie или свечке.

Поры более точных фильтров настолько малы что пока жидкости, и твердые тела в разрешении проходят до конца, микроорганизмы сохранены и пропуски жидкости до конца в germ-free состоянии.

 

Pasteur в его предыдущей работе использовало плиты гипсолита по мере того как фильтруя средство, но в результате Chamberland's исследует, пористый фарфор теперь supersedes гипсолит. Точно shredded азбест упакованный плотно в тигле Gooch будет служить по мере того как бактериальный фильтр обеспечил слой азбеста достаточно толщин. Тариф фильтрации обычно очень медленн потому что поры фильтра настолько очень мельчайши; поэтому для того чтобы отжать эти устремленность или давление недостатка или вообще использует для того чтобы поторопить процесс. Этот метод не может исключить filterable организмы.

 

 

7)

Стерилизация Диализом

В одном из более недавних методов изобрел для подготовки antirabic вакцин подготовляют, котор вакцина путем устанавливать вирус (спинной мозг осатанелого кролика) в sac коллоксилина и делать диализ его в идущем distilled water. Разрушают living вирус, но свои иммунизируя свойства сохраненные unimpaired. Довольно противоположное влияние может быть получено под некоторым что по-разному обстоятельства. Если sac коллоксилина содержа подвес патогенического организма был помещен в полости тела susceptible животного, то организмы внутри sac thrive, о содержащими в теле жидкостями которые отражают через semi-permeable мембрану.

GUMMING, G J: Rabies Hydrophobia. Изучение фикчированного вируса, определение D L M, вакционная обработка (Hogyes, Pasteur, и сделанная диализ вакцина), и испытания невосприимчивости. Журнал заразных заболеваний, VOL XIV (1914), pp. 33-52.

8)

Стерилизация Comminution

Comminution или фактический задавливать микробных клеток прибегнуты к для демонстрировать внутриклеточные энзимы.

 

Б.

Стерилизация химическое вещество

1)

Стерилизация Дезинфектантом

Стерилизация infectants dis имеет только ограничиваемая польза в бактериологически работе. Количество дезинфектанта обязательно для того чтобы разрушить existing организмы в питательной среде greater than количество обязательно для того чтобы заблокировать умножение организма может затем быть использован как инокулят; средство поэтому представлено никудышным.

• 1. Дезинфектанты могут быть использованы для всех приборов не придут в непосредственныйа контакт с культурными средами или с организмами под исследованием. Фикчированные слаболетучие infectants dis необходимо использовать, в виду того что пары, котор дали испаряющие смеси мешают рост организмов на культурных средах.
• 2. Дезинфектанты находятся в общем польза для стерилизовать руки, woodwork, для мыть из аппаратур сосудов и стерилизовать во время прививки и других экспериментов.

По мере того как пример, формалин 1-1000 mercuric хлорид, 1.5%, фенол 5%, разрешение 2% составное крезола, ETC, будьте дешев и adaptable in many cases. Тинктура iodin ценна для ран картины.

Мыла общего, и больше определенно зеленого мыла, имеют значение plight гермицидное, и это совместно с их растворяющим действием на салах и протеине, и механически cleansing который сопровождает их пользу, оправдывает задать им важное место среди химически дезинфектантов.

Дезинфектанты используемые для стерилизовать кожу перед pus колонки lecting, кровью, ETC, от living вопроса должны быть осторожным извлечься путем мыть часть наилучшим образом с спиртом перед собирать материал, в противном случае присутсвие дезинфектанта материально помешало бы с затем ростом организмов в культуре.

3. Дезинфектанты также добавлены к стерильным фильтратам no longer необходимы как культурные среды. Для этой цели малое количество некоторого дезинфектанта (such as thymol или камфора) без химически действия на составах жидкости выбирает.

Количество карболовой кислоты (0.5%) или другого химиката част добавлено к вакцинам, терминам bac, сывороткам, ETC, для сохранительных целей.

4. Дезинфектанты иногда использованы для того чтобы простерилизовать культуру когда продукты microorgansims находятся под tigation inves. Хлороформ, эфир, toluol, масло чеснока или мустарда, ETC, который могут управляться потом испарением, находятся среди самого полезного в связи с этим.

 

2)

Стерилизация Антисептиком

Химически реагенты such as принадлежат к типу известному как антисептики, т.е., вещества которых заблокируйте рост, но не разрушают бактериальную жизнь, очевидно никудышны.

Рти пробок испытания, пробок заквашивания, пипеток, ETC, обычно заткнуты с хлопком перед стерилизацией. Для этой цели хлопок идеально по мере того как он дешев и adaptable, служит фильтровать вне микроорганизмы от воздуха, пока позвольте ing готовую диффузию газов, и поже раз использовано ему смогите сгореться.

Бумага (обычная газета) может быть использована для того чтобы обернуть стеклянные ware как тарелки petri, тарелки глубок-kul6tury, пипетки, ETC, которое одно желает хранить в стерильном состоянии и для который хлопок не adaptable.

Стеклоизделие простерилизовано for the purpose of разрушая микроорганизмы присытствыющие на своей поверхности и в или на хлопке или бумаге используемых соответственно для затыкать или оборачивать. После того как стерилизация хлопок и бумага служит предотвратить микро- организмы от входа и загрязнять стерильных утварей.

Высушите жару, однако не как эффективное разоритель семенозачатка как влажная жара, будьте adaptableee к стерилизации пустых склянок культуры, пипеток и другого стеклоизделия. Горячевоздушное ization steril not only выполняет стерилизацию стеклянных ware, штепсельных вилок хлопка, ETC, но "устанавливает" штепсельные вилки так, что они будет мочь быть обращано с большим средством.

Все стеклоизделие должно быть совершенно чисто и сух или содержать следы спирта только перед подготовлять для стерилизации; в противном случае стерилизацию можно выполнить. Если рассматривайте, то способная влага присутствует в пробках испытания, склянках, ETC, она не испарится во время горячевоздушного процесса стерилизации, и она очень очевидна что температура таких влажных частей стеклоизделия не достигнет или на leastwill для превышения 100 ч.

Направления. Пробки и склянки испытания заткнуты с хлопком. Обычные корнцанги использованы для этой цели. (штанга а стеклянная может также быть использована.) Малая часть хлопка схващена на крае с корнцангом и введена в рот пробки испытания. Штепсельные вилки должны запроектировать в пробки испытания от 3 к cms. 4, и от cms 3 до 5. В шею склянок, согласно размеру склянки. Только количество хлопка должно запроектировать из рта достаточно для того чтобы защитить наружную повернутую часть (губу) пробок или склянок испытания от пыли.

Влияние "Рождеств-vala" должно избежаться. Штепсельные вилки не должны быть поэтому туго о извлекайте с затруднением, ни настолько свободно о предложении никакое сопротивление к удалению. Меньший опыт будет достаточным продемонстрировать количество хлопка к пользе и твердости с штепсельная вилка должна приспосабливать.

Хлопок затыкает для пробок испытания, склянок, ETC, может быть свернут. Этот вид штепсельной вилки более стабилизирован и может быть использован несколько времен. Имейте инструктор продемонстрировать метод завальцовки.

Для горячевоздушной стерилизации, пробки испытания заткнутые с хлопком могут быть связаны в больших пачках или после того как я установлен в корзинах провода (никогда в чашках агата), хлопок затыкает вверх. Немного пробок испытания не должны быть помещены в большой провод-korzine или в шкафе испытани-probki провода, по мере того как обязательно сэкономить космос в горячевоздушном стерилизаторе.

Тарелки petri обернуты отдельно в бумаге и связаны совместно в комплектах 3, один лист газеты делает 4 бумаги правильного размера для оборачивать тарелки petri и недорог.

3 или больше тарелки petri могут быть обернуты совместно если все должны быть использованным в то же самое время. Маркируйте каждое обыкновенно толком с номером стола.

Пипетки. Установьте часть хлопка в дне пробки испытания, заткните верхнюю часть только пипетки с хлопком (слишком плотно}, выходить но немногой из хлопка проектируя вне. Не обернуть малую часть хлопка вокруг более низкой трети пипетки, введите пипетку в пробку испытания до остальных конца на хлопке, делая подачу хлопка оборачивая как штепсельная вилка для пробки.

Оберните пипетки поэтому подготовлено в бумаге (одном слое) и свяжите и маркируйте их обыкновенно толком с номером стола.

Покрынный случай металла часто использован для держать пипетки, котор нужно простерилизовать. Верхний конец пипеток заткнут с хлопком, пипетка введены в случай, открытый конец случая заткнутого с хлопком, и замененная крышка. (этот последний метод не порекомендован для нового студента, как необходимость тщательного метода в извлекать стерильную пипетку от случая без загрязнять те остающиеся трудн для того чтобы впечатлить на ем).

Пробки заквашивания заткнуты с хлопком как сразу для пробок испытания; штепсельная вилка хлопка не должна запроектировать в шарик.

Глубокие тарелки культуры обернуты одиночно в бумаге как сразу для тарелок petri.

Скольжения и покрывать-stekla вообще простерилизованы пламенеющим, но только как необходимы.

Справки для стерилизации

1. EYRE: Бактериологически Метод. Второй Вариант (1913), pp. 26-48. BESSON: Практически бактериология, микробиология, и сыворотка Терапия (1913), pp. 3-27.
2. ВЫСТРАИВАЙТЕ: Микробиология (1911), pp. 64-67. EULER: Вообще химия энзимов (1912), pp. 118-123. ТРЕНИРОВКА 2. ПОДГОТОВКА СТЕКЛОИЗДЕЛИЯ ДЛЯ СТЕРИЛИЗАЦИИ