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Que é a diferença entre os métodos diferentes de RNAi? Hello, que é a diferença entre os métodos diferentes de RNAi? Eu significo porque siRNA, shRNA, miRNA, pode qualquer um explicar a diferença por favor? obrigado
amigos dos efeitos laterais da terapia do siRNA caros, eu gosto aos disscuss sobre os efeitos laterais do siRNA, todos que sabem sobre este podem participar no este disscuss. Para o exemplo em um orginal...
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Traficar do receptor do histamine H2: O papel do arrestin, do dynamin e do clathrin em... relacionou artigos

Traficar do receptor do histamine H2: Papel do arrestin, do dynamin e do clathrin no internalization de H2r.

Mol De Pharmacol. 2008 julho 10;

Autores: Fernandez Nc, Monczor F, Baldi A, Davio Ca, Shayo C

o internalization Agonist-induzido de GPCRs foi implicado no desensitization, no resensitization, e no downregulation do receptor. No estudo atual, nós procuramos estabelecer se o amthamine do agonist de H2r, além de promover o desensitization do receptor, induz o internalization de H2r. Nós estudamos mais mais os mecanismos envolvidos as.well.as em seu papel potencial no resensitization do receptor. Em COS7 transfected o amthamine das pilhas internalization time-dependent induzido de H2r, mostrando um 70% do endocytosis do receptor que segue uma exposição de 60 minutos ao amthamine. A remoção do agonist conduziu à recuperação rápida de resensitized os receptors à superfície da pilha. Os resultados similares foram obtidos na presença do cycloheximide, um inibidor da síntese da proteína. O tratamento com ácido okadaic, um inibidor da família de PP2A dos phosphatases, reduziu a recuperação de locais da membrana de H2r e de resposta do ampère. O overexpresion de Arrestin 3, mas não de arrestin 2 reduziu locais da membrana de H2r e resposta de H2r-evoked ampère. O cotransfection do receptor com os mutants negativos dominantes para o arrestin, o dynamin, o Eps15 (componente da maquinaria clathrin-mediada do endocytosis) ou o RNAi de encontro ao arrestin 3 abolished o internalization e o resensitization de H2r. Os resultados similares foram obtidos nas pilhas U937 que expressam endogenously H2r. Atual que os findings sugerem que o internalization amthamine-induzido de H2r é crucial para o resensitization de H2r, independent dos processos da síntese de H2r de novo mas dependente no dephosphorylation de PP2A-mediated. Embora nós não forneçamos a evidência direta para a interação de H2r com o betaarrestin, o dynamin e/ou o clathrin, nossos resultados suportam sua participação no endocytosis de H2r. O receptor rápido que recycling à superfície da pilha e a participação específica do arrestin 3 no internalization do receptor sugerem mais mais que o H2r pertence à classe A GPCRs.

PMID: 18617631 [ PubMed - como fornecido pelo publisher ]

Uma tela sistemática de RNAi revela a participação do pathway de Endocytic em neuronal... relacionou artigos

Uma tela sistemática de RNAi revela a participação do pathway de Endocytic no dysfunction neuronal dentro {elegans de Transgenic C. do alpha}-Synuclein.

Mol De Genet Do Hum. 2008 julho 9;

Autores: Kuwahara T, Koyama A, Koyama S, Yoshina S, Ren Ch, Kato T, Mitani S, Iwatsubo T

Os mutations ou as multiplicações em formulários familial da causa do gene do alfa-synuclein da doença ou do dementia de Parkinson com corpos de Lewy, e o deposition do selvagem-tipo alfa-synuclein como corpos de Lewy ocorrem como um lesion do hallmark destes disorders, consultado coletivamente como aos synucleinopathies, implicando o alfa-synuclein no pathogenesis de synucleinopathy. Para identificar genes do modificador do neurotoxicity alfa-synuclein-induzido, nós conduzimos uma tela de RNAi em elegans transgenic do C. (sem-fins do Tg) esse alfa-synuclein humano dos overexpress em uma maneira bandeja-pan-neuronal. Para realçar o efeito de RNAi nos neurônios, nós cruzamos sem-fins do Tg do alfa-synuclein com uma tensão RNAi-realçada do mutant eri-1. Nós testamos RNAi de 1673 genes relacionados ao sistema nervoso ou às funções synaptic, e identificamos dez genes que, em cima do knockdown, causaram abnormalities severos de growth/motor seletivamente em sem-fins do Tg do alfa-synuclein. Entre estes eram quatro genes (isto é, apa-2, aps-2, eps-8 e rab-7) relacionados ao pathway endocytic, including dois subunits do complexo AP-2. Consistente com os resultados por RNAi, os sem-fins cruzando-se do Tg do alfa-synuclein com um mutant aps-2 resultaram na apreensão severa do crescimento e os sem-fins do motor dysfunction.?alpha-Synuclein Tg indicaram uma sensibilidade diminuída do toque em cima de RNAi dos genes envolvidos no endocytosis synaptic do vesicle, e mostraram também a transmissão neuromuscular danificada, sugerindo que o overexpression do alfa-synuclein causou uma falha no uptake ou recycling dos vesicles synaptic. Além disso, o knockdown de apa-2, um subunit AP-2, causou uma acumulação de alfa-synuclein phosphorylated em corpos neuronal da pilha, imitar synucleinopathy. Coletivamente, estes findings levantam uma ligação pathogenic da novela entre o pathway endocytic e o neurotoxicity alfa-synuclein-induzido em synucleinopathy.

PMID: 18617532 [ PubMed - como fornecido pelo publisher ]

As seqüências do oligonucleotide que dão forma a hairpins self-self-complimentary curtos enlatam exped... relacionaram artigos

As seqüências do oligonucleotide que dão forma a hairpins self-self-complimentary curtos podem expedir o para baixo-regulamento de genes cinerea de Coprinopsis.

Métodos Do Microbiol De J. 2008 junho 17;

Autores: Costela Am, Moinhos Fotorreceptor, Bailey A, GD Foster, PM De Challen

O gene que silencia nos fungos é induzido frequentemente pelo hairpin do dsRNA que dá forma às construções a preparação de que pode reque o cloning múltiplo pisa. Para simplificar o gene que silencia nos fungos filamentous nós avaliamos um método elevado do cloning do throughput para seqüências do alvo usando o homobasidiomycete Coprinopsis cinerea, o repórter de GFP e um sistema comercialmente disponível do vetor. A marca de RNAi Systemtrade do pSUPER, que foi desenvolvida para experiências mammalian, explora H1 o promoter humano do gene do RNA do polymerase III (Pol III) e expede cloning/expression de seqüências user-defined específicas do oligonucleotide para dar forma a hairpins self-self-complimentary curtos. A transformação do C. cinerea com pSUPER constrói abrigar 19 comprimentos da haste do NT) a recuperação permitida específica dos oligonucleotides (dos transformants com transcripts reduzidos do transgene de GFP, e era mais menos fluorescente em assays da proteína e em phenotypes microscópicos. Este avanço technological deve expedir estudos genomic funcionais no C. cinerea e tem um potencial mais largo para a utilidade em outros homobasidiomycete e fungos filamentous.

PMID: 18616966 [ PubMed - como fornecido pelo publisher ]