Protocolos De Transfection

Protocolo do transfection da pilha de COS. Inclui soluções: Dextran do DEAE e chloroquine 1000X - [protocolo lido de Transfection da pilha de COS]

Protocolo de Transfection usado no knockdown Dlgh1 em lymphocytes preliminares de OT-1 T. - [knockdown Dlgh1 lido em lymphocytes preliminares de OT-1 T: Protocolo De Transfection]

O protocolo deve ser visto como um ponto começar para o optimization sistemático do transfection mediado lipofecting agentes. Uma vez que um sinal positivo foi obtido de a transfected o plasmid que carrega um gene padrão do repórter, condições optimal para o transfection pode ser estabelecido pela variação sistemática dos parâmetros tais como a densidade inicial da pilha, a quantidade e o purity do DNA, os media e o serum, e a época de exposição das pilhas ao complexo cationic-lipid-Cationic-lipid-DNA. - [DNA lido Transfection mediado por Lipofection Protocolo]

Polybrene e DMSO podem ser usados conseguir a transformação estável de diversos tipos de pilhas por plasmid DNA. O rendimento dos transformants é até 15-fold mais grande com Polybrene do que com o coprecipitation do phosphate-Phosphate-DNA do cálcio. Entretanto, não há nenhuma diferença entre os dois métodos na eficiência da transformação das pilhas pelo DNA high-molecular-weight. - [Dna Lido Transfection Usando O Protocolo De Polybrene]

O protocolo descreve o transfection do DNA do plasmid em linhas da pilha mammalian usando o electroporation, um processo por meio de que a aplicação externa de pulsos elétricos induz a permeabilidade de membrana da pilha. As pilhas na suspensão e as pilhas pequenas do volume são difíceis ao transfect, visto que as pilhas adherent e as pilhas grandes do volume são relativamente fáceis. Não obstante o tamanho de pilha ou o phenotype, aumentos da eficiência do transfection com uma concentração elevada das pilhas em um volume pequeno. - [Electrotransfection optimizing lido de pilhas mammalian no protocolo de Vitro]

O seguinte procedimento é para o transfection e o chapeamento simultâneos de 264.7 pilhas CRUAS. Este protocolo resulta no aproximadamente viability da pilha de 50% a de 70%, e daquelas pilhas viable, 20% a 40% são transfected ao usar pEYFP-N1 de Clontech. Inclua: Procedimento para rachar pilhas antes de Transfection; Procedimento para preparar Lipofectamine 2000 e DNA; Preparação de 264.7 pilhas CRUAS para Transfection. - [pilhas CRUAS lidas de Transfecting e de chapeamento 264.7 com protocolo de Lipofectamine 2000]

o DEAE-dEAE-dextran é usado geralmente obter um estouro da expressão transiente de genes cloned após o transfection de pilhas mammalian. Muitos variants da técnica foram descritos, que procuram maximize o uptake do DNA e minimizar os efeitos cytotoxic do DEAE-dEAE-dextran. Neste protocolo as pilhas são expostas momentaneamente a uma concentração elevada do DEAE-dextran-DEAE-dextran-DNA e então ao diphosphate do chloroquine, que é um facilitator do transfection. - [Transfection lido mediou por DEAE-DEAE-Dextran: Protocolo High-efficiency Do Método]

Transfection de pilhas de IMEC usando o protocolo do reagent de SuperFect Transfection. O protocolo inclui considerações experimentais do projeto. - [Transfection lido de pilhas de IMEC usando o protocolo do reagent de SuperFect Transfection]

O protocolo descreve um método para a entrega dos siRNAs em pilhas mammalian na ausência de plasmids do repórter. Isto é conseguido melhor com os reagents do transfection desenvolvidos para a entrega de oligodeoxynucleotides do antisense. As quantidades dos reagents dados abaixo são calculadas para o transfection de uma bem de uma placa 24-well. - [Transfection lido de pilhas mammalian com siRNA duplexes o protocolo]