Добро пожаловать к молекулярной станции!

Вы должны зарегистрировать прежде чем вы можете вывесить на наши форумы или использовать наши предварительные характеристики. Регистр Теперь! Свои свободно и быстро!

Уже зарегистрировано? Login теперь ниже.

Имя Потребителя:

Пароль:

Вспомните Меня?

Уже зарегистрировано и забыл ваш пароль? Click ниже, котор нужно взять его.

Возьмите Lost Пароль

Соедините теперь - он быстрый и свободно!

Молекулярной станцией будет самая большая сеть исследователей, научных работников и любовников науки где-либо!

Недавние Столбы Форума

 

Протоколы ДНАА

Энциклопедия ДНАА

ДНАО Bioinformatics

Форум ДНАА

ДНАО Blog

Весточка ДНАА

Книги ДНАА

 

Протокол Алкалической Фосфатазы Шримса ПОДРЫВА

Фосфатаза или ПОДРЫВ шримса алкалическая, будут энзимом который катализирует дефосфорилирование 5’ фосфатов от концов RNA или ДНАА нуклеиновой кислоты dephosphorylating.

Заметьте что продукты PCR и также праймеры не имеют фосфатазы на их свободно концах, и поэтому быть phosphorylated до клонирования если вы идете использовать де-de-phosphorylated вектор!

ПОДРЫВ будет температурой неустойчивой будет поэтому вами может легко выключить этот энзим (сравненный к cip!). ПОДРЫВ выключен с инкубацией ванны воды 65°C на 15 минут.

Вы не получаете фактически никакую реакцию. ПОДРЫВ требует по крайней мере mgCl2 10mM (но оптимальная протеиновая активность фосфатазы шримса алкалической находится на mgCl2 20-25mM) и она работает наилучшим образом на pH 8.0.

К pmol dephosphorylate 1 концов ДНАА

К pmol dephosphorylate 1 концов ДНАА (2.5 ug плазмиды 3 kb), потому что 1hr на 37°C, котор вы:

0.1 блока ПОДРЫВА для свисаний 5', 0.2 блока для тупой и 0.5 блока для 3' над висят.
Энзим приходит 1 блок в ul, таким образом быть безопасен вы может использовать блоки approx.0.5 для 2 ug.

КОНЦЫ: Энзим ПОДРЫВА можно добавить сразу к справочнику ограничения! Таким образом все продолжение включая пищеварение энзима ограничения, дефосфорилирование, инактивирование энзима, перешнуровку или 5’ конц-oboznaca4 можно выполнить в одной одиночной пробке как раз добавлять соотвествующие реагенты. Это позволит вас сохранить время и быть эффективно!

Устраняя неисправность Фосфатаза Шримса ПОДРЫВА Алкалическая?

Обсудите и вопросы о столба о ем в форуме фосфатазы шримса алкалической и клонирования ДНАА !

Другие протоколы и методы ДНАА

Направляющий выступ Клонирования ДНАА

Электрофорез Геля ДНАА

Пищеварение энзима ограничения - все, котор вы знать!

Протокол Изоляции ДНАА Genomic

Изоляция ДНАА Baceteria

Преобразование ДНАА - содержит историю ДНАА

Найдите другие протоколы на нашей директории внешния ресурсы протоколов ДНАА или см. наши протоколы ДНАА.

Родствено:

Протоколы Microarray ДНАА

Протоколы PCR

ДНАО Bioinformatics

ДНАО Bioinformatics Посещения.

Дна-Rodstvenna4 Весточка

Весточка ДНАА