Welcome to Molecular Station! Bine ati venit la Molecular Station!

You have to register before you can post on our forums or use our advanced features. Trebuie să te înregistrezi înainte de a putea posta pe forumuri sau de a utiliza caracteristicile avansate. Register Now! Înregistrează-te acum! Its Free and Fast! Libera si rapid!

Already registered? Ești deja înregistrat? Login now below. Login acum de mai jos.

User Name: Nume utilizator:

Password: Parola:

Remember Me? Remember Me?

Already registered and Forgot your password? Ești deja înregistrat și V-ați uitat parola? Click below to recover it. Faceți clic mai jos pentru a le recupera.

Recover Lost Password Recuperare Parola uitata

Join now - it's fast and free! Inscrie-te acum - Este rapid și gratuit!

Molecular Station is THE largest network of researchers, scientists and science lovers anywhere! Molecular Station este cea mai mare rețea de cercetători, oameni de știință și știință iubitori de oriunde!

Recent Forum Posts Recent Forum Posts

PCR Protocols Protocoale de PCR	PCR Bioinformatics and Databases Bioinformatics PCR și baze de date	Learn about PCR Aflați mai multe despre PCR	PCR Kits and Products Kituri PCR și Produse	PCR Forum PCR Forum	PCR Books PCR Carti

PCR Samples and Template DNA PCR exemple și șablon a ADN-ului

Template DNA and Samples for PCR Șablon de ADN și de mostre pentru PCR

Guidelines for template DNA and samples for PCR: Linii directoare pentru șablon de probe de ADN și de PCR pentru:

PCR Samples:  Types, Amount and Purity Mostrele PCR: Tipuri, suma și puritate

Types of Samples for PCR Tipuri de eșantioane pentru PCR

Single- or double-stranded DNA of any origin may be a PCR sample. Single-sau dublu-stranded DNA de orice origine ar putea fi un exemplu de PCR. Templates that can be used for amplification include animal, bacterial, plant, or viral. Template care pot fi utilizate pentru amplificarea includ animală, bacteriene, de plante, sau virale. Conversion of RNA molecules, including total RNA, poly (A+) RNA, viral RNA, tRNA, or rRNA must occur prior to amplification when using these as templates to so-called complementary DNA (cDNA) by the enzyme reverse transcriptase (either MuLV or recombinant, rTth DNA polymerase). Conversie moleculele de ARN, inclusiv totalul ARN, poli (A +) ARN, ARN virale, tRNA, sau rRNA trebuie să apară înainte de amplificare atunci când se utilizează ca aceste template-uri de la așa-numitul ADN complementare (cDNA) de către enzima revers transcriptazei (fie MuLV sau recombinant, rTth ADN polimeraza).

Amount of Material for PCR Suma de materiale pentru PCR

Starting material amount, required for PCR can be as little as a single molecule.  As a basis, up to nanogram amounts of DNA cloned template, up to microgram amounts of genomic DNA, or up to 105 DNA target molecules are best for initial PCR testing. Incepand de material de sumă, necesare pentru PCR poate fi cât de puțin o singură moleculă. Ca bază, până la nanogram sume de ADN clonate șablon, până la micrograme sume de ADN genomic, sau de până la 105 moleculelor ADN-țintă sunt cele mai bune inițială pentru testare PCR .

Purity of Template and Sample for PCR Puritate de șablon și pentru Exemplu de PCR

Purity of the DNA sample that will be used for PCR amplification does not need not be high. Puritate de mostră de ADN care va fi utilizat pentru amplificarea PCR nu pot să nu fie de mare. A single cell, a crude cell lysate, or even a small sample of degraded DNA template is usually adequate for successful amplification. O singură celulă, un lysate brute de celule, sau chiar un mic eșantion de degradare a ADN-ului șablon este, de obicei, adecvate pentru amplificare de succes. The requirements of sample purity must be that the target contains at least one intact DNA strand encompassing the amplified region and that the impurities associated with the target be dilute so as to not inhibit enzyme activity. Cerințele de exemplu de puritate trebuie să fie ca obiectivul conține cel puțin o directie care să cuprindă intacte de ADN amplificat în regiune și că impurități asociate cu țintă se dilua în așa fel încât să nu inhibă enzima de activitate. Be that as it may, for some amplifications, such as long PCR, it may be necessary to consider the quality and quantity of the DNA sample. Fie că este posibil ca, pentru unele amplifications, cum ar fi PCR lung, poate fi necesar să se ia în considerare calitatea și cantitatea de ADN eșantion. For example: 1. De exemplu: 1. When more template molecules are available, there is less occurrences of false positives caused by either cross-contamination between samples or “carryover” contamination from previous PCR amplifications. Atunci când mai multe șablon de moleculele sunt disponibile, nu există mai puțin de evenimente de succeptibile de "pozitive false, fie cauzate de contaminarea încrucișată între eșantioane sau" report "contaminarea de la PCR amplifications anterioare.

2. When the PCR amplifications lacks specificity or efficiency, or when the target sequences are limited, there is a greater chance of inadequate product yield. Când PCR amplifications sau lipsa de specificitate, eficiență, sau atunci când secvențele țintă sunt limitate, există o șansă mai mare de produse inadecvate randament.

3. When the fraction of starting DNA available to PCR is uncertain, it is increasingly difficult to determine the target DNA content. În cazul în care fracțiunea ADN disponibile incepand de la PCR nu este sigur, este din ce în ce mai dificil de a determina conținutul de ADN țintă.