Protocolos da preparação da pilha de alimentador

Protocolo para irradiar e chapear MEF. - [Irradiação lida e chapeamento do protocolo do MEF]

Este protocolo descreve a isolação dos fibroblasto dos embriões do rato. As pilhas embrionárias do fibroblasto do rato (MEF) são usadas como uma camada do alimentador para a cultura de pilhas embrionárias da haste do rato (ES) para ajudar a mantê-las como pilhas de haste pluripotent. A inibição de diferenciação da ES-pilha fornecida pelos alimentadores do MEF parece ser devido a sua produção do fator inhibitory da leucemia (LIF). - [Isolação e congelação lidas dos fibroblasto embrionários do rato preliminar (MEF) para placas do alimentador]

Protocolo para a preparação de camadas do alimentador dos fibroblasto embrionários preliminares. - [Preparação lida de camadas do alimentador do protocolo embrionário preliminar dos fibroblasto]

Os alimentadores do MEF são preparados semanalmente para fornecer uma carcaça para pilhas embrionárias não diferenciadas da haste (ES). As pilhas preliminares do MEF thawed, estabelecido na cultura, trataram com o mitomycin C para parar sua proliferação assim que não podem overgrow as culturas do ES, e replated então nos pratos convenientes para a cultura de pilha do ES. Este protocolo pode igualmente ser usado para preparar pilhas de alimentador das linha celular do fibroblasto de STO. - [A preparação lida do alimentador embrionário do fibroblasto do rato (MEF) chapeia o protocolo]

Protocolo para a preparação do fibroblasto embrionário murine de NeoR. - [Preparação lida do protocolo embrionário Murine dos fibroblasto de NeoR]

Este protocolo descreve a preparação de pilhas de alimentador das pilhas do MEF ou da linha celular do fibroblasto do rato de STO. As pilhas são tornadas mitotically inativas pelo tratamento com {gama} - irradiação. As camadas do alimentador podem então ser usadas para manter pilhas embrionárias da haste (ES) no estado não diferenciado. - [Lido preparando camadas da pilha de alimentador de STO ou de protocolo das pilhas do fibroblasto do embrião do rato (MEF)]

Este protocolo descreve a preparação de camadas da pilha de alimentador das pilhas do MEF ou da linha celular do fibroblasto do rato de STO. As pilhas são tornadas mitotically inativas pelo tratamento com mitomycin C. As camadas do alimentador podem então ser usadas para manter pilhas embrionárias da haste (ES) no estado não diferenciado. - [Lido preparando camadas da pilha de alimentador de STO ou de pilhas do fibroblasto do embrião do rato (MEF): Tratamento com Mitomyc]

Este protocolo descreve a preparação dos fibroblasto do embrião do rato (MEFs), que podem então ser usados como pilhas de alimentador para manter pilhas embrionárias da haste (ES) no estado não diferenciado. - [Lido preparando o protocolo dos fibroblasto do embrião do rato]

Este protocolo descreve a cultura de pilhas embrionárias da haste (ES) usando mitotically inactivating pilhas embrionárias do fibroblasto do rato preliminar (MEF) como uma camada do alimentador (preparação descrita na preparação de placas embrionárias do alimentador do fibroblasto do rato (MEF)). O media de cultura do ES é suplementado com o fator inhibitory da leucemia de recombinação (LIF) para ajudar a manter as pilhas como pilhas de haste pluripotent. Este protocolo foi aperfeiçoado para a linha celular ES-D3. - [Propagação lida do protocolo embrionário das pilhas da haste do rato de Pluripotent (ES)]

Inclui protocolos: Preparação embrionária dos fibroblasto do rato (MEF); Colhendo MEFs; Cryopreservation de MEFs; MEFs Thawing e de manutenção; Irradiando & chapeando MEFs; Cultura de pilhas humanas do ES com Matrigel® e media condicionado; Preparação do media condicionado (CM); Preparação de Matrigel® - placas revestidas; Passagem de pilhas humanas do ES em Matrigel®; Manutenção diária da cultura alimentador-livre; Pilhas humanas de congelação do ES; Pilhas humanas Thawing ES; Formação de corpos de Embryoid; - [Protocolos lidos para a manutenção de pilhas de haste embrionárias humanas em condições do alimentador livre]