protocolos da expressão

Categoria: Protocolos da isolação e da cultura da pilha preliminar: Protocolos de Microdissection da captação do laser: Preparação do tecido para protocolos de LCM

Pilhas ou tecidos específicos dos isolados de LCM das amostras montadas em corrediças do microscópio. As amostras são vistas através de uma película thermoplastic que seja anexada a uma tampa do tubo do microcentrifuge. O calor localizado, causado pela aplicação de um pulso do laser, funde a membrana às pilhas do interesse, que podem então ser colhidas para uma análise mais adicional. O RNA e as proteínas podem purified das pilhas isoladas, permitindo análise detalhada da expressão de gene. Este protocolo é dividido em três estágios. - [Lido (LCM): Preparação e secção de blocos congelados do tecido e purificação do RNA do Cel isolado]

Categoria: Protocolos da biologia da planta: Proteínas, Peptides e antígenos de planta

O pH é um parâmetro importante que controla muitos caminhos metabólicos e sinalizando em pilhas vivas. Os indicadores de pH fluorescentes de recombinação (pHluorins) entraram a moda para o pH celular da monitoração. São derivados do Aequorea o mais popular victoria GFP (Avoirdupois-GFP). Aqui, nós apresentamos um repórter que fluorescente novo do pH a proteína da laranja seapen o gurneyi de Ptilosarcus (Pinta-GFP) e comparamos suas propriedades com os pHluorins para a expressão e o uso nas plantas. - [Lido uma ponta de prova fluorescente nova do pH para a expressão nas plantas]

Categoria: Protocolos da biologia da planta: Cultura do tecido de Arabidopsis

Experiências incluídas para a análise da epiderme da planta: Indução esteróide da expressão de gene em Arabidopsis; Moldes da réplica e moldes da epiderme da planta. - [Análise lida das experiências da epiderme da planta]

Categoria: Genética e genómica: Protocolos da genética do cancro

Anatomia de um estudo comparativo da expressão de gene. Inclui: Escolhendo populações da pilha; extração do mRNA e transcrição reversa; Rotulagem fluorescente dos cDNA; Hibridação a um Microarray do ADN; Fazendo a varredura da disposição cruzada; Interpretando a imagem feita a varredura. - [Anatomia lida de um estudo comparativo da expressão de gene]

Categoria: Protocolos do Microarray: Protocolos da análise do Microarray

Informação na anatomia de um estudo comparativo da expressão de gene.  Inclui: Escolhendo populações da pilha; extração do mRNA e transcrição reversa; Rotulagem fluorescente dos cDNA; Hibridação do microarray do ADN; Fazendo a varredura da disposição cruzada; Interpretando a imagem feita a varredura. - [Anatomia lida de um estudo comparativo da expressão de gene]

Categoria: Protocolos do Transfection: Protocolos estáveis do Transfection

O AfCS está utilizando a tecnologia antisentido para manipular a expressão da proteína da sinalização nos 264.7 CRUS macrófago-como a linha celular. Isto pode ser conseguido pelo transfection de oligonucleotides antisentido gene-específicos (ASOs). O seguinte procedimento envolve o transfection de ASOs em 264.7 pilhas CRUAS usando o reagente do transfection de FuGENE 6. Subseqüentemente, o RNA ou a proteína total isolada destas pilhas transfected podem ser usados para avaliar o nível de knockdown do mRNA ou da proteína, respectivamente. - [Transfection antisentido lido do Oligonucleotide de 264.7 pilhas CRUAS com FuGENE 6 em um prato 24-Well]

Categoria: Protocolos do clonagem: Protocolos da expressão da proteína de Baculovirus

Protocolo para a análise de Baculovirus da expressão nonsecreted da proteína. - [Análise lida de Baculovirus do protocolo da expressão da proteína de Nonsecreted]

Categoria: Protocolos da cultura de pilha: Protocolos da cultura de pilha do inseto

Protocolos da expressão da proteína de Baculovirus. Inclui protocolos: Protocolo de Cotransfection; Análise da expressão nonsecreted da proteína; Pilhas crescentes e de congelações do inseto. - [Protocolos lidos da expressão da proteína de Baculovirus]

Categoria: Protocolos do clonagem: Protocolos da expressão da proteína de Baculovirus

Protocolos para a expressão da proteína de Baculovirus. - [Protocolos lidos da expressão da proteína de Baculovirus]

Categoria: Biologia de pilha e cultura de pilha: Protocolos de Cytometry do fluxo

O protocolo usa os anticorpos específicos acoplados a um de quatro fluorochromes: isothiocyanate de fluoresceína (FITC), R-phycoerythrin (PE), clorofila-um do peridinin (PcP), e allophycocyanin (APC). Estes fluorochromes podem ser usados simultaneamente para manchar e analisar os testes padrões da expressão de quatro proteínas diferentes na mesma amostra. As populações manchadas fluorochrome da pilha são analisadas usando um cytometer do fluxo de duplo-laser de FACSCalibur. - [Caracterização lida das pilhas pelo protocolo de Cytometry do fluxo]

Categoria: Imunologia: Protocolos da pilha de B

Os Fluorochromes podem ser usados simultaneamente para manchar e analisar os testes padrões da expressão de quatro proteínas diferentes na mesma amostra. As populações manchadas fluorochrome da pilha são analisadas usando um cytometer do fluxo de duplo-laser de FACSCalibur. - [Caracterização lida das pilhas pelo protocolo de Cytometry do fluxo]

Categoria: Sinalizando protocolos do Transduction do sinal: Protocolos de Chemokine

Ensaio da expressão do receptor de Chemokine pelo fluxo Cytometry. Laboratório de Mullins. Reagentes, protocolo e procedimento detalhado. - [Ensaio lido da expressão do receptor de Chemokine pelo fluxo Cytometry]

Categoria: Protocolos da neurociência: Protocolos do aperto de correcção de programa

Gravação combinada da braçadeira de correcção de programa e expressão do mRNA que perfila nos neurônios individuais. - [Gravação combinada lida da braçadeira de correcção de programa e expressão do mRNA que perfila nos neurônios individuais]

Categoria: Protocolos do ADN: Protocolos da biblioteca do ADN de Genomic

Este estágio sumaria como construir uma biblioteca do cDNA em um vetor mamífero, usando jogos comerciais. Estes jogos estão disponíveis de diversos fabricantes e incluem geralmente todos os reagentes exigidos. - [Construção lida de bibliotecas do cDNA em vetores Eukaryotic da expressão para a construção e a seleção]

Categoria: Protocolos da isolação e da cultura da pilha preliminar: Protocolos de Microdissection da captação do laser

Três jogos de Ambion foram usados para dosar miRNAs específicos e para detectar a expressão diferencial do miRNA em várias regiões do cérebro do rato e nos tipos da pilha isolados pelo microdissection da captação do laser (LCM). Estas técnicas podem ser aplicadas a estudar o miRNA em outros espécie, tecidos, e tipos da pilha. Inclui: Obtenha amostras de Microdissected da captação do laser; Isole o miRNA das amostras de LCM; Dose o miRNA pelo qRT-PCR. - [Lido detecte e dose MicroRNA em amostras de Microdissection da captação do laser]

Categoria: Protocolos da tecnologia de RNAi

Informação em como detecte e dose MicroRNA em amostras do microdissection da captação do laser. Inclui: Obtenha amostras de Microdissected da captação do laser; Isole o miRNA das amostras de LCM; Dose o miRNA pelo qRT-PCR; Deteção do miRNA no tecido de Microdissected do cérebro do rato pelo qRT-PCR; Expressão diferencial de MicroRNA no tecido de cérebro inteiro comparado a uma população mais homogênea das pilhas. - [Lido detecte e dose MicroRNA em amostras de Microdissection da captação do laser]

Categoria: Protocolos da citogenética: O tecido in situ da hibridação seciona protocolos

O protocolo para a deteção dos mRNAs em cryosections da utilização do sistema cardiovascular Escavar-etiquetou pontas de prova do RNA. O protocolo foi aperfeiçoado de um protocolo usando pontas de prova do RNA 35S-labeled. Reserva detectar a expressão de baixos mRNAs abundantes no sistema cardiovascular, por exemplo do cytokine proinflammatory GM-CSF em artérias coronárias humanas normais, e de IL6 e de gp130 em corações de failing humanos. O protocolo pode ser combinado com o immunohistochemistry. - [Deteção lida dos mRNAs em Cryosections do sistema cardiovascular usando pontas de prova Escavar-Etiquetadas do RNA]

Categoria: Imunologia: Protocolos da pilha de B

A ativação da pilha de B pode ser dosada indiretamente pela produção de análise do anticorpo ou diretamente medindo as mudanças celulares que ocorrem imediatamente depois da exposição a um sinal da ativação. Fornece métodos para a última aproximação (direta)--a saber, métodos para determinar parâmetros adiantados da ativação da pilha de B tais como aumentos na concentração ionizada intracellular do cálcio [Ca2+] I, no tamanho de pilha, e na classe de MHC expressão do Ii-antígeno. - [Eventos adiantados lidos no protocolo da ativação do linfócito de B]

Categoria: Ensaios do gene do repórter

Protocolo que descreve o ecdysone como o regulador da expressão de gene inducible em pilhas mamíferas. - [Ecdysone lido como o regulador da expressão de gene Inducible em pilhas mamíferas]

Categoria: Biologia de pilha e cultura de pilha: Protocolos de Cytometry do fluxo

Protocolo para estimar o número das moléculas CD38 nos linfócitos de CD8+ T de indivíduos HIV-contaminados. Inclui: RECOMENDAÇÃO DO VENDEDOR PARA PE-CD38 E PE-CD4; VALIDAÇÃO DE LINEARIDADES E DA SENSIBILIDADE LOGARÍTMICAS DO AMPLIFICADOR; CONSERVAÇÃO DO NÍVEL DE EXPRESSÃO DO ANTÍGENO CD4 EM LINFÓCITOS DE CD4+ E DE SEU USO COMO UM PADRÃO BIOLÓGICO PARA A CARACTERIZAÇÃO DO INSTRUMENTO DO FLUXO CYTOMETER; DETERMINAÇÃO DO NÚMERO DAS MOLÉCULAS CD38 POR A PILHA DE CD8+; etc… - [lido estimando o número das moléculas CD38 nos linfócitos de CD8+ T de indivíduos HIV-Contaminados]

Categoria: Protocolos de E Coli: Protocolos da proteína de E coli

Protocolo para a expressão e a purificação de suas proteínas etiquetadas em Escherichia Coli. - [Expressão e purificação lidas de suas proteínas etiquetadas no protocolo de Escherichia Coli]

Categoria: Protocolos de recombinação da proteína

Expressão de um P-tipo prokaryotic ATPase nas membranas de plasma de Escherichia Coli e da purificação pela cromatografia de Ni2+-affinity. Procedimentos biológicos em linha - [expressão lida de um P-tipo prokaryotic ATPase nas membranas de plasma de Escherichia Coli e da purificação por Ni2+-affin]

Categoria: Protocolos de E Coli: Protocolos da proteína de E coli

Protocolo para a expressão de genes clonados em Escherichia Coli usando promotores IPTG-inducible. O protocolo descreve como (1) clonar as seqüências clonadas que codificam frames de leitura abertos nos plasmídeo que carreg promotores IPTG-inducible, (2) para aperfeiçoar a expressão de proteínas do alvo nos transformants que carreg estes recombinants, e (3) escalam-acima a produção de proteínas extrangeiras. - [Expressão lida de genes clonados em Escherichia Coli usando o protocolo IPTG-inducible dos promotores]

Categoria: Protocolos virais da manipulação: Protocolos da manipulação de Lamda do fago

O protocolo descreve como (1) clonar as seqüências clonadas que codificam frames de leitura abertos nos plasmídeo que carreg promotores do pL do bacteriófago {lambda}, (2) para aperfeiçoar a expressão de proteínas do alvo nos transformants que carreg estes recombinants, e (3) escalam-acima a produção de proteínas extrangeiras. - [Expressão lida de genes clonados em Escherichia Coli usando o protocolo do promotor do lambda pL do bacteriófago]

Categoria: Protocolos de E Coli: Protocolos da proteína de E coli

Protocolo para a expressão de genes clonados em Escherichia Coli usando o promotor do lambda pL do bacteriófago. O protocolo descreve como (1) clonar as seqüências clonadas que codificam frames de leitura abertos nos plasmídeo que carreg promotores do lambda pL do bacteriófago, (2) para aperfeiçoar a expressão de proteínas do alvo nos transformants que carreg estes recombinants, e (3) escalam-acima a produção de proteínas extrangeiras. - [Expressão lida de genes clonados em Escherichia Coli usando o protocolo do promotor do lambda pL do bacteriófago]