домашн > масс-spektrometrirovanie > едман-uxudwenie > index.php
Вы должны зарегистрировать прежде чем вы можете вывесить на наши форумы или использовать наши предварительные характеристики. Регистр Теперь! Свои свободно и быстро!
Уже зарегистрировано? Login теперь ниже.
Уже зарегистрировано и забыл ваш пароль? Click ниже, котор нужно взять его.
Соедините теперь - он быстрый и свободно!
Молекулярной станцией будет самая большая сеть исследователей, научных работников и любовников науки где-либо!
Но как для некоторой правды, никакой человек не знал ее, ни он знает ее; ни богов, ни но всех вещей которых я говорю. И even if by chance он должны был проронить окончательную правду, он себя не знал бы ее; Для всех кроме сплетенный стержень догадок. ~Xenophanes (C 570-c. 480 BCE) Греческий philosopher.
Состав amino acid пептида обусловлен. Пептид hydrolyzed в свое составное amino acid путем нагревать его в 6 н HCl на 110°C на сутки. Stanford Moore и william Stein показали что амино кислоты в hydrolysates могут быть отделены хромотографией ionexchange на колонках сульфонат полистироля и quantitated путем реагировать их с нингидрином.
Амино кислоты обработали эту податливость дороги интенсивный голубой цвет, за исключением praline, который дает желтый цвет потому что он содержит вторичную амино группу. Концентрация amino acid в разрешении пропорциональна к оптически absorbance разрешения после топления оно с нингидрином. Этот метод может обнаружить микрограмм (10nmol) amino acid, которое о количестве присытствыющем в thumbprint.
Как немногая по мере того как nanogram (pmol 10) amino acid можно обнаружить посредством fluorescamine, которое реагирует с-AMINO группой в составе высоки дневной продукт. Тождественность amino acid показана своим томом вымывания, который в томе буфера использовал извлечь amino acid от колонки.
Выпарка амино-sterjn4 протеина или пептида может быть
определена путем обозначать его с смесью формирует стабилизированное
ковалентное соединение.
Fluorodinitrobenzene (FDNB) сперва было использовано для этой цели Фредеричк Сангер. Хлорид Dabsyl теперь общ использован потому что он формирует интенсивно покрашенные производные можно обнаружить с высокой чувствительностью. Он реагирует с uncharged группой a-NH2 для того чтобы сформировать производный сульфонамида стабилизировано под условиями hydrolyze скрепления пептида.
Хотя метод dabsyl для обусловливать выпарку
амино-sterjn4 чувствительн и мощн, его можно использовать
повторно на таком же пептиде потому что пептид полно ухудшен в шаге
кислот-gidroliza. Pehr Edman изобрело
метод для обозначать выпарку амино-sterjn4 и колоть ее от пептида
без нарушать пептид скрепляет между другими выпарками amino
acid. Ухудшение Edman последовательн извлекает
одну выпарку одновременно от амино конца пептида. Фениловый изотиоцианат реагирует с uncharged
терминальной амино группой в составе пептид для того чтобы
сформировать производный phenylthiocarbamoyl. После
этого, под mildy кислотными условиями, освобождено цикловое
производный терминального amino acid, которое выходит
неповрежденный пептид после того как оно сокращено одним amino
acid.
Анализы структур протеина маркированно были ускорять ход
развитием sequenators, которые будут автоматизированными
аппаратурами для определения последовательности amino acid. В жидкофазовом sequenator, тонкая пленка протеина в
закручивая цилиндрической чашке подвергается к ухудшению Edman. Реагенты и растворители извлекать пропущены над лишенной
подвижности пленкой протеина, и выпущенная ПТЮ-amino кислота
определена высоконапорной жидкостной также вызванной хромотографией
(high-performance жидкостной хромотографией, HPLC).
Один цикл ухудшения Edman снесен вне в меньш чем 2 часы. повторным ухудшением, последовательность amino acid некоторых 50 выпарок в протеине может быть обусловлена. Газофазовые sequenators могут проанализировать количества picomole пептидов и протеинов. Эта высокая чувствительность делает его возможным для того чтобы проанализировать последовательность образца протеина eluted от одиночной полосы геля СДС-poliakrilamida.
Disclaimer/terminy обслуживания &
Политика Уединения& ©2005-2007 молекулярное Station.com, все
выпрямляет reserved.