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Rotulagem do ADN de Genomic do protocolo dos Microarrays

Os microarrays do ADN são um arranjo requisitado das moléculas do ADN complementares aos genes do interesse que “são manchados” pelo equipamento robótico em uma carcaça da placa de vidro. A expressão dos genes nas pilhas pode ser monitorada com microarrays preparando o cDNA do mRNA das pilhas do interesse e medindo a hibridação ao microarray. Este protocolo descreve a rotulagem do ADN genomic para o uso como uma ponta de prova para a hibridação ao cDNA manchado na disposição.

A preparação do protocolo do Microarray do ADN fluorescente sonda do mRNA humano

Esta preparação do protocolo do Microarray de pontas de prova fluorescentes do ADN do protocolo humano do mRNA descreve a produção de pontas de prova etiquetadas com as tinturas fluorescentes, Cy3 e Cy5, seguindo a síntese do cDNA do mRNA humano e a hibridação das pontas de prova aos microarrays do ADN.

Parafine o encaixotamento do protocolo

Parafine o encaixotamento do protocolo para o perfilamento molecular. Esta parafina que encaixa o protocolo descreve o processamento dos tecidos em seções depois da fixação do álcool etílico. O perfilamento molecular (PM) é uma técnica que seja usada para visualizar os testes padrões globais da expressão do RNA ou da expressão da proteína em vários tipos da pilha e processos da doença.

Protocolo imobilizado da seleção do anticorpo do fago do antígeno

Um protocolo para a seleção de anticorpos do fago usando o antígeno imobilizado. Este método descreve a seleção dos anticorpos das bibliotecas do anticorpo do bacteriófago que reconhecem um antígeno específico. A biblioteca do indicador do fago de partículas deindicação do fago é expor ao antígeno anexado a uma carcaça contínua (tubos de Nunc Immuno™). As partículas do fago com afinidade para o antígeno ligam ao antígeno imobilizado e são selecionadas da biblioteca do fago que expressa anticorpos.

Construindo bibliotecas do Aleatório-Peptide para o indicador do fago

O protocolo descreve a construção de uma grande (10^8 a 10^10) biblioteca aleatória preliminar do fago do peptide nas tensões fUSE5 ou f88-4.

Ensaio da atividade da quinase do Histone H1

Protocolo do ensaio da atividade da quinase do Histone H1. Este protocolo descreve analisar a atividade da quinase de uma quinase putativo usando o Histone H1 como a carcaça. O Histone H1 é a carcaça canônica da quinase neste tipo de ensaio. O Phosphorylation do Histone H1 é avaliado pela electroforese do gel de SDS-Polyacrylamide seguida pela autoradiografia.

Electrotransformation de BMH 81-17mut S para isolar mutantes Local-Dirigidos do dsDNA

Este protocolo descreve o electroporation da tensão do mut S de BMH 81-17 que é recomendada para o tranformation do local dirigiu o mutagenesis do dsDNA (veja o protocolo no Mutagenesis Local-Dirigido no ADN encalhado dobro). O mut S de BMH 81-17 é uma tensão defeituosa de Escherichia Coli do reparo da má combinação (mut S). A probabilidade que as duas mutações querem o cosegregate durante o primeiro círculo da réplica do ADN é aumentada nesta tensão.

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