protocolos das plantas

Categoria: Protocolos Da Biologia Da Planta: Proteínas de planta, peptides e antígenos

O pH é um parâmetro importante que controla muitos pathways metabolic e sinalizando em pilhas vivas. Os indicadores fluorescentes recombinant do pH (pHluorins) vieram no vogue para monitorar o pH celular. São derivados do Aequorea o mais popular victoria GFP (Avoirdupois-GFP). Aqui, nós apresentamos a uma novela o repórter que fluorescente do pH a proteína da laranja seapen o gurneyi de Ptilosarcus (Pinta-GFP) e comparamos suas propriedades com os pHluorins para a expressão e o uso nas plantas. - [lido uma ponta de prova fluorescente do pH da novela para a expressão nas plantas]

Categoria: Protocolos Da Biologia Da Planta: Protocolos Do Genetics De Planta

AFLP foi projetado como um método altamente sensível para que o fingerprinting do DNA seja usado em uma variedade dos campos. Nós estamos usando esta tecnologia gerar marcadores baseados DNA para os genes do cloning envolvidos em respostas phototropic em umas plantas mais elevadas que sejam identificadas somente genetically pelo phenotype do mutant. O protocolo inclui: Gere a população F2 (ou F3) recombinant polymorphic; Isole o DNA genomic; Limitação do DNA; Ligation dos adaptadores; Pre-pre-amplification do DNA do molde; AFLP-PCR; etc.. - [AFLP Lido Para O Cloning Posicional]

Categoria: Protocolos de PCR: AFLP PCR

Mannie Liscum e Paul Oeller. Departamento da biologia da planta. Instituição de Carnegie de Washington, Stanford. A tecnologia de AFLP é usada aqui gerar marcadores baseados DNA para os genes do cloning envolvidos em respostas phototropic em umas plantas mais elevadas que sejam somente i - [AFLP lido: não somente para o fingerprinting, mas para o cloning posicional]

Categoria: Protocolos Do Cytogenetics

Protocolo para a transformação Agrobacterium-mediada no arroz. método Agrobacterium-mediado da transformação do arroz que é aplicável às variedades fàcilmente cultivadas além às variedades do japonica do elite que são mais difíceis de cultivar. Usando este método, as plantas de arroz transgenic podem ser obtidas em aproximadamente 2-3 meses com uma freqüência da transformação de 30-50%, em ambos em variedades fàcilmente cultivadas e no arroz recalcitrant do japonica do elite. - [transformação Agrobacterium-Mediada lida no protocolo do arroz]

Categoria: Protocolos Da Biologia Da Planta: Protocolos Da Transformação De Arabidopsis

A transformação e a seleção de Arabidopsis no ágar do kanamycin, preparação das plantas para a transformação, agrobacterium, mergulhando, Borne-mergulham o cuidado, placas de ágar, pontas. A adaptação protocolo curto do bySteve descrito Clough e Andrew dobrou-se, universidade de Illinois no Urbana-urbana-Champaign. - [transformação lida de Arabidopsis com retratos]

Categoria: Protocolos Do Organelle Da Pilha: Protocolos Subcellular Do Fractionation: Protocolos Da Isolação De Peroxisome

Peroxisomes de uns eukaryotes mais elevados, os glycosomes dos kinetoplastids, & os glyoxysomes das plantas são os organelles microbody relacionados que executam as funções metabolic diferindo costuradas a seus ambientes celulares. O relacionamento evolucionário próximo destes organelles é evidenciado o mais claramente pelo conservation das proteínas envolvidas na importação da proteína da matriz e o biogenesis. glycosome pode ser visto como um ramo do lineage peroxisomal com funções metabolic adicionais, especificamente glycolysi - [biogenesis e função lidos de Peroxisomes e de Glycosomes]

Categoria: Protocolos Da Biologia Da Planta: Proteínas de planta, peptides e antígenos

BN-PAGE transformou-se o método da escolha para a investigação dos complexos respiratory da proteína das correntes de transferência do elétron de uma escala dos organismos. Permite a separação em duas dimensões de jogos extremamente hydrophobic da proteína para a análise e fornece também a informação em suas interações nativas. Nesta revisão nós discutimos as potencialidades de BN-PAGE no proteomics e a investigação mais larga de interações de protein:protein com um foco em seu uso e o potencial na ciência de planta. - [PÁGINA Azul-Nativa lida nas plantas: Uma ferramenta na análise de interações da Proteína-Proteína]

Categoria: Protocolos Da Biologia Da Planta: Protocolos Do Genetics De Arabidopsis

O método é preparando chromosomes dos únicos buds da flor do thaliana do A.. Não mata as plantas permitindo a determinação de seu número do chromosome durante todo o desenvolvimento. Inclui: Preparações de Arabidopsis; Preparação do chromosome; Manchando Chromosomes. - [propagações lidas do chromosome dos buds da flor do protocolo do thaliana de Arabidopsis]

Categoria: Protocolos Da Biologia Da Planta

Em a maioria de habitats naturais, Arabidopsis é um anuário do inverno: Suas sementes germinate na queda, as plantas novas sobrevivem o inverno, os meristems floral emergem na mola, e somente as sementes sobrevivem os meses do verão. A maioria de variedades comuns do laboratório da flor de Arabidopsis dentro de 4 semanas do germination, e das sementes podem ser coletadas após 4-6 semanas adicionais. - [cultivation lido do protocolo de Arabidopsis]

Categoria: Protocolos Da Biologia Da Planta: Protocolos Do Genetics De Planta

O gene virus-induced que silencia (VIGS) usa um vírus entregar uma seqüência de um gene do interesse em uma planta do anfitrião. O vírus que carrega o fragmento do gene do interesse deve ser capaz do replication se o dsRNA dever ser produzido. Uma ou dois folhas são inoculadas com as tensões do agrobacterium que carregam o vetor de VIGS que possui o fragmento do gene. Os replicates do vírus então e as propagações durante todo a planta, silenciar mediar. - [entrega lida do dsRNA em plantas pela metodologia de VIGS]

Categoria: Protocolos Da Biologia Da Planta: Protocolos Da Isolação do RNA do Dna Da Planta

O protocolo original do miniprep do DNA do maize é usado extensivamente para muitos espécie da planta e tecidos diferentes. Esta versão ligeiramente modificada é aceitável para a maioria de extrações do DNA. O procedimento tem a vantagem de isolar o DNA do material de planta muito ràpidamente. O procedimento requer um table-top perfur-pressiona (homogenizer mechanized). - [isolação lida do DNA Microprep do protocolo das plantas]

Categoria: Protocolos Da Biologia Da Planta: Protocolos Da Isolação do RNA do Dna Da Planta

O protocolo original do miniprep do DNA do maize é usado extensivamente para muitos espécie da planta e tecidos diferentes. Esta versão ligeiramente modificada é aceitável para a maioria de extrações do DNA. O procedimento tem a vantagem da velocidade e seu uso de reagents baratos. - [isolação lida do DNA Miniprep do protocolo das plantas]

Categoria: Protocolos Da Biologia Da Planta: Protocolos Do Genetics De Arabidopsis

O EMS é usado nas concentrações que induzem mutations múltiplos do ponto em cada planta, tais que os alleles do mutant de um locus específico estão encontrados em uma taxa de ~1 em plantas de 2000-5000 M2. Esta taxa elevada do mutagenesis faz possível a seleção de relativamente poucas plantas para encontrar aqueles com o phenotype do interesse, uma vantagem particular se a tela for laborious ou se somente um número pequeno do mutate dos genes ao phenotype requerido. - [mutagenesis lido do EMS do protocolo da semente de Arabidopsis]

Categoria: Protocolos Da Biologia Da Planta: Protocolos Do Genetics De Arabidopsis

O protocolo descreve o uso do ammonium do glufosinate selecionar plantas transformadas de Arabidopsis. A vantagem principal da seleção do ammonium do glufosinate é que pode ser executada nas plantas que crescem no solo e não requer o uso de técnicas sterile. - [seleção lida do ammonium de Glufosinate do protocolo transformado de Arabidopsis]

Categoria: Protocolos Do Microscopy: Protocolos Da Imagem latente Da Viv-Pilha

Saques de GFP como um marcador molecular que possa ser imaged dinâmicamente em pilhas vivas, em seu formulário nativo & como uma fusão a outras proteínas. Para a imagem latente de GFP, as plantas apresentam o desafio do autofluorescence do chlorophyll, lignified paredes de pilha, índices vacuolar, e outros materiais da pilha, que podem obscurecer o sinal de GFP. Maximizing a relação signal-to-noise é um interesse principal, e a consideração cuidadosa deve ser dada à escolha do tecido imaged, da expressão de GFP nível, etc.. - [imagem latente lida da Viv-Pilha de GFP nas plantas]

Categoria: Protocolos Da Biologia Da Planta

O protocolo padrão para em hybridizations do situ nas plantas envolve ainda reparar o tecido fresco, encaixando o tecido na cera, secionando com um microtome e a deteção dos transcripts do interesse que usam-se etiquetados RNA-sonda. Este protocolo concentra somente em métodos nonradioactive, porque são fáceis de executar, mais rápido muito sensível e uniforme do que as técnicas que envolvem etiquetas do radioisotope. - [análise molecular e biochemical lida do protocolo de Arabidopsis]

Categoria: Protocolos Da Biologia Da Planta: Protocolos Do Genetics De Planta

Protocolo que descreve em como executar cruzes nas plantas. - [A Planta Lida Cruza O Protocolo]

Categoria: Protocolos Da Biologia Da Planta: Protocolos Da Isolação do RNA do Dna Da Planta

O thaliana do A. tem um genome haploid muito pequeno e este faz obtendo o DNA um tanto difícil. O problema o mais notável é que o DNA está contaminado geralmente com o polysaccharide que inibem enzymes da limitação as.well.as outros enzymes modificando do DNA. Este problema é resolvido o mais fàcilmente usando as plantas novas que não acumularam tanto polysaccharide quanto umas plantas mais velhas. Os mais melhores resultados são obtidos com plantas que são borne de duas a três semanas germinated. - [Protocolo Lido Da Extração do Dna Da Planta]

Categoria: Protocolos Da Proteína: Extração Da Proteína Do Tecido

Isolação e análise da proteína das plantas. T. Rife. Departamento da biologia, universidade de James Madison. Harrisonburg, VA - [isolação e análise lidas da proteína das plantas]

Categoria: Protocolos Do Microscopy: Protocolos Do Microscopy De Confocal

O protocolo descreve uma maneira útil observar o desenvolvimento dos embriões, as.well.as os meristems & o primordia novo que tornam-se no apex do tiro pelo microscopy confocal após ter manchado os núcleos com iodide do propidium. O número das pilhas pode exatamente quantified em um meristem ou no primordia novo. Porque as pilhas embryonic & meristematic são enchidas pela maior parte para fora por seus núcleos, é mais fácil à imagem somente os núcleos. Este método permite a análise de inteiro-monta o material, que reconstructed mais fàcilmente. - [protocolo lido para manchar nuclear das plantas para o microscopy de Confocal]

Categoria: Protocolos Da Biologia Da Planta: Protocolos Da Transformação De Arabidopsis

Arabidopsis pode estàvel ser transformado usando transferência tumefaciens-mediada agrobacterium de T-DNA. Nós descrevemos a geração de plantas transgenic através da transformação da raiz na cultura do tecido, que pode ser útil para transformar mutants sterile. - [transformação lida da raiz do protocolo de Arabidopsis]

Categoria: Protocolos Da Biologia Da Planta: Protocolos Do Genetics De Arabidopsis

Uma maneira poderosa identificar um mutation no gene do interesse e testar plantas do mutant para os phenotypes que são preditos para resultar da perda da função desse gene é pela seleção de PCR. Os pools de linhas da inserção são selecionados usando um primer que correspondem ao gene do interesse e um primer que corresponde à extremidade do elemento da inserção. A síntese de um produto indica a presença de uma inserção no gene do interesse. - [lido selecionando pools do DNA para inserções de T-DNA no protocolo dos genes de Arabidopsis]

Categoria: Protocolos Da Biologia Da Planta: Protocolos Do Genetics De Arabidopsis

Arabidopsis self-self-pollinates naturalmente, a geração do cruz-cross-progeny requer alguma intervenção pelo investigator. Este protocolo descreve a geração e a coleção das sementes cruzando plantas apropriadas do pai de Arabidopsis. - [Lido Ajustar Acima Arabidopsis Cruza O Protocolo]

Categoria: Protocolos Da Biologia Da Planta: Protocolos Da Transformação De Arabidopsis

Protocolo para uma transformação simplificada de Arabidopsis. Encontrado que os sais do MS, o hormone, etc. não fazem nenhuma diferença, que o OD das bactérias não faz a muita de uma diferença, que o vácuo não faça mesmo a muita de uma diferença tão longa como você tem uma quantidade decent de presente do surfactant. A saúde de planta é ainda um fator principal - as plantas fecund saudáveis fazem uma diferença grande! Com este método você deve poder conseguir taxas da transformação acima de 1%. - [Protocolo Simples Lido Da Transformação De Arabidopsis]

Categoria: Protocolos Da Biologia Da Planta: Protocolos Do Genetics De Planta

Este procedimento, que usa um protocolo da transformação da raiz, fornece um método rápido avaliando a expressão do gene em raizes de Arabidopsis. É útil para testar construções do gene de promoter:reporter, para expressar os genes, o overexpression de que é letal em plantas inteiras, e para transformar as raizes das plantas que são recalcitrant às técnicas convencionais da transformação. O protocolo foi usado com sucesso com ecotypes dos w, do No-0, e do RLD. - [expressão lida de Transgene em raizes regeneradas]