protocolos da proteína

Categoria: Protocolos da isolação e da cultura da pilha preliminar: Protocolos de Microdissection da captação do laser: Preparação do tecido para protocolos de LCM

Protocolo para a fixação do álcool etílico de 70% para a recuperação do ADN, do RNA, e da proteína. - [Fixação lida do álcool etílico de 70% para a recuperação do ADN, do RNA, e do protocolo da proteína]

Categoria: Protocolos da isolação e da cultura da pilha preliminar

Protocolo para a fixação do álcool etílico de 70% para a recuperação do ADN, do RNA e da proteína. - [Fixação lida do álcool etílico de 70% para a recuperação do ADN, do RNA, e do protocolo da proteína]

Categoria: Bioinformática

Usando AFPredictor, demonstrou-se que o `requisitou os carbonos de superfície (OSCs) é uma característica de distinção de AFPs e, mais especificamente, suas superfícies gelo-obrigatórias. AFPredictor identificou AFPs dentro de um grande jogo das estruturas com especificidade maior de de 99%. Além disso, foi usado para identificar uma proteína gelo-obrigatória nova selecionando uma biblioteca das estruturas modeladas homology baseadas nas seqüências do cDNA obtidas do centeio de inverno frio-acclimated (cereale do Secale). - [Lido um protocolo computacional da seleção para o anticongelante/proteínas deEstruturação]

Categoria: Protocolos da biologia da planta: Proteínas, Peptides e antígenos de planta

O pH é um parâmetro importante que controla muitos caminhos metabólicos e sinalizando em pilhas vivas. Os indicadores de pH fluorescentes de recombinação (pHluorins) entraram a moda para o pH celular da monitoração. São derivados do Aequorea o mais popular victoria GFP (Avoirdupois-GFP). Aqui, nós apresentamos um repórter que fluorescente novo do pH a proteína da laranja seapen o gurneyi de Ptilosarcus (Pinta-GFP) e comparamos suas propriedades com os pHluorins para a expressão e o uso nas plantas. - [Lido uma ponta de prova fluorescente nova do pH para a expressão nas plantas]

Categoria: Protocolos do Organelle da pilha: Protocolos Subcellular do fraccionamento

O protocolo descreve os sistemas em que as membranas são permitidas flutuar com um inclinação de densidade de uma zona densa da carga. Este é um formato ideal. - [Lido um inclinação Self-generated para discriminar uma posição Cytosolic ou da membrana do grande complexo da proteína]

Categoria: Protocolos da purificação do ácido nucleico

Protocolo para um método de uma etapa para a preparação simultânea do ADN, do RNA, e da proteína das pilhas e dos tecidos. O rendimento do RNA total depende da fonte do tecido ou de pilha, mas está geralmente na escala de 4-7 µg/mg que começam o tecido ou as 5-10 pilhas µg/106.  IMPORTANTE: Prepare todos os reagentes usados neste protocolo com pirocarbonato Diethyl (DEPC) - H2O tratado. - [Lido um método de uma etapa para a preparação simultânea do ADN, do RNA, e da proteína das pilhas e do tecido]

Categoria: Protocolos da proteína: Protocolos da concentração da quantificação da proteína

Ensaio da absorvência em 280 nanômetro.  Este método é apenas tão conveniente quanto para a absorvência em 280 nanômetro.  Pode-se preferir se há uma contaminação excessiva por ácidos nucleicos, desde que os ácidos nucleicos absorvem a radiação muito pequena em 205 nanômetro.  Ajustar o comprimento de onda é um pouco complicado desde que 205 nanômetro são direitos no ombro do pico da proteína. - [Ensaio lido 205 nanômetro da absorvência]

Categoria: Protocolos da proteína: Protocolos da concentração da quantificação da proteína

Os ensaios da absorvência são rápidos e convenientes, desde que nenhuma reagente ou incubação adicional são exigidos.  Nenhuma proteína padrão precisa de ser preparada.  O ensaio não consome a proteína.  O relacionamento da absorvência à concentração da proteína é linear.  Porque as proteínas diferentes e os ácidos nucleicos têm características extensamente de variação da absorção pode haver um erro considerável, especial para desconhecidos ou misturas da proteína. - [Ensaio lido 280 nanômetro da absorvência]

Categoria: Protocolos da proteína: Precipitação Procols da proteína

Precipitação da acetona da proteína do amortecedor RLT ou do amortecedor RLT. QIAGEN. - [Precipitação lida da acetona da proteína do amortecedor RLT ou do amortecedor RLT]

Categoria: Protocolos da isolação e da cultura da pilha preliminar: Protocolos da cultura de pilha mamífera

Há muitas maneiras de adaptar linha celular aos media serum-free. Cinco métodos são apresentados que são projetados adaptando hybridomas a um media protein-free. Estes protocolos podem exigir algumas modificações para suas linha celular e circunstâncias particulares. - [Lido adaptando pilhas a um protocolo Serum-Free do ambiente]

Categoria: Protocolos da cromatografia: Protocolos da cromatografia de Immunoaffinity

Purificação do anticorpo (anti-soro ou ascites pela cromatografia de Proteína A/G). A espécie e o tipo da proteína A de IgG do coelho do Agarose do anticorpo ou da proteína A do rato IgG2 de G da proteína do rato IgG1 de G da proteína ou da proteína G de IgG dos carneiros de G da proteína do rato IgG3 de G da proteína mas ligam fraca a proteína G de IgG do rato mas a proteína de IgG da cobaia dos ligamentos fraca uma proteína de IgG do cão uma proteína de IgG do porco de G da proteína de IgG da cabra uma proteína G. de IgG do hamster. Por Millipore. - [Purificação lida do anticorpo de afinidade da cromatografia da proteína A/G]

Categoria: Protocolos da cromatografia: Protocolos da cromatografia de afinidade

A proteína de recombinação ou um fragmento bioactive quimicamente sintetizado são imobilizados na resina e usados como uma ponta de prova para capturar proteínas de interação diretamente de um extrato da pilha.  as proteínas Afinidade-purified são fraccionadas pela electroforese do gel e visualizadas pela mancha de Coomassie.  As proteínas que interagem são identificadas especificamente comparando este perfil do gel a um obtido dos lysates da pilha passados sobre uma resina do controle que falta a proteína imobilizada da ponta de prova. - [Purificação lida da afinidade de proteínas de interação do protocolo de Lysates da pilha]

Categoria: Genética e genómica: Protocolos da genética do cancro

Descreva os métodos para identificar e dosar o transcrito específico de A/E9a em t (8; 21) amostras dos pacientes relativo ao transcrito de AML1-ETO que codifica 752 a proteína completo conhecida do ácido aminado AML1-ETO (AE). Inclui: Preparação do RNA e RT-PCR; Quantificação relativa do AE9a e dos transcritos da AE. - [Lido um Isoform alternativamente emendado de t (8; 21) O transcrito promove Leukemogenesis]

Categoria: Protocolos da farmacologia e da toxicologia: Protocolos dos ensaios de enzima

O protocolo fornece uma maneira rápida de analisar para a atividade RNA-dependente do polymerase de RNA (RdRP) em amostras da proteína crua.  Os produtos da transcrição de RdRP permanecem na origem durante a cromatografia de papel. - [Lido um ensaio para o protocolo RNA-Dependente da atividade do Polymerase de RNA]

Categoria: Biologia de pilha e cultura de pilha: Protocolos de Apoptosis: Análise de Apoptosis

Um procedimento Integrative para a identificação e a medida de Apoptosis. Laboratório/grupo de Yingyu Cui: Laboratório chave nacional da engenharia da proteína e da genética da planta, faculdade das ciências da vida. Eu transferi arquivos pela rede um procedimento integrative com que um resultado relativamente satisfatório pode ser obtido depois de um único estágio da cultura de pilha e do tratamento transiente da pilha, então deteção com instrumentos diferentes. Isto encurta o tempo da experiência. - [Lido um procedimento Integrative para a identificação e a medida de Apoptosis]

Categoria: Protocolos da biologia molecular: Protocolos do hidrato de carbono

A cromatografia de afinidade líquida do elevado desempenho (HPLAC) é um procedimento útil para investigá-lo interações entre proteína obrigatória do hidrato de carbono e seus ligands. As exigências técnicas são similares à HPLC convencional. HPLAC pode selecionar e separar ligands naturais das misturas biológicas complexas. WeiTong Wang~GlycoTech Corporaçõ, Rockville, Maryland - [análise lida de Ligands do Oligosaccharide pela cromatografia de afinidade líquida do elevado desempenho]

Categoria: Protocolos da proteína: Electroforese da proteína

Um guia excelente na análise das proteínas em geles de SDS-PAGE, com da mancha com a tintura azul do coomassie e análise ocidental do borrão. Análise dos geles de proteína (SDS-PAGE). David R. Caprette, universidade de arroz. - [Análise lida dos geles de proteína (SDS-PAGE)]

Categoria: Protocolos da proteína: Protocolos do Phosphorylation da proteína

Métodos de descrição de papel para monitorar a atividade da quinase, a especificidade carcaça do kinase†de investigação da “, o phosphorylation de exame no planta e a determinação de locais do phosphorylation em uma proteína. Além, as considerações estratégicas para o projeto experimental e as variáveis serão discutidas. Peck de Scott C., o jornal da planta. - [Análise lida do phosphorylation da proteína: pdf dos métodos e das estratégias]

Categoria: Protocolos da proteína: Protocolos da imunoprecipitação

os complexos do Anticorpo-antígeno são removidos da solução pela adição de um formulário insolúvel de uma proteína obrigatória do anticorpo tal como a proteína A, a proteína G ou o segundo anticorpo. Protocolos da imunoprecipitação/metodologia e informação de fundo técnico. P.J. Ha - [análise lida das proteínas por Imunoprecipitação]

Categoria: Protocolos da proteína: Protocolos da purificação do anticorpo

Purificação do anticorpo (anti-soro ou ascites pela cromatografia de Proteína A/G). Preparação do amortecedor, preparação de uma proteína uma coluna de afinidade do Agarose ou do Agarose de G da proteína, derramando a coluna de afinidade da proteína A/G, a preparação do anti-soro ou as ascites para a cromatografia de afinidade, cromatografia de afinidade usando o Agarose da proteína A/G. - [Purificação lida do anticorpo - anti-soro ou ascites pela cromatografia de Proteína A/G]

Categoria: Protocolos da cromatografia: Protocolos da cromatografia de Immunoaffinity

PURIFICAÇÃO do ANTICORPO pela cromatografia de afinidade. Por Beth, laboratório UCSF de Mullins. À afinidade purify anticorpos, geram lotes do lysate de Escherichia Coli que contem seu antígeno. Se a proteína pode estar o gelo que thawing, a seguir para ir adiante e purify a proteína do lysate de Escherichia Coli e para a manter congelada até que você precisar da acoplar a uma coluna do CH-sepharose. - [PURIFICAÇÃO lida do ANTICORPO pela cromatografia de afinidade]

Categoria: Protocolos da proteína: Protocolos da purificação do anticorpo

PURIFICAÇÃO DO ANTICORPO NA COLUNA DE G DA PROTEÍNA. Laboratório de Jorker, Caltech. - [PURIFICAÇÃO lida do ANTICORPO na COLUNA de G da PROTEÍNA]

Categoria: Imunologia: Antígeno

Projeto do antígeno e purificação dos soros. Anti-soros feitos sob encomenda. Sigma Aldrich. Seleção e projeto do Peptide, estratégia de acoplamento # selecionando o portador da proteína, Peptides antigénicos múltiplos (mapas), escolha do anfitrião, adjutor, imunização, & soros coleção, purificação dos anti-soros, precipitação do sulfato do amónio, proteína A/G, purificação de Immunoaffinity. - [Projeto do antígeno e purificação lidos dos soros]

Categoria: Protocolos do Transfection: Protocolos estáveis do Transfection

O AfCS está utilizando a tecnologia antisentido para manipular a expressão da proteína da sinalização nos 264.7 CRUS macrófago-como a linha celular. Isto pode ser conseguido pelo transfection de oligonucleotides antisentido gene-específicos (ASOs). O seguinte procedimento envolve o transfection de ASOs em 264.7 pilhas CRUAS usando o reagente do transfection de FuGENE 6. Subseqüentemente, o RNA ou a proteína total isolada destas pilhas transfected podem ser usados para avaliar o nível de knockdown do mRNA ou da proteína, respectivamente. - [Transfection antisentido lido do Oligonucleotide de 264.7 pilhas CRUAS com FuGENE 6 em um prato 24-Well]

Categoria: Ensaios do gene do repórter: Protocolos do ensaio da B-Galactosidase

O método descreve como um extrato cru é preparado, e a atividade é normalizada à quantidade de proteína analisada. Este método é particular apropriado para comparar as pilhas que são crescidas sob circunstâncias muito diferentes ou que têm fundos genéticos diferentes. - [Ensaio lido da ß-Galactosidase no fermento: Ensaio de extratos do petróleo bruto]