Спонсируйте/Разрекламируйте & Соедините к нам & Свяжитесь мы & О нас & Помогите нам

Молекулярная Биология Blog

Недавние Столбы Форума

 

Культура Плит Агара Бактериальная

Информация на росте бактериальных культур использующ плиты культуры агара

Содержание:

Плита агара и средства агара устраняя неисправность и темы форума

Родственные Статьи Микробиологии

Соедините информационый бюллетень микробиологии!

 

Будет агаром - определением?

Агар или агарагар (от смысли "овоща" слова Malay), вещество которое использовано в подготовлять один вид твердой культурной среды для бактериологически работы, будут pro трубопроводом подготовленным от различных seaweeds найденных почти индийский океан и в китайских и японских водах. Этот тип seaweed имеет несколько общих имен, как мох Цейлона или Jaffna, isinglass Бенгалии, etc. Различные виды использованы для еды и торговля значительна.

Предпосылка и история на микробиологии использующ отвар и плиты агара nutrient

Payen, французское -(about chemist 1859), получило студень агара от seaweed, corneum Gelidium, следующим образом: Позволил стоять seaweed на некоторое время в холодном разбавленном растворе хлористоводородной кислоты; кислота извлеклась путем полоскать несколько времен с водой, тогда поместил seaweed в холодном разбавленном растворе амиака; затем амиак извлекался повторный полоскать с холодной водой. Во время этого процесса, seaweed потерял 53% из своего веса в минеральных солях, крася деле, и органических составах. Остальная часть была а в воде, во время процесса которой был извлечен vegetable студень. Разрешение поэтому после того как я получено было полито, выходя никудышный седимент позади. Этот студень этим же в составе как существующ в vegetable тканях; он не был изменен химически, как будет коллагеном в подготовке gelatin. Коммерчески агар само вероятно подготовлен путем испарять это разрешение to dryness по-разному серединами.

Агар обычно приходит в руки bacteriologist как длиной, худенькие, граыисю-belye прокладки, или как блоки, или специально in recent years, in the form of сер-beloe der prisoner of war европейского изготовления.

Агар, in contrast with gelatin, будет углеводом, т.е., он состоит комбинации углерода, водопода и кислорода только. Следы азота присутствуют как примеси. Вышеуказанные качественно определения своих элементарных uents constit были сделаны Паыен, Парумбару и Юуеппе, которое сделало их определения на агаре от по-разному источников. Насколько смогите удостовериться в, своя эпирическая формула пока не была расследована в любой объем.

Как gelatin, однако, агар будет реверзибельным коллоидом. Он выдерживает вверх в холодной воде, растворяет в горячей воде после длинний кипеть к безвкусному и непахучему ясному разрешению, и твердых ifies по охлаждать к больше или меньше опаковый студню. Свое водообильное разрешение нейтрально или близко нейтрально к фталеину фенола; все еще, падение или 2 двадцатого нормального гидрата натрия достаточно для того чтобы сделать розовый цвет уловимым.

Коллоидные свойства агара не разрушены длинн-prodoljaemym топлением на высокой температуре, ни действием обычных микроорганизмов как будьте тем из gelatin. Вышеуказанные свойства, однако, повлияны на и могут вс быть повреждены реакцией жидкости в которой агар растворен.

Реакция жидкости, т.е., ли она кисловочна или алкалическа, влияет на агар о своих растворимости, солидности, цвете, транспаранте, filterability и количестве воды tion condensa. Если агар растворен в жидкости кислотности соответствующей до 0.1% HC1, то агар растворяет очень готово, фильтрует быстро, возникающий фильтрат светлым желтым, прозрачным, скользким, водообильным разрешением которое не твердеет по охлаждать. Если использован более малый процент гидро хлорноватой кислоты, то затвердевание происходит (под 40 ч.) но студень "не будет стоять вверх" и поэтому никудышным для культур скоса или плиты агара. Большое количество жульнической воды densation присутствует также.

Если агар растворен в слабом алкалическом или нейтральном отваре, то толщиная, рыжеватокоричневая, вязкостная жидкость будет полученный который фильтрует медленно и твердеет быстро на C 40, к очень твердому, опаковому, сухому студню, иметь но меньшяя вода конденсации; она сохраняет свою форму наилучшим образом в скосах и в плитах. Таким образом значение агара как твердая культурная среда поднято или понижено согласно cjegree щелочности или кислотности.

Его необходимо заметить in addition, однако, что когда раз твердея свойство агара разрушено присутсвием избытка кислоты в своем разрешении, это свойство может никогда быть возвращано обезвреживанием с алкалиом; кислота в manently разрушает реверсивность коллоида.

Melting-point агара (1.5% в нейтральном разрешении) будет C 97 и хотя свой твердея пункт находится на C 40, когда как только он твердел оно устоит вверх в термостате на температуре 50 ч. Для бактериологически целей, только ту форму агара можно использовать который остает жидким на от 38 до 40 C Агар который остает жидким только на температуре над этим пунктом был бы слишком горяч когда в жидком положении для пользы; витальность введенных организмов была бы повреждена или бы разрушена высокой температурой.

Преимущества и недостатки как агар как питательная среда

Затруднения столкнуты в подготовке твердой культурной среды от агара, должной к своим медленной растворимости, выкостности и последовательному медленному filterability. Свое разрешение (пищеварение) произведено эффект, как упомянуто над, длинним топлением в water-bath, стерилизаторе пара, autoclav, или над свободно пламенем. Отрезоко времени необходимо для вполне пищеварения зависит на 3 вещах: Реакция жидкости в агар растворен, содержание процентов агара, и метод растворять. Влияние реакции разрешений агара было обработано выше. Для вообще пользы культуры, однако, обычный агар сделан более полным маштабом +15 (агар твердеет с затруднением над более полным маштабом +30).

Агар одного процента будет очень легко soluble под равными условиями чем более высокий процент. Одним и одним половинным процентом будет количество используемое в обычных средствах агара, дающ несколько более жесткий и таким образом более желательный студень.

Агар усвоин наиболее быстро над свободно пламенем. If not после того как я нагрето достаточно, после фильтрации и стерилизации агара периодическ методом, flocculent itate precip част появляется в ранее ясное средство. Это может быть сделано для того чтобы исчезнуть in most cases путем подвергать к температуре autoclav (120 ч. 15 Ibs.).

Агар для культурных сред должен быть вс ясн когда жидкость, и однотипово опаков-prosvecivah5e когда твердое тело; он должен иметь translucence достаточно для того чтобы позволить глубокие колонии на плитах или заколоть культуры, котор нужно наблюдать готово; он не должен содержать flocculent материал, седимент, или части хлопка или фильтровальной бумаги, как эти мешают типичное развитие колонии микроорганизмов и, к inexperienced, могут некоторые времена быть ошиблены для колоний.

В первых методах всегда используемых для делать культурные среды агара, вместо фильтровать горячий агар через фильтровальную бумагу, absorbent хлопок, или азбест, он был позволен охладить, во время процесса которого седимент установленный к дну; когда твердое тело седимент было cut off. Этот метод не был желательн, по мере того как просветленность возникающего агара зависела бы на тарифе охлаждать; медленно охлаждать, более вполне седиментирование осуществило бы.

 

Агар не будет едой для микроорганизмов в общем, т.е., он не повлиян на пищеварительными энзимами большинств бактерий, как будет gelatin. Однако, знаны были бы предположены немного бактерий которые имеют силу разжижая агара, среди которой находятся sp N gelaticus B (gran) и Плох Ненчкии, оба из которых найдены, как, в морской воде. Эта инерционность compara tive агара представляет его ценной для подготовки, твердых синтетических средств, значением которых может быть en hanced путем подвергать коммерчески агар к естественному заквашиванию во время который процесс любым следам веществ еды avail способных используют вверх микроорганизмами присытствыющими. (Beijerinck.)

Агар специальной пользы в бактериологически работе в культивирование микроорганизмов необходимо дирижировать на температуре над melting-point gelatin. Эту характеристику делала возможным большие strides были приняты в медицинскую бактериологию, так много патогенические бактерии можно изолировать и вырасти только с затруднением на tures tempera под тем из тела.

 

 

ТРЕНИРОВКА 9. ПОДГОТОВКА NUTRIENT АГАРА

Прибор. ведерко 3.5 агат-agate-ware литра; 15 gms. Агар; 10 gms. Пептон; 5 gms. Соль; 10 gms. Белковина яичка (или одно яичко); вливание мяса 500 c.c. стерильное; вода крана 500 c.c.; прибор титровки; NaOH N/20; NaOH N/l; фталеин фенола (индикатор); distilled water; большая воронка; заплетенная фильтровальная бумага; заполняя воронка; стерильные пробки испытания; стерильная склянка литра; грубые балансы; большая горелка газа; чашка 1 литра измеряя; прибор для стерилизации пара.

Метод. 1. В gms места 15 ведерка ware агата 3 литров. агара в 500 c.c. воды крана.

2. Помойте агар наилучшим образом, отделяющ клоки и ing squeez оно через руки.

3. Сцедите пакостную воду, измеряя политое количество

42

ВООБЩЕ МИКРОБИОЛОГИЯ

с; замените с таким же количеством чистой воды крана.

Повторите.

4. Растворите над свободно пламенем и чиреем на 5 минут, шевеля постоянн. Tion solu должно быть вс свободно от шишек агара.

5. Добавьте пептон 1% Witte's и 0.5% соли к кипя агару.

6. До 500 c.c. мяса в сплавливании добавьте 10 gms. al яичка bumen наилучшим образом был смешан с 100 c.c. воды крана. (положено белковине яичка в tumbler и добавьте достаточную воду для того чтобы сформировать затир. Не пошевелить до ровной и после этого добавьте воду ing оставать. Одно яичко; побитое добро,

CFig 9. Воронка горячей воды для может быть заменена.) Смешайте все фильтруя агар или gelatin. Тщательно

7. Полейте расплавленную смесь агара медленно в вливание мяса, шевеля постоянн. Жара в autoclav на C 120 на forty-five минуты или на час в пропуская паре.

Примечание. Время для этого топления не может быть удлинено к преимуществу, но никогда сокращено. Если агар не был нагрет достаточно перед фильтрацией, то flocculent преципитат сформирует в пробках по нагревать в пропуская паре. In most cases это может быть причинено для того чтобы исчезнуть путем нагревать на короткийа срок в autoclav на 15 Ibs.

8. Титруйте с naOH N/20.

9. Отрегулируйте реакцию средства до +15 с нормальным naOH или нормальным HC1. Retitrate и подрегулирует реакцию if necessary.

10. Counterpoise и замечает вес.

11. Закипите 15 минут над свободно пламенем, шевеля против stantly,

РАЗРЕШЕНИЕ 43 ПЕПТОНА DUNHAM'S

12. Counterpoise и сделайте вверх любую потерю в весе с кипя distilled water.

13. Фильтруйте кипя горячую сквозную заплетенную фильтровальную бумагу как раз ранее помытую с кипя водой. Не пропустить фильтрат через такую же бумагу до тех пор пока ясно.

14. Пробки испытания заполнения 60 до 70 стерильные, использующ приблизительно 8 c.c. средства для каждой пробки.

15. Нагрейте в пропуская паре 20 минут на 3 дня suc cessive.

16. На конце окончательного топления, установьте пробки агара в inclined положении для того чтобы затвердеть (не позвольте средство коснуться штепсельной вилке) так, что большая поверхность будет pre sented для культивирования микроорганизмов. Эти вызваны скосами агара.

Примечание. Если пробки агара должны быть использованным только для скосов агара, то из средства необходимо в пробке чем когда они должны быть использованным для плакировки.

17. Простерилизовать большую склянку агара, жара на 30 минут на 4 последовательных дня.

 

 

 

Справки для культуры агара бактериальной

SMITH, F ERWIN: Бактерии по отношению к болезням растения. CVol. I,

pp. 31-36. Несколько иллюстраций. SCHULTZ, K N: Einiger Nahrsubstrate Зур Фраге von дер Береитунг.

Цент. F Бакт. I. Orig., Bd. 10, 1891, P 57.