| | | | | |
|---|
| | | Cell Culture Media, Kits, and Products Cell Cultura Media, Kituri, și Produse | | |
Subculturing Cells - Cell Culture Celule Subculturing - Cell Cultura
Cell Culture Cell Cultura
Cell Subculture Protocol Cell subculturi protocol
SUBCULTURING CELLS SUBCULTURING CELLS
Get DMEM media 4C; Trypsin-20C; BSA-20C; Obțineți DMEM mass-media 4C; Trypsin-20c; BSA-20c; Put in 36mL of DMEM into conical tube plastic Puneți în 36mL de DMEM în tub conic de plastic Add 4mL of BSA media to 36mL DMEM; Adăugați 4mL de BSA mass-media pentru a 36mL DMEM; Get syringe and filter; Obțineți seringă și de filtru; Suck up media with syringe. Add filter. Suge pana mass-media cu seringa. Adăugați filtru. Push out media through filter on syringe. Impuneți prin intermediul mass-media filtru pe seringă. Repeat twice to get all of volume. Repeta de doua ori pentru a obține toate volum. Put into new plastic tube conical. Puse în tub conic de plastic noi. Remove old media by dumping into beaker; DO NOT USE ASPIRATOR (get contamination!!) Eliminați vechi, de către mass-media de dumping în Beaker; Nu utilizați ASPIRATOR (get contaminare!!) Add 3mL typsin to culture. Trypsin with pull cells off the culture container. Adăugați 3mL typsin la cultură. Trypsin trage cu celule de cultura de pe container. Put container into incubator. Wait 2 min; Take out; look into microscope. Puneti recipientul în incubator. Asteapta 2 min; scoate; căutați în microscop. Try to get less clumps. More individual cells. Încercați să obțineți mai puțin clumps. Mai multe celule individuale. Remove most of trypsin by dumping into beaker. Eliminați de cele mai multe trypsin de dumping în Beaker. Put back into incubator. Puneți înapoi în incubator. Check frequently. Verificați în mod frecvent. Slap container on sides to check bottom for less clumps; look into microscope. Slap container pe laturile de jos pentru a verifica mai puțin clumps; căutați în microscop. When see many individual cells floating along; Great! Când vezi mai multe celule individuale a lungul plutitoare; Mare! Add media to larger container; 1:5/ 1:3 dilution (3-5 containers larger). Adăugați la mass-media mai mare recipient; 1:5 / 1:3 diluare (3-5 recipiente mai mari). Add 10mL to (T75)large container, 5mL to (T25)small container. Adăugați la -10 ml (T75) containere mari, pentru a 5 ml (T25) mic recipient. Suck out Most (5mL of cells from T25). Suge faptul Cele mai multe (5 ml de celule de la T25). Add to T75. Adauga la T75. Leave some cells in small container. Add media to small container. Check in microscope for single cells; Incubate in 37C incubator. Lăsați unele celule mici în container. Adăugare mici, mass-media pentru a recipientului. Verificarii singur în microscop pentru a celulelor; incubează în incubator de 37C. See other Cell-protocols at our Cell Biology and Cell Culture Protocol Directory . Vezi alte protocoale Cell-ne la Biologie celulara și cultură celulară Director protocol.
Send this page to a friend Trimiteți această pagină unui prieten 
![[أربيك]](http://www.molecularstation.com/translate/images/flag_ar.gif){kind=small}
