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5 ' - amplificação do cDNA da extremidade usando o protocolo clássico da RAÇA - http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/14/pdb.prot4131

Categoria: Protocolos do PCR: protocolos da síntese do cDNA

Para gerar “5 ' - clone parciais do cDNA da extremidade” usando a RAÇA clássica, os produtos da primeiro-costa são gerados pela transcrição reversa (extensão da primeira demão) de uma primeira demão gene-específica conhecida (GSP-RT). Então, um poli (A) a cauda é adicionada usando o deoxynucleotidyltransferase terminal (Tdt) e o dATP. A amplificação é realizada usando três primeiras demão. - [' - Amplificação lida do cDNA da extremidade 5 usando o protocolo clássico da RAÇA]

Rotulagem da Chem-Ligação do ADN ou do RNA com ESCAVAÇÃO ou protocolo da biotina - http://www.roche-applied-science.com/PROD_INF/MANUALS/InSitu/pdf/ISH_63-65.pdf

Categoria: Protocolos da citogenética: Protocolos etiquetados biotina da ponta de prova da ESCAVAÇÃO

Este protocolo descreve como usar a Chem-Ligação da ESCAVAÇÃO para etiquetar diretamente todo o ADN [por exemplo plasmídeo, produtos do PCR, cDNA preparados do mRNA] ou RNA (por exemplo RNA total, poli (mMRNA de A)+). A Chem-Ligação da ESCAVAÇÃO ou a Chem-Ligação da biotina podem igualmente ser usadas para etiquetar oligonucleotides. Inclui: Pureza exigida de moldes da Chem-Ligação da ESCAVAÇÃO; Dirija a rotulagem da ESCAVAÇÃO do mRNA ou do cDNA com Chem-Ligação da ESCAVAÇÃO; Produto básico exigido para a rotulagem direta do ADN ou do RNA; Estimando o rendimento de ácidos nucleicos Escavar-etiquetados. - [Rotulagem lida da Chem-Ligação do ADN ou do RNA com ESCAVAÇÃO ou protocolo da biotina]

Indicar-PCR protocolo diferencial - http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/2/pdb.prot3844

Categoria: Protocolos do PCR

O método usa o PCR para amplificar e indicar muitos cDNAs derivados dos mRNAs de uma pilha ou de um tipo dado do tecido. O método confia em dois tipos diferentes de oligonucleotides sintéticos: primeiras demão antisentido escoradas e primeiras demão arbitrárias do sentido. Uma primeira demão escorada típica é complementar a aproximadamente 13 nucleotides do poli (A) cauda do mRNA e os dois nucleotides adjacentes da seqüência transcrita. - [Protocolo Indicar-PCR diferencial lido]

Protocolo indireto da técnica da peroxidase - http://www.nottingham.ac.uk/pathology/protocols/indfroz.html

Categoria: Protocolos de Immunohistochemistry

Protocolo para a técnica indireta da peroxidase. Inclui: Seções: Espessura-Entre 5 e 10 mícrons. Pegare no ácido crómico gravado, no alume do poli-L-lysine ou de cromo/em corrediças revestidas gelatine. Seque na temperatura ambiente durante a noite (não mais por muito tempo de 72 horas). - [Protocolo indireto lido da técnica da peroxidase]

Isolação do RNA poli de A+ do RNA total pela cromatografia oligo da celulose (do deoxythymidine) - http://wheat.pw.usda.gov/~lazo/methods/au/m6e1.html

Categoria: Protocolos do RNA: protocolos da extração do mRNA

Isolação do RNA poli de A+ do RNA total pela cromatografia oligo da celulose (do deoxythymidine). O RNA total é isolado primeiramente dos tecidos ou as pilhas e mRNA são isoladas então pela seleção de PolyA+ usando a celulose (descolamento) oligo. Isto é necessário para todas as fontes do tecido ricas no RNase (e nas linha celular). Laboratório de Lazo - [isolação lida do RNA poli de A+ do RNA total pela cromatografia oligo da celulose (do deoxythymidine)]

Isolação do RNA poli de A+ do RNA total pela cromatografia oligo da celulose (do deoxythymidine) - http://wheat.pw.usda.gov/~lazo/methods/au/m6e1.html

Categoria: Protocolos da cromatografia: Cromatografia de afinidade do RNA do ADN

Isolação do RNA poli de A+ do RNA total pelo protocolo oligo da cromatografia da celulose (do deoxythymidine). Faulkner-Jones - [isolação lida do RNA poli de A+ do RNA total pela cromatografia oligo da celulose (do deoxythymidine)]

PREPARAÇÃO POLI do RNA de A+ usando a protease K e SDS - http://wheat.pw.usda.gov/~lazo/methods/au/sect9.html

Categoria: Protocolos do RNA: protocolos da extração do mRNA

PREPARAÇÃO POLI do RNA de A+ usando a protease K e SDS. Laboratório de Bowtell. - [PREPARAÇÃO POLI lida do RNA de A+ usando a protease K e SDS]

O Poli-L-Lysine revestido desliza o protocolo - http://www.nottingham.ac.uk/pathology/protocols/pll.html

Categoria: Protocolos de Immunohistochemistry: Protocolos tratados revestidos das corrediças

Protocolo para corrediças revestidas poli-L-lysine. Inclui: MÁQUINA DE MANCHA DO ESQUI; CARROSSEL DE SHANDON ELLIOT. - [Protocolo revestido lido das corrediças do Poli-L-Lysine]

Purificação de poli (RNA de A)+ do RNA total - http://kuchem.kyoto-u.ac.jp/seika/shiraishi/protocols/oligotex.html

Categoria: Protocolos do RNA: protocolos da extração do mRNA

Purificação de poli (RNA de A)+ do RNA total. Hideaki Shiraishi, universidade de Kyoto. O protocolo emprega Oligotex-dT30 para poli (purificação do RNA de A)+. - [Purificação lida de poli (RNA de A)+ do RNA total]

Rotulagem aleatória da primeira demão do PolyA e do protocolo do RNA - http://molbiol.ru/eng/protocol/23_01.html

Categoria: Protocolos da modificação do ácido nucleico: Protocolos de rotulagem da primeira demão aleatória

Protocolo para a rotulagem aleatória da primeira demão de A poli e de RNA. Inclui: Reação aleatória da primeira demão; purificação do cDNA; Hibridação; Lavagem; Descascamento das membranas. - [Rotulagem aleatória lida da primeira demão do PolyA e do protocolo do RNA]

A amplificação rápida de 3 ' cDNA termina 3 ' - protocolo da RAÇA - http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/2/pdb.prot3865

Categoria: Protocolos do PCR: protocolos da síntese do cDNA

3 ' - as reações da RAÇA são usadas para isolar o desconhecido 3 ' seqüências ou para traçar os 3 ' términos dos mRNAs em uma seqüência do gene. 3 ' - a RAÇA exige o conhecimento de uma região pequena de seqüência dentro do RNA do alvo ou de um clone parcial do cDNA. Uma população dos mRNAs é transcrita no cDNA com uma adaptador-primeira demão que consiste em seu fim em 3 ' fim de um poli (T) intervalo e seus 5 ' de uma seqüência arbitrária de 30-40 nucleotides. - [A amplificação rápida lida de 3 ' o cDNA termina ' - o protocolo da RAÇA 3]

Seleção de poli (RNA de A)+ por Grupo Cromatografia - subscrição exigida - http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/2/pdb.prot4048

Categoria: Protocolos da cromatografia: Cromatografia de afinidade do RNA do ADN

Quando muitas amostras do RNA deverem ser processado ou ao trabalhar com pequenas quantidades (<50>seleção lida de poli (RNA de A)+ por Grupo Cromatografia - subscrição exigida]

Seleção de poli (RNA de A)+ por oligo (descolamento) - cromatografia da celulose - subscrição exigida - http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/2/pdb.prot4047

Categoria: Protocolos da cromatografia: Cromatografia de afinidade do RNA do ADN

A cromatografia nas colunas (descolamento) oligo é o método preferido para a purificação em grande escala (>25 Âµg) de poli (RNA de A)+ extraído das pilhas mamíferas. Tipicamente, entre 1% e 10% do RNA aplicado à coluna (descolamento) oligo é recuperado como poli (RNA de A)+. Porque o método pode ser frustratingly lento, não se recomenda para a purificação de poli (RNA de A)+ das amostras múltiplas. Com esta finalidade, eluição do grupo (a seleção de poli (RNA de A)+ por Grupo Cromatografia) é a escolha melhor. - [Seleção lida de poli (RNA de A)+ por oligo (descolamento) - cromatografia da celulose - subscrição exigida]

A síntese do cDNA sonda do mRNA usando o protocolo aleatório das primeiras demão do Oligonucleotide - http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/2/pdb.prot3868

Categoria: Protocolos do ADN: protocolos da biblioteca do cDNA

O protocolo descreve a geração de pontas de prova do cDNA de poli (A)+ mRNA usando primeiras demão aleatórias do oligonucleotide. As pontas de prova deste tipo são usadas para a seleção diferencial de bibliotecas do cDNA. - [Síntese lida de pontas de prova do cDNA do mRNA usando o protocolo aleatório das primeiras demão do Oligonucleotide]

Polimerização de Tubulin com protocolo de GTP/GMPCPP/Taxol - http://mitchison.med.harvard.edu/protocols/poly.html

Categoria: Protocolos do Cytoskeleton: Protocolos dos Microtubules

Protocolo para a polimerização do tubulin com GTP/GMPCPP/Taxol. Inclui: Soluções & fontes; Esclarecimento de Prepolymerization; Polimerização de GTP; Polimerização de Taxol; Polimerização de GMPCPP; Determinando a concentração de GMPCPP/Taxol MTs. - [Polimerização lida de Tubulin com protocolo de GTP/GMPCPP/Taxol]

Isolação do RNA do fermento: Protocolo em grande escala - http://www.cshprotocols.org/cgi/content/extract/2006/1/pdb.prot4154

Categoria: Protocolos do fermento: Protocolos do ácido nucleico do fermento: Protocolos da isolação do RNA do fermento

O protocolo descreve a isolação em grande escala do RNA do fermento. É projetado render mais de 10 o magnésio do ácido nucleico total e µg 300-400 de poli (A) - mRNA selecionado de cada cultura de 500 ml. - [Isolação lida do RNA do fermento: Protocolo em grande escala]

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Escolha o protocolo encalhado da isolação do ADN do plasmídeo

Um único protocolo encalhado da isolação do ADN do plasmídeo que descreve a produção e a isolação de ADN single-stranded (ssDNA) que usam-se bacteriophagemid-contendo as bactérias e o fago do ajudante. A infecção das pilhas de anfitrião com fago do ajudante permite empacotando do ssDNA no bacteriófago. O ssDNA pode então ser isolado das partículas do fago.

Rotulagem do ADN de Genomic do protocolo dos Microarrays

Os microarrays do ADN são um arranjo requisitado das moléculas do ADN complementares aos genes do interesse que “são manchados” pelo equipamento robótico em uma carcaça da placa de vidro. A expressão dos genes nas pilhas pode ser monitorada com microarrays preparando o cDNA do mRNA das pilhas do interesse e medindo a hibridação ao microarray. Este protocolo descreve a rotulagem do ADN genomic para o uso como uma ponta de prova para a hibridação ao cDNA manchado na disposição.

Protocolo do Transfection da pilha da drosófila

Um método simples do transfection da pilha de cultura do tecido da drosófila.

Protocolo da polimerização de Tubulin usando GTP e GMPCPP

Tubulin é polimerizado em microtubules pelo tubulin da incubação em 37°C com GTP. Uma semente da nucleação é adicionada quando a finalidade é analisar o alongamento do microtubule. Tubulin pode igualmente ser polimerizado para as finalidades de recicl o tubulin ou de etiquetar os microtubules com o tubulin fluorescente etiquetado. Baseado no protocolo por Timothy Mitchison da Universidade de Harvard.

A preparação do protocolo do Microarray do ADN fluorescente sonda do mRNA humano

Esta preparação do protocolo do Microarray de pontas de prova fluorescentes do ADN do protocolo humano do mRNA descreve a produção de pontas de prova etiquetadas com as tinturas fluorescentes, Cy3 e Cy5, seguindo a síntese do cDNA do mRNA humano e a hibridação das pontas de prova aos microarrays do ADN.

Sonde a preparação para Microarrays do ADN de 22 x 40 milímetros

Sonde a preparação para um protocolo de 22 x 40 Microarrays do ADN do milímetro.

Extração de clorofórmio ácida do fenol da isolação do RNA do Thiocyanate de Guanidinium

Um protocolo da isolação do RNA da única etapa usando a extração de clorofórmio do fenol e o Thiocyanate ácido de Guanidinium. Este método da isolação do RNA usa o fato de que o thiocyanate do guanidinium pode simultaneamente lyse as pilhas e RNAses celular inativo durante a etapa inicial da isolação do RNA permite uma única etapa no método.

In vitro protocolo traduzido do ensaio da quinase do MOS do Xenopus

In vitro protocolo traduzido do ensaio da quinase do MOS do Xenopus. Em resposta ao progesterone, os oocytes imaturos do Xenopus amadurecem-se aos ovos que podem ser fertilizados. A quinase de proteína do MOS é essencial para a maturação do oocyte, muito provável devido a sua habilidade de ativar a cascata da quinase do MAPA. Esta cascata da quinase do MAPA conduz eventualmente à ativação de Cdc2/cyclin B e entrada na fase de M. Neste protocolo, a quinase etiquetada do MOS é traduzida in vitro, immunopurified, e usada em um ensaio da quinase.

Protocolo imobilizado da seleção do anticorpo do fago do antígeno

Um protocolo para a seleção de anticorpos do fago usando o antígeno imobilizado. Este método descreve a seleção dos anticorpos das bibliotecas do anticorpo do bacteriófago que reconhecem um antígeno específico. A biblioteca do indicador do fago de partículas deindicação do fago é expor ao antígeno anexado a uma carcaça contínua (tubos de Nunc Immuno™). As partículas do fago com afinidade para o antígeno ligam ao antígeno imobilizado e são selecionadas da biblioteca do fago que expressa anticorpos.