Bioinformatics, Протоколы, Протеин Proteomics RNA ДНАА

домашн > клетка > клетк-культур-protokoly > index.php

Протоколы Культуры Клетки	Культура клетки Bioinformatics и базы данных	Выучьте о культуре клетки	Культурные среды клетки, наборы, и продукты	Биология клетки и форум культуры клетки	Книги Культуры Клетки

Subculturing Клетки - Культура Клетки

Культура Клетки

Протокол Субкультуры Клетки

SUBCULTURING КЛЕТКИ

 

Получите средства 4C DMEM; Trypsin-20C; BSA-20C;

Положите в 36mL DMEM в коническую пластмассу пробки

Добавьте 4mL средств BSA к 36mL DMEM;

Получите шприц и фильтр;

Всосите вверх по средствам с шприцем.  Добавьте фильтр. 

Push out средства через фильтр на шприце.

Повторяйте дважды для того чтобы получить весь из тома. 

Положите в новую пластичную пробку коническую. 

Извлекайте старые средства путем сбрасывать в beaker; НЕ ИСПОЛЬЗУЙТЕ ВСАСЫВАТЕЛЬ (получите загрязнение!!)

Добавьте typsin 3mL к культуре.  Трипсин с клетками тяги с контейнера культуры.

Положите контейнер в инкубатор.  Ждите 2 минуты; Примите вне;  посмотрите в микроскоп. 

Попытайтесь получить меньше clumps.  Более индивидуальные клетки.

Извлекайте большой часть из трипсина путем сбрасывать в beaker.

Положите  back into инкубатор. Проверяйте част.

Шлепните контейнер на сторонах для того чтобы проверить дно для меньше clumps; посмотрите в микроскоп.

Когда см., что много индивидуальных клеток плавают вперед; Больш!

Добавьте средства к более большому контейнеру; разбавление 1:5/ 1:3 (3-5 контейнеров более больших).

Добавьте 10mL к (контейнер T75)large, 5mL к (контейнер T25)small.

Всосите из большой части (5mL клеток от T25). Добавьте к T75.

Оставьте некоторые клетки в малый контейнер.  Добавьте средства к малому контейнеру.  Проверите внутри микроскоп для одиночных клеток;  Инкубируйте в инкубаторе 37C. 

 

См. другие Клетк-protokoly на нашей директории биологии клетки и протокола культуры клетки.