домашн > гистология > фиксирование > index.php
Вы должны зарегистрировать прежде чем вы можете вывесить на наши форумы или использовать наши предварительные характеристики. Регистр Теперь! Свои свободно и быстро!
Уже зарегистрировано? Login теперь ниже.
Уже зарегистрировано и забыл ваш пароль? Click ниже, котор нужно взять его.
Соедините теперь - он быстрый и свободно!
Молекулярной станцией будет самая большая сеть исследователей, научных работников и любовников науки где-либо!
Наукой будет любая дисциплина в дурачок этого поколения может пойти за пунктом, котор достиг гений последнего поколения. ~Max Глучкман, Политика, Закон и Ритуальн, 1965
Фиксативы и предохранители использованы для того чтобы сохранить ткани для их изучения. Общие фиксативы such as нейтральный амортизированный формалин (формальдегид 10% в saline амортизированное фосфатом (PBS)) также использованы для того чтобы изучить структуры клетки, и органелл клетки найденные в индивидуальных клетках (например, ядре, грубом эндоплазменном ретикулуме, и mitochondria). Ткани необходимо первыми механически и биохимически стабилизировать в фиксативе. Важно рассматривать что фиксатив не должен быть слишком токсическим к своему укротителю, и он не должен повредить будучи сохранянным ткань.
Когда ткань извлекается от living услови
условия, начаты несколько изменений в своих клетках. Бактерии
начинают к mtiltiply и разрушают их. Также автолиз
(собственн-pi5evarenie), lysis или растворение клеток, котор
содержат энзимами, устанавливают внутри. Кажется, что обращают
энзимы их действие; вместо синтезировать амино кислоты в
протеины клетки, они начинают разделять протеины в амино кислоты.
Эти амино кислоты отражают из клеток, и по мере того как
протеины sult re no longer не coagulable
химически реагентами. Вышеуказанные изменения водят к
so-called post-mortem условиям. Для рассмотрения
ораторства лаборатории обязательно обработать ткань для того чтобы
предотвратить эти post-mortem влияния; также обязательно
преобразовать части клетки в материалы останут неразрешимыми во время
затем обработки, и защитить клетки от искажения и усушки после того
как я подверши к жидкостям such as спирты и горячий парафин.
Более новые важные задачи подготовки ткани должны улучшить
пятная потенциал частей ткани и изменить их рефрактивные индексы к
улучшенной видимости. Процедура использовала соотвествовать
вышеуказанные вызвана фиксированием и жидкости вызваны фиксативами или
разрешениями отладки. Разрешения отладки должны соотвествовать
following главным образом задачи:
Цель фиксирования:
In some cases фиксатив может иметь сарказничая (совмещая неразрешимо) влияние на ткани, таким образом принося 2 совместно в пятная действие и помогая в приложении красок и протеинов to each other.
Ткани необходимо поместить в фиксативах как можно скорее после смерти. Если, однако, задерживает будет неизбежна, они быть помещено в холодильнике, таким образом уменьшающ автолиз и гнилость к минимуму, то до тех пор пока fixa tive можно приложить. Одиночный химикат редко обладает всем из реквизитных качеств хорошего фиксатива; разрешение отладки поэтому редк составлено только одного химиката. Знакомым исключением будет формалин. Другие надежные фиксативы жульничают tain one or more химикаты для того чтобы свернуться протеины клеток, и one or more химикаты для того чтобы представить протеины неразрешимым без actu соединяют свертываться они.
Фиксативы коагулянта изменяют spongework протеинов в сетки до парафин может легко пройти, таким образом ing формы ткань правильной последовательности для распределять. In addition, pro рычаги tein усилены коагулянтами против break down во время более последних процедур. Использовано самостоятельно, однако, коагулянты имейте disadvan tages в что они могут сформировать слишком грубую сеть для самой лучшей цитологической детали. Также, свертывание клонит навести образование искусственних структур (артефактов). Фиксативы Noncoagulant производят немногие артефакты но если использовано самостоятельно имеют недостаток давать ткани плохое жульническое sistency для врезать.
Оно поэтому следует за что идеально жидкость отладки будет комбинацией one or more коагулянтов протеина и one or more non коагулянтов. Самые эффективные разрешения этой природы, и совмещают если по возможности все типы действия. Это исключает те конструированные для фиксирования некоторого специфически компонента клетки, such as хромосомы, гликоген, mitochondria.
Потому что они содержат ингридиенты действуют на себе, много смесей само эффективно после того как я деланы вверх свежим.
Однако, индивидуальные части обычно можно делать вверх по как stock разрешениям и смешивать совместно immediately before польза. Среди част используемых химикатов находятся альдегид формы, этиловый спирт, укусная кислота, picric кислота, дихромат калия, mercuric хлорид, метахромовая кислота и tetroxide осмия.
В виду того что каждый химикат обладает своим собственным комплектом преимуществ и недостатков, каждый компонент разрешения, когда по возможности, compensate for дефект в некотором другом компоненте. Например, в случае широко используемый фиксатив, разрешение Bouin's: 1. Формальдегид исправляет цитоплазма но в таком образе что он задерживает проникание в развитии парафина. Он фиксирует chromatin плох и делает цитоплазму basiphilic. 2. Кислота Picric свертывается plasm cyto так, что она впустит парафин, выходит ткань мягким, фиксирует chromatin и делает цитоплазму ацидофильным, но она сжимает и делает химикаты chroma общ используемые в олове разрешений отладки 5 ацидофильным. 3. Укусная кислота компенсирует для обоих последних дефектов. Никакое твердое правило не существует относительно выбора фиксатива; выбор gen ' erally обусловлен типом исследования.
Если будет любой вопрос о планыов на будущее для ткани, то формалин будет безопасным выбором; он позволяет вторичное или столб-fiksirovanie. Некоторые предложения могут быть включенны. Если общее анатомирование tisstie удовлетворительно, то фиксативы rotitine можно использовать: формалин, Siisa, Zenker, Helly, или Bouin. Специальные фиксативы для inckisions клетки Carnoy, Flemming, Champy, Helly, Schaudinn, Regand, и другими. Для гистохимии исследователь ограничен к формалину, ацетону, или этиловому спирту. Большинств разрешения отладки названы после персоны возникая они; Zenker и Bouin будут примерами. Если такой же человек возник больше чем одна комбинация химикатов, то были использованы дополнительные середины обозначать их. Разрешения Flemming's слабые и сильные, серия B3 allen's, Ely, etc. Жидкость Susa была названа Юеиденюаин после первых 2 писем 2 слов: сублимируйте и saute.
Клетки пятна мертвые
hi
каждое! Я заинтересован в пятнать мертвые клетки в их культуре
клетки перед отладкой они. Я имею набор клетки LiveDead от
Invitrogen...
Фиксирование клетки для длиннего
продолжительностьа хранения
hi, Im
работающ с клетками мыши и я быстро метод исправить эти клетки и
сдержать они для более последнего анализа. :thumbs:
Оно будет главным образом поверхностен и...
Замороженное фиксирование формалина раздела
ткани
hi, whats более лучше, котор нужно
сделать? ткани фиксирования формалина после этого щелчковые
замерзая - > отрежьте их вверх или замерзните отрезок и после этого
зафиксируйте с формалином и почему? как о использовании...
Скрепления дисульфида протеина и фиксирование
тканей в гистологии?
Dudes Hiya,
weird вопрос для всех тех histologists.... во время
фиксирования тканей и клетки точно случается к внутриклеточному
цистеину...
Вы должны ЗАРЕГИСТРИРОВАТЬ ТЕПЕРЬ для того
чтобы вывесить вопрос в форуме гистологии. Login теперь
если вы уже регистрировали.
Disclaimer/terminy обслуживания &
Политика Уединения& ©2005-2007 молекулярное Station.com, все
выпрямляет reserved.