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In vitro protocolo traduzido do ensaio da quinase do MOS do Xenopus

In vitro protocolo traduzido do ensaio da quinase do MOS do Xenopus. Em resposta ao progesterone, os oocytes imaturos do Xenopus amadurecem-se aos ovos que podem ser fertilizados. A quinase de proteína do MOS é essencial para a maturação do oocyte, muito provável devido a sua habilidade de ativar a cascata da quinase do MAPA. Esta cascata da quinase do MAPA conduz eventualmente à ativação de Cdc2/cyclin B e entrada na fase de M. Neste protocolo, a quinase etiquetada do MOS é traduzida in vitro, immunopurified, e usada em um ensaio da quinase.

Protocolo da ligadura do ADN

O protocolo da ligadura do ADN descrito aqui contem as etapas exigidas para juntar-se junto usando fragmentos do ADN do plasmídeo da enzima da ligase e do ADN da inserção a fim criar um plasmídeo novo. Este plasmídeo ligado novo pode ser transformado em seguida nas bactérias competentes para produzir o ADN para mini, midi ou maxi-prepara a isolação.

' a amplificação 3 rápida do cDNA termina a RAÇA usando o protocolo do PCR

' a amplificação 3 rápida do cDNA termina a RAÇA usando o protocolo do PCR. Este protocolo contem as etapas para ' amplificação rápida do fim 3 do mRNA pelo PCR. O cDNA da primeiro-costa é sintetizado do RNA (A+) total ou poli aprontando da cauda de poly-A do mRNA usando uma primeira demão oligo do adaptador (descolamento). O cDNA é amplificado então através do PCR usando uma primeira demão gene-específica e uma primeira demão do adaptador.

Ensaio da atividade da quinase do Histone H1

Protocolo do ensaio da atividade da quinase do Histone H1. Este protocolo descreve analisar a atividade da quinase de uma quinase putativo usando o Histone H1 como a carcaça. O Histone H1 é a carcaça canônica da quinase neste tipo de ensaio. O Phosphorylation do Histone H1 é avaliado pela electroforese do gel de SDS-Polyacrylamide seguida pela autoradiografia.

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