protocolos padrão

Categoria: Protocolos da proteína: Protocolos da concentração da quantificação da proteína

Os ensaios da absorvência são rápidos e convenientes, desde que nenhuma reagente ou incubação adicional são exigidos.  Nenhuma proteína padrão precisa de ser preparada.  O ensaio não consome a proteína.  O relacionamento da absorvência à concentração da proteína é linear.  Porque as proteínas diferentes e os ácidos nucleicos têm características extensamente de variação da absorção pode haver um erro considerável, especial para desconhecidos ou misturas da proteína. - [Ensaio lido 280 nanômetro da absorvência]

Categoria: Biologia de pilha e cultura de pilha: Protocolos de Cytometry do fluxo: Protocolos da calibração de Cytometry do fluxo

Os cytometers do fluxo devem ser calibrados antes das medidas da intensidade da fluorescência por causa da variabilidade inerente do instrumento. Para corrigir para esta variabilidade, uma partícula padrão (glóbulos vermelhos da galinha fixa, ou CRBCs) devem ser analisados no instrumento antes de cada experiência e de tensões do tubo de photomultiplier (PMT) ajustadas conformemente para coloc os picos da emissão da fluorescência de CRBC nas canaletas predeterminadas do alvo. - [Calibração lida do fluxo Cytometers de Becton Dickinson para medidas relativas da intensidade da fluorescência]

Categoria: Biologia de pilha e cultura de pilha: Protocolos de Cytometry do fluxo: Pilha que classifica protocolos

A combinação de identificação/isolação em perspectiva de progenitors da medula e de RT-PCR quantitativo é uma ferramenta poderosa para compreender o hematopoiesis subjacente do mecanismo molecular. Descreve os procedimentos padrão do progenitor myeloid murine que mancha para as pilhas ativadas fluorescência que classificam (FACS) e os métodos da purificação do RNA. - [Pilha lida que mancha para classificar das pilhas de haste Hematopoietic (HSC) e de Progenitors Myeloid]

Categoria: Protocolos da pilha de haste

A combinação de identificação/isolação em perspectiva de progenitors da medula e de RT-PCR quantitativo é uma ferramenta poderosa para compreender o hematopoiesis subjacente do mecanismo molecular. Aqui, nós descrevemos nossos procedimentos padrão do progenitor myeloid murine que mancha para as pilhas ativadas fluorescência que classificam (FACS) e os métodos da purificação do RNA. - [Pilha lida que mancha para classificar de pilhas de haste Hematopoietic e de Progenitors Myeloid e isolar o RNA]

Categoria: Protocolos virais da manipulação: Protocolos da manipulação do fago M13

O protocolo descreve três métodos padrão para construir recombinants do bacteriófago M13: (1) ligando o ADN da inserção a um vetor tornado linear, preparado pela segmentação de M13 RF com uma única enzima da limitação; (2) usando a fosfatase alcalina para suprimir a auto-ligadura do vetor tornado linear, e (3) usando M13 RF fendido com as duas enzimas da limitação para o clonagem direcional. - [O clonagem lido no bacteriófago M13 Vectors o protocolo]

Categoria: Protocolos do RNA: RT-PCR e síntese do cDNA

Protocolo para RT-PCR.For do competidor que determina o mRNA, nós usamos um protocolo do competidor de RT-PCR com o RNAs padrão interno. Estes são adicionados em uma quantidade definida à amostra do RNA antes da reação do RT. O cDNA padrão resultante coamplified com o s - [o protocolo do competidor lido de RT-PCR]

Categoria: Protocolos da purificação do ácido nucleico: Protocolos da isolação do ADN: O plasmídeo do ADN prepara protocolos

Protocolo para a preparação de CsCl do ADN do plasmídeo. Esta é uma preparação padrão da grande escala.  Para o ADN do plasmídeo que dá um rendimento de 0.5 magnésio 1.0. - [Preparação lida de CsCl do protocolo do ADN do plasmídeo]

Categoria: Protocolos dos fungos: Protocolos da genética dos fungos

Procedimento de funcionamento padrão para a determinação da carga fungosa do tecido que utiliza a reacção em cadeia tempo real quantitativa do polymerase (QPCR). Este procedimento de funcionamento padrão fornecerá a informação em como avaliar a carga fungosa do tecido de animais contaminados por meio de uma única cópia (FKS) ou do gene de cópias múltiplas (RNA 18s) para avaliar o número de núcleos de pilha fungosos atuais. - [Determinação lida da carga fungosa do tecido que utiliza a reacção em cadeia tempo real quantitativa do Polymerase]

Categoria: Protocolos artificiais bacterianos do cromossoma de BACs

Método alcalino rápido do miniprep do lysis para isolar o ADN dos grandes clone de PAC. É uma modificação de um padrão Qiagen-Derruba o método que não usa nenhuma extração ou coluna orgânica. Os trabalhos do método muito bem para fazer sumários analíticos da limitação de clone de PAC e podem ser escalados acima de caso necessário. - [Isolação lida do ADN protocolo dos clone do CCB & do PAC]

Categoria: Protocolos da purificação do ácido nucleico: Protocolos da isolação do ADN

Este é um método alcalino rápido do miniprep do lysis para isolar o ADN dos grandes clone de PAC.  É uma modificação de um padrão Qiagen-Derruba o método que não usa nenhuma extração ou coluna orgânica.  Os trabalhos do método muito bem para fazer sumários analíticos da limitação de clone de PAC e podem ser escalados acima de caso necessário. - [Isolação lida do ADN protocolo dos clone do CCB & do PAC]

Categoria: Protocolos de Microinjection: Microinjection de protocolos do ADN

Para o microinjection em pilhas, o ADN de alta qualidade do plasmídeo purified usando procedimentos padrão. A preparação resultante é entregada então na agulha do microinjection por uma aproximação de aterro ou deenchimento. - [Preparação do ADN e carregamento lidos da agulha para a entrega do gene por Microinjection Protocolo]

Categoria: Protocolos do Transfection

O protocolo deve ser visto como um ponto de partida para a optimização sistemática do transfection negociada lipofecting agentes. Uma vez que um sinal positivo foi obtido de um plasmídeo transfected que carreg um gene padrão do repórter, as condições óptimas para o transfection podem ser estabelecidas pela variação de parâmetros sistemática tais como a densidade de pilha inicial, a quantidade e a pureza do ADN, os media e o soro, e a época de exposição das pilhas ao complexo cationic-lipido-ADN. - [Transfection lido do ADN negociado por Lipofection Protocolo]

Categoria: Imagem latente molecular: Protocolos da microscopia de elétron

Protocolo químico da fixação dos protocolos da microscopia de elétron… para pilhas Suspensão-Cultivadas da planta para TEM; Fixação padrão do Glutaraldehyde para TEM de protocolos da microscopia de elétron do animal…. A facilidade de UBC BioImaging - esplendor Bio-Rad mais o microscópio Confocal - que começa acima, pagina 1 - [os protocolos lidos da microscopia de elétron]

Categoria: Imagem latente molecular: Protocolos da microscopia de elétron

Protocolos da microscopia de elétron. Protocolo da fisiologia de LTP. Soluções. ACSF padrão é (no milímetro) NaCl, 117; KCl, 5.3; MgSO4, 1.3; NaH2PO4, 1; NaHCO3, 26; … Protocolos da microscopia de elétron - [protocolos lidos da microscopia de elétron detalhados]

Categoria: Protocolos do PCR: Optimização do PCR

Método para amplificar o ADN enzymatically pela reacção em cadeia do polymerase (PCR), incluindo procedimentos para determinar rapidamente condições para a amplificação bem sucedida dos jogos da seqüência e da primeira demão do interesse, e para aperfeiçoá-las para a especificidade, a sensibilidade, e o rendimento.  A primeira etapa do PCR envolve simplesmente misturar o ADN do molde, duas primeiras demão apropriadas do oligonucleotide, Taq ou outros polymerases de ADN thermostable, triphosphates do deoxyribonucleoside (dNTPs), e um amortecedor. - [Amplificação Enzymatic lida do ADN pelo PCR: Procedimentos padrão e protocolo da optimização]

Categoria: Biologia de pilha e cultura de pilha: Protocolos de Cytometry do fluxo

Protocolo para estimar o número das moléculas CD38 nos linfócitos de CD8+ T de indivíduos HIV-contaminados. Inclui: RECOMENDAÇÃO DO VENDEDOR PARA PE-CD38 E PE-CD4; VALIDAÇÃO DE LINEARIDADES E DA SENSIBILIDADE LOGARÍTMICAS DO AMPLIFICADOR; CONSERVAÇÃO DO NÍVEL DE EXPRESSÃO DO ANTÍGENO CD4 EM LINFÓCITOS DE CD4+ E DE SEU USO COMO UM PADRÃO BIOLÓGICO PARA A CARACTERIZAÇÃO DO INSTRUMENTO DO FLUXO CYTOMETER; DETERMINAÇÃO DO NÚMERO DAS MOLÉCULAS CD38 POR A PILHA DE CD8+; etc… - [lido estimando o número das moléculas CD38 nos linfócitos de CD8+ T de indivíduos HIV-Contaminados]

Categoria: Protocolos bacterianos da cultura de pilha: Protocolos bacterianos dos media de cultura da pilha

Este protocolo foi usado com sucesso à etiqueta 15N ou 13C/15N nossas proteínas usando nosso (DE3) sistema da expressão pET1120/BL21: Preparar os media M9 mínimos começa com a preparação de uma solução 5x conservada em estoque dos sais M9. Geralmente, os sais M9 contêm uma fonte do nitrogênio sob a forma de NH4Cl. Desde que nós queremos adicionar uma fonte etiquetada do nitrogênio, nossos sais 5x são preparados menos NH4Cl. Os sais mínimos dos media do padrão 5 X M9 menos a fonte do nitrogênio para 1L 5xM9 salgam: - [Protocolo lido da expressão nos media M9 mínimos através do promotor T7]

Categoria: Protocolos da citogenética: Protocolo in situ fluorescente dos PEIXES da hibridação

Protocolo para a hibridação in situ da fluorescência de uma ponta de prova repetitiva do ADN aos cromossomas humanos na suspensão. Técnica da hibridação que não precisa o sulfato do formamide e do dextrano. Como um sistema modelo, nós usamos o pUC específico repetitivo 1.77 da ponta de prova do ADN do ser humano, etiquetado lhe com o digoxigenin-11-dUTP pela entalhe-tradução, e cruzado lhe aos cromossomas da metafase na suspensão. Estes cromossomas foram isolados por técnicas padrão dos linfócitos humanos. - [Hibridação in situ lida da fluorescência de uma ponta de prova repetitiva do ADN aos cromossomas humanos na suspensão]

Categoria: Protocolos da farmacologia e da toxicologia: Protocolos da citotoxidade: A toxicidade do fígado analisa protocolos

Este bio-ensaio utiliza pilhas cultivadas da hepatoma do rato de H-4-II-E para avaliar o hydroxylase arílico do hidrocarboneto (AHH) que induz potências de hidrocarbonetos aromáticos planares e/ou de amostras ambientais contaminadas.  A resposta das pilhas aos produtos químicos puros do teste ou de extratos das misturas é comparada com sua resposta à tetrachlorodibenzo-p-dioxina do padrão 2.3.7.8 (TCDD). - [Protocolo lido do bio-ensaio da pilha da hepatoma do rato de H-4-II-E]

Categoria: Protocolos do ADN: Protocolos da biblioteca do ADN de Genomic

As técnicas padrão são usadas aqui para isolar o RNA cytoplasmic das pilhas de COS transfected com uma biblioteca dos plasmídeo de recombinação que contêm o ADN genomic do interesse. - [Lido colhendo o mRNA para a caça com armadilhas e a amplificação do Exon]

Categoria: Imagem latente molecular

ImageJ - processamento e análise de imagem em Java. Programa útil para MacOs MacosX e PC. A análise inclui: Meça a área, o meio, o desvio, mínimo padrão e máximo da seleção ou da imagem inteira. Meça comprimentos e ângulos. Use as unidades de medida s do mundo real - [ImageJ lido - processamento e a análise de imagem em Java]

Categoria: Protocolos ocidentais do borrão

A imunoprecipitação da proteína pode ser uma etapa preparative útil para immunoblotting.  Para proteínas muito raras, a proteína do interesse pode purified e concentrado por técnicas padrão da imunoprecipitação antes de immunoblotting.  Além, as interações da proteína-proteína podem ser testadas com um anticorpo immunoprecipitating que seja específico para uma proteína de um complexo e de um anticorpo immunoblotting que seja específico para um segundo membro do complexo. - [Immunoblotting lido: Preparando o protocolo das proteínas de Immunoprecipitated]

Categoria: Protocolos ocidentais do borrão: Protocolos ocidentais gerais dos métodos do borrão

O protocolo descreve como as proteínas são misturadas com um amortecedor da amostra e preparadas para a electroforese em geles padrão do SDS-polyacrylamide de Tris/glicina. - [Immunoblotting lido: Preparando o protocolo das soluções da proteína]

Categoria: Protocolos da biologia da planta: Protocolos da genética de Arabidopsis

Protocolo para a isolação de núcleos de Arabidopsis e a medida da utilização das taxas da transcrição do gene nuclear funcionar-em ensaios. As plantas são mmoídas em amortecedores glicol-baseados hexylene e as frações nucleares altamente enriquecidas são obtidas usando inclinações de densidade de Percoll. Os protocolos padrão e em escala reduzida são apresentados, junto com um método testado para nuclear funcionar-em ensaios. O todo o processo pode ser terminado no prazo de 3 dias. - [Isolação lida de núcleos de Arabidopsis e medida do protocolo das taxas da transcrição do gene]

Categoria: Protocolos artificiais bacterianos do cromossoma de BACs

O CCB DNAs é preparado das culturas de 5 ml de pilhas CCB-transformadas por uma modificação do método alcalino padrão do lysis (preparação do ADN do plasmídeo pelo Lysis alcalino com SDS: Minipreparation). O rendimento varia tipicamente entre 0.1 e 0.4 µg do ADN do CCB. - [Isolação lida do ADN do CCB do protocolo em escala reduzida das culturas]