protocolos da centrifugação

Categoria: Protocolos e métodos gerais da pesquisa: Centrifugue o uso e a centrifugação

Rotores, tubos do rotor, força centrífuga relativa, comparações do rotor. Artigo - [informação lida da centrifugação]

Categoria: Protocolos e métodos gerais da pesquisa: Centrifugue o uso e a centrifugação

Rotores de equilíbrio, pontas na centrifugação. Cuidados para o uso do centrifugador. - [Artigo e pontas lidos do centrifugador]

Categoria: Biologia de pilha e cultura de pilha

O fraccionamento da pilha de componentes celulares usando Percoll uma solução sintética, colloidal de polyvinylpyrrolidone revestiu o silicone, projetado especificamente para a centrifugação do sedimentation. Percoll transforma-se uma coisa fàcil estabelecer um inclinação de densidade linear. As separações do Organelle são muito mais fáceis de realizar em inclinações de densidade de Percoll do que em inclinações da sacarina. - [Protocolo lido de Percoll do inclinação de densidade do equilíbrio]

Categoria: Protocolos do Organelle da pilha: Protocolos Subcellular do fraccionamento: Protocolos da isolação da membrana

O protocolo descrito neste protocolo foi usado principalmente analisando o Golgi, o reticulum endoplasmic e a rede transporte-Golgi mas os marcadores para outros compartimentos (por exemplo ERGIC e endosomes) foram analisados igualmente. As modificações à escala da densidade do inclinação ou às condições da centrifugação influenciam a habilidade do inclinação de resolver compartimentos múltiplos. - [Fraccionamento lido de Golgi, de ER, de TGN e de outros compartimentos da membrana em inclinações pré-formados de Iodixanol]

Categoria: Protocolos do Organelle da pilha: Protocolos Subcellular do fraccionamento: Protocolos da isolação das mitocôndria

Geralmente em inclinações do iodixanol a densidade dos organelles diminui na série: os peroxisomes, mitocôndria, lisosomas, ER, Golgi, embora no discoideum de Dictyostelium, os lisosomas são mais densos do que as mitocôndria. Os inclinações de Iodixanol podem geralmente fornecer a definição satisfatória de todas estas partículas da membrana embora possa ser necessário modular os parâmetros do inclinação ou da centrifugação a fim aperfeiçoar uma separação particular. - [Fraccionamento lido das mitocôndria, dos lisosomas, do Peroxisomes, do ER e do Golgi no inclinação pré-formado de Iodixanol]

Categoria: Protocolos do lipido

Protocolo da isolação da lipoproteína usando o hemolymph do inseto. Inclui: Sangramento e centrifugação; Fraccionamento, refractometry e diálise; Lyophilization. - [Protocolo lido da isolação da lipoproteína]

Categoria: Protocolos da deteção do ácido nucleico: Protocolos de mancha do ácido nucleico

O protocolo consiste em um método para a geração de extratos cytoplasmic das pilhas mamíferas (neste caso, pilhas 293T) sem o rompimento dos polyribosomes, a separação de componentes e de polyribosomes ribosomal pela centrifugação do inclinação da sacarina, a isolação do mRNA destas frações, e deteção do mRNA pela análise do norte do borrão. - [Análise do norte lida do borrão do mRNA do protocolo mamífero dos Polyribosomes]

Categoria: Protocolos do Organelle da pilha: Protocolos Subcellular do fraccionamento

O emprego da centrifugação diferencial para preparar frações cruas de partículas subcellular dos homogenates é frequentemente uma primeira etapa necessária a uma purificação subseqüente de umas ou várias partículas em um inclinação de densidade. Este protocolo descreve o uso da centrifugação diferencial fraccionar um homogenate mamífero do fígado mas os métodos similares devem ser aplicáveis a todos os tecidos mamíferos e pilhas cultivadas. - [Preparação lida de frações Subcellular cruas pelo protocolo de Diferencial Centrifugação]

Categoria: Protocolos da proteína: Precipitação Procols da proteína

A limpeza da amostra do laboratório é uma peça necessária para a análise analítica da preparação. A remoção dos contaminadores tais como proteínas, restos de pilha e outros materiais é uma etapa importante. Isto foi feito tipicamente usando o acetonitrilo e centrifugação para granular então os restos que saem do supernant limpo. Depois que este supernatant do processo pode ser usado para uma análise mais adicional por HPLC, GC, MS e outros métodos do tandem da análise. Laboratórios do HTS. - [Precipitação lida Microplate da proteína]

Categoria: Protocolos virais

O protocolo é usado para preparar os braços de todo o vetor do bacteriófago {lambda}. - [Purificação lida dos braços do lambda do bacteriófago: Centrifugação com o protocolo dos inclinações de densidade da sacarina]

Categoria: Protocolos virais

A centrifugação isopícnica com os inclinações de CsCl é usada para preparar as partículas infecciosas do bacteriófago {lambda} da pureza a mais elevada que estão essencialmente livres de contaminar ácidos nucleicos bacterianos. - [Purificação lida de partículas de lambda do bacteriófago pela centrifugação isopícnica com os inclinações de CsCl]

Categoria: Protocolos da purificação do ácido nucleico: Protocolos da isolação do ADN: O plasmídeo do ADN prepara protocolos

Uma solução que contem o ADN do plasmídeo, saturando quantidades de brometo de ethidium, e CsCl (44% w/v) é mergulhado entre duas soluções de pouco (w/v CsCl de 35%) e da maior densidade (w/v CsCl de 59%).  Durante a centrifugação ao equilíbrio, ao ADN circular fechado do plasmídeo e às faixas lineares do formulário de DNAs em densidades diferentes. - [Purificação lida do ADN fechado da circular por Equilíbrio Centrifugação no inclinação do brometo do CsCl-Ethidium]

Categoria: Protocolos da purificação do ácido nucleico: Protocolos da isolação do ADN: O plasmídeo do ADN prepara protocolos

As soluções que contêm o ADN do plasmídeo são ajustadas a uma densidade de 1.55 g/ml com CsCl contínuo.  A tintura intercalando, o brometo de ethidium, que liga diferencial a DNAs circular e linear fechado, é adicionada então a uma concentração de 200 MU; g/ml.  Durante a centrifugação ao equilíbrio, o ADN da circular e o DNAs linear fechados dão forma a faixas em densidades diferentes. - [Purificação lida do ADN fechado da circular por Equilíbrio Centrifugação em inclinações do brometo do CsCl-Ethidium]

Categoria: Protocolos do Organelle da pilha: Protocolos Subcellular do fraccionamento: Protocolos da isolação das mitocôndria

Este protocolo descreve um inclinação descontínuo, que resolva as mitocôndria de uns organelles mais leves e mais densos. Porque a centrifugação é realizada para 4 h, a difusão criará um inclinação parcialmente contínuo e esta contribui provavelmente à definição das mitocôndria dos lisosomas mais claros. - [Purificação lida das mitocôndria mamíferas do fígado por Flutuação Através um Iodixan descontínuo pré-formado]

Categoria: Protocolos do Organelle da pilha: Protocolos Subcellular do fraccionamento: Protocolos da isolação das mitocôndria

Um procedimento tornou-se para purify simultaneamente peroxisomes e as mitocôndria do espinafre (olercea L. de Spirnacia) folheiam sob circunstâncias da viscosidade isoosmotic e baixa. Este método envolve a centrifugação diferencial do inclinação da centrifugação e de densidade em quatro camadas de Percoll. - [A purificação lida de Peroxisomes e as mitocôndria do espinafre folheiam pela centrifugação de Percoll Inclinação]

Categoria: Protocolos do Organelle da pilha: Protocolos Subcellular do fraccionamento: Protocolos da isolação de Peroxisome

Um procedimento tornou-se para purify simultaneamente peroxisomes e as mitocôndria do espinafre (olercea L. de Spirnacia) folheiam sob circunstâncias da viscosidade isoosmotic e baixa. Este método envolve a centrifugação diferencial do inclinação da centrifugação e de densidade em quatro camadas de Percoll. - [A purificação lida de Peroxisomes e as mitocôndria do espinafre folheiam pela centrifugação de Percoll Inclinação]

Categoria: Protocolos da purificação do ácido nucleico: Protocolos da isolação do ADN: O plasmídeo do ADN prepara protocolos

A contaminação de ADN do plasmídeo por fragmentos do ADN e do RNA é reduzida a um nível aceitável pela centrifugação através do cloreto de sódio de 1 M.  Este método foi planejado por Brian Semente quando era uma estudante de terceiro ciclo na Universidade de Harvard. - [Remoção lida de fragmentos pequenos do ácido nucleico das preparações do ADN do plasmídeo por Centrifugação]

Categoria: Protocolos da purificação do ácido nucleico: Protocolos da isolação do ADN: O plasmídeo do ADN prepara protocolos

O RNA e as proteínas High-molecular-weight podem ser precipitados das preparações do ADN do plasmídeo por concentrações elevadas de LiCl e ser removidos pela centrifugação low-speed. - [Remoção lida de fragmentos pequenos do ácido nucleico das preparações do ADN do plasmídeo por Precipitação com Li]

Categoria: Protocolos da purificação do ácido nucleico

O protocolo descreve o método padrão para recuperar ácidos nucleicos das soluções aquosas pela precipitação do ADN com o álcool etílico.  As quantidades do Subnanogram de ADN (e de RNA) podem quantitativa ser precipitadas com álcool etílico, ser coletadas pela centrifugação, e redissolved dentro dos minutos. - [Precipitação padrão lida do álcool etílico do ADN no protocolo dos tubos de Microcentrifuge]

Categoria: Protocolos do Organelle da pilha: Protocolos Subcellular do fraccionamento

No método da rotina descrito neste protocolo, o plasma chylomicron-livre é ajustado a 12% (w/v) o iodixanol e a amostra, enchem essencialmente um tubo aproximado de 3 ml para um rotor próximo-vertical. Durante a centrifugação VLDL, partículas de LDL e de HDL e igualmente as proteínas do plasma migram de todas as partes da amostra a sua posição flutuante final da borda da densidade no inclinação de densidade deformação. - [Subfractionation lido da lipoproteína de baixa densidade (LDL)]

Categoria: Protocolos do fermento

As membranas de plasma são isoladas do fermento Saccharomyces Cerevisiae. A parede de pilha é digerida inicialmente pelo helicase, seguido pelo lysis e pela homogeneização hypoosmotic. As membranas são preparadas pela centrifugação diferencial subseqüente. A atividade do H+-ATPase é determinada então medindo a quantidade de fosfato inorgánico liberada do ATP. - [Membrana de plasma lida H+ do fermento - protocolo do teste de Toxcity da ATPASE]