fragmente protocolos

Categoria: Protocolos virais da cultura e da isolação: Protocolos virais da isolação

O protocolo descreve a grande réplica do ADN do fragmento por proteínas de Vírus adenóide usando TP-DNA como o molde. - [Protocolo lido do ensaio da réplica do ADN do vírus adenóide]

Categoria: Protocolos da cromatografia: Protocolos da cromatografia de afinidade

A proteína de recombinação ou um fragmento bioactive quimicamente sintetizado são imobilizados na resina e usados como uma ponta de prova para capturar proteínas de interação diretamente de um extrato da pilha.  as proteínas Afinidade-purified são fraccionadas pela electroforese do gel e visualizadas pela mancha de Coomassie.  As proteínas que interagem são identificadas especificamente comparando este perfil do gel a um obtido dos lysates da pilha passados sobre uma resina do controle que falta a proteína imobilizada da ponta de prova. - [Purificação lida da afinidade de proteínas de interação do protocolo de Lysates da pilha]

Categoria: Protocolos do PCR: PCR DE AFLP

Ulrich G. Mueller e L. LaReesa Wolfenbarger. Os polimorfismo amplificados do comprimento do fragmento (AFLPs) são a reacção em cadeia do polymerase (PCR) - marcadores baseados para a seleção rápida da diversidade genética. AFLP. ÁRVORE outubro 1999 - [pdf genotyping e tomando as impressões digitais de AFLP lido da revisão]

Categoria: Protocolos do PCR: PCR DE AFLP

Polimorfismo amplificados e Microsatellites do comprimento do fragmento: Uma perspectiva phylogenetic. P. juliano Robinson, Stephen A. Harris. Que são AFLPs e como eles são produzidos? Como AFLPs foi usado? Problemas? Enzimas e primeiras demão da limitação. AFLP Reproducib - [polimorfismo amplificados lidos e Microsatellites do comprimento do fragmento]

Categoria: Protocolos do PCR: PCR DE AFLP

Uma introdução a AFLP e a fAFLP. Marque E. Berres, universidade de Wisconsin. O polimorfismo amplificado do fragmento-comprimento (AFLP) ou sua versão fluorescente (fAFLP) são uma tecnologia tomando as impressões digitais PCR-baseada. AFLP envolve basicamente a limitação do ADN genomic - [lido uma introdução a AFLP e a fAFLP]

Categoria: Protocolos do PCR: Protocolos do clonagem do PCR

Os pares de primeiras demão do oligonucleotide usadas no PCR são projetados frequentemente com os locais da limitação em suas 5 ' regiões.  Em muitos casos, os locais são diferentes nas duas primeiras demão.  Neste caso, a amplificação gera um fragmento do alvo cujos os términos carreg agora os locais novos da limitação que podem ser usados para o clonagem direcional em vetores do plasmídeo.  O fragmento purified e o vetor são digeridos com as enzimas apropriadas da limitação, ligados junto, e transformados em Escherichia Coli. - [Produtos clonando lidos do PCR por Adição de locais da limitação aos términos do protocolo amplificado do ADN]

Categoria: Protocolos do clonagem: Protocolos do Mutagenesis

Esta aproximação pode ser usada para suprimir de um fragmento de todo o lenth ou para introduzir mutações de ponto em um seqence do ADN. - [Lido criando um apagamento pelo protocolo de emenda do PCR]

Categoria: Protocolos da biologia da planta: Protocolos da genética de planta

O gene Virus-induced que silencia (VIGS) usa um vírus para entregar uma seqüência de um gene do interesse em uma planta de anfitrião. O vírus que carreg o fragmento do gene do interesse deve ser capaz da réplica se o dsRNA deve ser produzida. Uma ou dois folhas são inoculadas com as tensões da agrobactéria que carreg o vetor de VIGS que possui o fragmento do gene. Os replicates do vírus então e as propagações durante todo a planta, silêncio da negociação. - [Entrega lida do dsRNA em plantas pela metodologia de VIGS]

Categoria: Protocolos do ADN: ADN que arranja em seqüência protocolos: Dideoxy negociou arranjar em seqüência protocolos

Protocolo para reações arranjando em seqüência dideoxy-negociadas usando o fragmento de Klenow do polymerase de ADN de Escherichia Coli mim e moldes single-stranded do ADN. - [Lido Dideoxy-negociado arranjando em seqüência reações usando o fragmento de Klenow do Polymerase de ADN de Escherichia Coli]

Categoria: Protocolos de E Coli: Protocolos do ácido nucleico de E coli

Protocolo para reações arranjando em seqüência dideoxy-negociadas usando o fragmento de Klenow do polymerase de ADN de Escherichia Coli mim e moldes single-stranded do ADN. - [Lido Dideoxy-negociado arranjando em seqüência reações usando o fragmento de Klenow do Polymerase de ADN de Escherichia Coli mim]

Categoria: Protocolos da electroforese do ácido nucleico: Protocolos pulsados da electroforese do gel do campo

O protocolo para a recuperação direta de fragmentos do ADN do pulsar-campo coagula-se. Uma fatia do gel que contem um fragmento do ADN resolvido pela electroforese do gel do pulsar-campo é tratada com o agarase.  O ADN liberado pode ser usado como uma carcaça para a ligadura ou a limitação sem purificação mais adicional. - [A recuperação direta lida de fragmentos do ADN do Pulsar-campo coagula o protocolo]

Categoria: Protocolos do clonagem: Protocolos do vetor

O clonagem direcional exige que o vetor do plasmídeo esteja fendido com as duas enzimas da limitação que geram términos incompatíveis e que o fragmento do ADN a ser clonado carreg os términos que é compatível com o aqueles do vetor dobro fendido. - [O clonagem direcional lido no plasmídeo Vectors o protocolo]

Categoria: Protocolos do ADN: Protocolos da extração do ADN: Geles de Polyacrylamide da extração do ADN

Purificação do fragmento do ADN do Agarose ou do acrilamido. O protocolo para fragmentos de 200 bp ao kb 10 a purificação do agarose é ideal.  Para os fragmentos menores (20 bp a 400 bp) a purificação do acrilamido é preferida. - [Purificação lida do fragmento do ADN do Agarose ou do acrilamido]

Categoria: Protocolos da purificação do ácido nucleico: Protocolos da isolação do ADN

Protocolo para a purificação do fragmento do ADN do agarose ou do acrilamido. Para fragmentos de 200 bp ao kb 10 a purificação do agarose é ideal.  Para os fragmentos menores (20 bp a 400 bp) a purificação do acrilamido é preferida. - [Purificação lida do fragmento do ADN do protocolo do Agarose ou do acrilamido]

Categoria: Protocolos do ADN: Protocolos da extração do ADN: Protocolos da extração do ADN do gel do Agarose

Purificação do fragmento do ADN do protocolo do Agarose. Este protocolo é o melhor para fragmentos de 200 bp ao kb que 10 a purificação do agarose é ideal. Para os fragmentos menores (20 bp a 400 bp) a purificação do acrilamido é preferida. - [Purificação lida do fragmento do ADN do protocolo do Agarose]

Categoria: Protocolos da cromatografia: Protocolos da cromatografia de coluna

Fragmente a purificação em colunas da rotação de Sephacryl S-500, ovas de Bruce A. - [Purificação lida do fragmento em colunas da rotação de Sephacryl S-500]

Categoria: Protocolos do ADN: protocolos da biblioteca do cDNA: protocolos da construção da biblioteca do cDNA

Arranjar em seqüência da espingarda de um grande segmento do ADN envolve a fragmentação aleatória da região do alvo nos segmentos menores que são clonados subseqüentemente em um vetor do bacteriófago M13. O objetivo é criar uma biblioteca dos clone de sobreposição que fornecem pelo menos a cobertura quíntupla sobre o comprimento inteiro do fragmento do alvo. - [A geração lida de uma biblioteca aleatòria de sobrepr o ADN introduz o protocolo]

Categoria: Protocolos da electroforese do ácido nucleico: Protocolos da electroforese do ADN: Electroforese do ADN em protocolos dos geles de Polyacrylamide

O “esmagamento e embebe” o método, que trabalha melhor para o kb de DNAs <1 no tamanho, pode ser usado para recuperar ambo o singleand DNAs double-stranded dos geles de polyacrylamide.  O rendimento do ADN eluted varia <30% a >90% dependendo do tamanho do fragmento do ADN. - [A isolação lida de fragmentos do ADN dos geles de Polyacrylamide pelo esmagamento e embebe o protocolo do método]

Categoria: Protocolos das interações da proteína do ADN: Protocolos do ensaio do Footprinting do Dnase

Dnase eu sou usado para fragmentar um ADN radiolabeled do alvo na presença e na ausência de um extrato nuclear.  Uma “pegada” é gerada quando uma proteína liga ao alvo e protege um segmento específico do ADN da atividade nucleolytic do Dnase I. Comparando a mobilidade electrophoretic do Dnase eu produtos de segmentação àquelas de uma escada da seqüência derivada do mesmo fragmento do ADN, as posições das seqüências do ADN reconhecidas por proteínas ADN-obrigatórias posso ser determinado. - [Lido traçando locais Proteína-obrigatórios no ADN pelo protocolo do Footprinting de Dnase Eu]

Categoria: Genética e genómica: Protocolos de Genotyping: PCR Genotyping

Usando a tecnologia molecular do marcador nos estudos na diversidade genética da planta. tecnologias ADN-baseadas: polimorfismo amplificados tecnologias PCR-baseados do comprimento do fragmento (AFLPs. Inclui: Tecnologia de AFLP, ponto por ponto; Digestão e ligadura do ADN; PCRs e deteção; Sumariando a tecnologia. - [Polimorfismo amplificados tecnologias PCR-Baseados lidos do comprimento do fragmento (AFLPs)]

Categoria: Protocolos virais da manipulação: Protocolos da manipulação de Lamda do fago

Muitos vetores da recolocação (por exemplo, a série, {lambda} 2001 de EMBL, e TRAÇO {lambda}) contêm uma série de locais da limitação, arranjada em orientações opostas, em cada extremidade do fragmento central do stuffer. Digestão destes vetores com os dois rendimentos de enzimas diferentes da limitação deixados e braços direitos, um fragmento do stuffer, e segmentos curtos dos locais polycloning. Estes podem facilmente ser removidos dos braços pela precipitação diferencial com a cromatografia do isopropanol ou da girar-coluna. - [Preparação lida do ADN do lambda do bacteriófago fendido com protocolo de duas enzimas da limitação]

Categoria: Protocolos da modificação do ácido nucleico: Protocolos de Radiolabeling do ácido nucleico

Neste procedimento, a síntese do cDNA é realizada na presença de saturar concentrações de todos os quatro dNTPs e quantidades de traço de um único dNTP radiolabeled.  Após a hibridação da subtração, o cDNA single-stranded enriquecido é radiolabeled à atividade específica elevada em uma segunda reação sintética pela extensão de primeiras demão aleatórias do oligonucleotide usando o fragmento de Klenow do polymerase de ADN de Escherichia Coli. - [Radiolabeling lido de pontas de prova subtraídas do cDNA pelo protocolo aleatório da extensão do Oligonucleotide]

Categoria: Protocolos da electroforese do ácido nucleico: Protocolos da electroforese do ADN: A electroforese do ADN no Agarose coagula protocolos

Um fragmento do gel que contem uma faixa do ADN é extirpado e digerido com agarase, que hydrolyzes o polímero aos subunits do disaccharide.  O ADN liberado purified então pela extração do fenol e pela precipitação do álcool etílico.  O método trabalha bem para DNAs que varia no tamanho do kb <5 ao kb >20. - [Recuperação lida do ADN dos geles do Agarose da Baixo-derreter-temperatura: Digestão Enzymatic com protocolo de Agarase]

Categoria: Protocolos da biologia molecular: Digestão da enzima da limitação

Guia de pesquisa de defeitos da enzima da limitação. Fermentas. Problemas: ADN não digerido ou incompleta digerido, faixas adicionais atípicas, zonas difundidas do ADN, baixa eficiência da ligadura do fragmento. - [Guia de pesquisa de defeitos lido da enzima da limitação]

Categoria: Protocolos da citogenética: Protocolos in situ da hibridação do RNA

Protocolo para o RNA que etiqueta in vitro pela transcrição do ADN com mistura de rotulagem da ESCAVAÇÃO, do RNA da biotina ou da fluoresceína. Um fragmento do PCR que tenha o promotor apropriado ligado aos seus 5 ' - extremidades pode igualmente serir como um molde da transcrição. O procedimento descrito incorpora um nucleotide modificado (ESCAVAÇÃO, biotina, ou Fluoresceína-UTP) em aproximadamente cada 20 - 2a posição nos transcritos. - [RNA lido que etiqueta in vitro pela transcrição do ADN com mistura de rotulagem da ESCAVAÇÃO, do RNA da biotina ou da fluoresceína]